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미생물학
0 조회수 • 2:33 분 • February 26th, 2026
표면에 부착된 박테리아와 플랑크톤성 또는 자유 부유 박테리아가 포함된 플레이트부터 시작하세요.
두 샘플 모두에 아메바 세포를 추가하세요.
각 샘플 위에 칼세인-AM(세포 투과성 염료)이 포함된 아가로스 패드를 덮어주세요.
과잉 액체를 제거하고 건조시킨 후 배양하세요.
표면에 부착된 박테리아가 있는 플레이트에서는 표면 접촉이 병원성 유전자를 상향 조절하여 독소를 발현합니다.
이 독소들은 아메바 막을 파괴하고 그 형태를 변화시킵니다.
손상된 아메바 막은 더 많은 칼세인-AM이 세포질 내에 들어가게 하며, 세포 내 에스테라제가 이를 형광 칼세인으로 분해하여 축적을 이끕니다.
반면, 표면 접촉이 없는 플랑크톤 박테리아는 비병원성을 유지하여 아메바 막을 그대로 유지합니다. 이로 인해 칼세인-AM이 아메바에 침투하는 것이 줄어들어 형광 칼세인 축적이 제한됩니다.
건강한 아메바도 비병원성 박테리아를 집어삼킵니다.
형광 현미경 아래에서 밝고 둥근 아메바 세포는 병원성 박테리아 상호작용을 나타내고, 희미하고 비정형인 아메바는 비병원성 박테리아 상호작용을 나타냅니다.
표면에 부착된 박테리아 세포의 병원성을 검사하기 위해, 이전에 얻은 표면 부착 박테리아 세포에서 아메바 세포 10마이크로리터를 추가합니다.
플랑크톤 세포를 분리하기 위해 배양물 10마이크로리터를 신선한 페트리 접시로 옮깁니다.
다음으로, 10마이크로리터의 아메바 세포를 이전에 얻은 플랑크톤 박테리아와 혼합하여 플랑크톤 세포의 병원성을 분석합니다.
즉시 작은 한천 패드를 적절한 박테리아 아메바 혼합물 위에 페트리 접시 표면에 올려놓으세요.
그 후 남은 액체를 부드럽게 피펫으로 제거하고, 20분간 건조시킵니다.
뚜껑을 덮고 실온에서 추가로 40분간 배양하세요. 마지막으로, 형광 현미경을 사용해 최소 100개의 아메바 세포에 대한 이미지를 획득하세요.