토양이 없는 시스템에서 애 기장대 뿌 리의 박테리아 정착 모니터링

먼저 토양이 없는 시스템의 액체 성장 배지 표면에 떠 있는 저밀도 망 지지대 위에서 키운 애기장대 살리아나 묘목부터 시작하세요.

이 묘목들은 뿌리에 침착해 바이오필름을 형성하는 박테리아로 미리 접종되어 있습니다.

묘목을 잡고 겸자로 잎 아래 줄기를 부드럽게 집으세요.

그런 다음 뿌리를 손상시키지 않고 묘목을 망에서 들어 올려 집단화된 뿌리 구조를 보존하세요.

묘목을 이중 증류수가 담긴 다중 웰 플레이트로 옮깁니다.

플레이트를 호일로 덮고 다방향 초음파 검사기를 사용해 바이오필름을 깨고 뿌리 표면의 박테리아를 제거하세요.

초음파 검사 후에는 초음파 처리된 박테리아 현탁액을 사용해 연속 희석액을 준비합니다.

희석된 샘플을 한천 플레이트에 올려놓고 유리 구슬을 추가해 박테리아를 고르게 퍼뜨리세요.

구슬을 제거하고 배양하여 생존 가능한 박테리아가 군락을 형성할 수 있도록 하세요.

군집 형성은 토양이 없는 시스템에서 박테리아가 뿌리 정착에 성공했음을 확인시켜 줍니다.

세척 후에는 잎 아래에 불 살균 겸자를 부드럽게 대어 묘목을 망에서 제거합니다. 줄기를 살짝 꼬집고, 뿌리를 부러뜨리지 않고 망에서 멀리 밀어내도록 살짝 흔들어 주세요. 식물 뿌리에서 박테리아를 제거하려면, 각 망에서 묘목을 24웰 초음파 플레이트의 개별 웰로 옮기고, 1밀리리터의 이중 증류수를 담습니다.

원고에 설명된 다방향 초음파 측정기를 사용해 플레이트 내 모든 샘플을 동시에 초음파 처리합니다. 박테리아를 정량화하기 위해, 초음파 처리된 샘플을 박테리아 배양지에서 10배 희석하여 연속적으로 수행합니다. 멸균 유리 구슬을 사용해 퍼뜨리고, 박테리아가 개체 수 있을 때 최적의 온도에서 배양하세요.