0 조회수 • 3:03 분 • March 31st, 2026
잎 조직을 감염시킬 수 있는 박테리아 배양을 예로 들어보세요.
군락을 긁어내고 소금에 부탁하세요.
박테리아 농도를 평가하기 위해 광학 밀도를 측정한 후, 원하는 OD로 희석하세요.
최종 접종 농도에 도달하기 위해 연속 희석을 수행합니다.
표면 장력을 줄이고 박테리아가 잎에 고르게 퍼지도록 하는 계면활성제를 추가하세요.
현탁을 페트리 접시로 옮기세요.
다음으로, 애기장대 화분 위에 나무 막대기 두 개를 올려놓습니다.
식물을 접시 위로 뒤집어 잎을 현탁액에 담가.
세팅을 진공 챔버에 넣고 진공 펄스를 가하세요
가해진 진공은 자연스러운 틈을 통해 잎 조직에서 공기를 제거합니다.
진공을 풀면 대기압이 회복되어 박테리아가 잎 안으로 밀어 넣게 됩니다.
펄스를 반복해서 최대 침투를 달성하세요.
화분을 제거하세요. 그 다음 과잉 접종액을 적혈로 닦아내세요.
박테리아에 감염된 애기장대 잎은 하류 분석을 위해 준비되었습니다.
관심 있는 Pseudomonas 시링기 균주의 글리세롤 재고를 영하 80도에서 적절한 항생제를 첨가한 LB 플레이트에 줄로 제거하세요. 플레이트를 28도 섭씨에서 40에서 48시간 동안 부화시킵니다. 박테리아 바이오매스를 긁어내어 10밀리몰라 마그네슘 클로라이드 5밀리리터에 재현탁하세요.
600나노미터에서 광학 밀도를 측정한 후 10밀리몰라 염화마그네슘을 첨가하여 0.1로 조정합니다. 10밀리몰라 염화마그네슘에서 연속 희석을 수행하여 최종 인종 농도는 밀리리터당 5 곱하기 10에서 5번째 CFU를 얻습니다. 그 다음, 애기장대(Arabidopsis) 식물에는 200밀리리터, 콩 식물에는 50밀리리터의 접종제를 준비합니다.
접종 전에 계면활성제 실웨트 L-77을 콩 접종용 최종 농도인 0.02%, 애 기장대용 0.01%로 첨가합니다. 애기장대 가 침투할 때는 두 개의 나무 막대를 X 모양으로 화분 위에 놓고, 화분을 아래로 향하게 하여 200밀리리터의 접종이 들어 있는 직경 14센티미터의 페트리 접시 위에 놓으세요. 콩 잎 접종을 위해서는 식물과 접종 용액을 진공 챔버에 넣고, 접종 성분이 들어 있는 50밀리리터 원뿔형 원심분리관에 잎을 넣습니다.
500밀리바 펄스를 30초 동안 가해서 잎에 침투시키세요. 과잉 접종액을 종이로 빼내고, 식물을 해당 성장실로 돌려보내세요.