0 조회수 • 3:15 분 • March 31st, 2026
큰 유리 슬라이드부터 시작하고, 양쪽 가장자리에 작은 유리 슬라이드를 이중 레이어로 배치하세요.
용융된 아가로스를 부어 또 다른 큰 유리 슬라이드로 덮으세요.
아가로스를 굳히기 위해 세팅을 차갑게 하세요.
유리 슬라이드를 제거하고 아가로스를 작은 패드로 잘라내세요.
아가로스 패드를 슬라이드에 부착된 접착 프레임 안에 넣으세요.
병원성 박테리아 배양물을 예로 들어보자. 이 배양은 숙주 감염에 필수적인 형광 표지 분비 시스템을 발현하도록 유전자 변형되었다.
밀도가 높은 박테리아 패치를 사용해 물에 띄워 두세요.
소용돌이로 박테리아를 균일하게 퍼뜨리죠.
아가로스 패드에 현탁액을 발라서 박테리아를 고정시키세요.
수분 유지를 위해 커버슬립으로 밀봉하세요.
밝은 필드 조명 아래에서 영상을 위한 셀 필드를 선택하세요.
현미경 설정을 최적화하여 광표백을 줄이고 신호 감도를 높입니다.
형광 태그가 부착된 박테리아를 감지하기 위해 형광 채널로 전환하세요.
먼저 생세포 영상을 위한 아가로스 패드를 만드는 것부터 시작하세요. 약 30밀리리터의 1% 저녹 아가로스 용액을 물에 준비한 후 유리 플라스크에 담겨 전자레인지에 약 90초간 돌리고, 가끔씩 돌려 아가로스가 완전히 녹을 때까지 돌립니다.
25 x 75 x 1.1mm 유리 슬라이드 가장자리에 22 x 22 x 0.15 mm 유리 슬라이드 두 장을 겹쳐 놓습니다. 그 다음, 다른 쪽 가장자리에 작은 슬라이드 두 개를 더 쌓으세요. 두 상단 유리 슬라이드 사이 중앙 슬라이드에 약 1밀리리터의 용융 아가로스를 피펫으로 채우고, 용융된 아가로스 위에 또 다른 큰 슬라이드를 올려 공기 방울 형성을 방지합니다.
슬라이드를 섭씨 4도에서 15분간 식힌 후, 메스나 면도날로 패드를 부드럽게 작은 정사각형으로 자릅니다. 25 x 75 x 1.1mm 유리 슬라이드에 양면 접착 프레임을 고정하고 여러 개의 패드를 슬라이드에 올려놓으세요. 레 지오넬라 폐실병 무거운 부위를 1밀리리터 이중 증류수에 녹여 보세요.
그 다음 소용돌이를 사용하고, 희석액을 2에서 3마이크로리터 정도 피펫으로 패드에 주입하세요. 58 x 24 x 0.15mm 크기의 커버 슬립을 접착 프레임 위에 부드럽게 덮어주세요. 밝은 필드 조명을 이용한 영상 촬영을 위한 셀을 선택합니다.
그 후 현미경 소프트웨어의 캡처 창에서 ND를 180으로, 비닝을 2x2로 조정합니다. 488나노미터 채널을 사용해 샘플을 500에서 1000밀리초 동안 노출시키고, 동일한 매개변수로 태그되지 않은 레지오넬라 폐렴구 균을 영상으로 촬영하여 형광의 특이성을 검증합니다.