고양이에서 급성 심근 경색

급성 심근 경색 (AMI)의 쥐 모델은 심장 pathophysiological 및 생리 기능에 MI의 결과를 연구하는 데 유용합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 심장 허혈에 대한 심근의 즉각적인 반응과 관련된 심장 신호 전달 메커니즘 연구를 위해 쥐의 급성 심근 경색을 모델링한 다음 재관류 손상이 뒤따르는 것입니다. 이러한 반응에는 경색 크기, 위험 지역 및 세포 사멸이 포함됩니다. 첫 번째 단계는 가슴 왼쪽의 네 번째 늑간 공간을 작게 절개하고 갈비뼈를 분리한 후 벌려 좌심을 노출시키는 것입니다.

좌측 전방 하행 동맥 또는 LAD는 허혈 기간 후 30분 동안 일시적으로 결찰됩니다. LAD의 결찰이 해제되어 4시간의 재관류 기간 후에 심장 재관류가 가능합니다. LAD는 심장을 절제하기 전에 한 번 더 결찰하고 경색된 심근 부위의 크기가 위험하고 위험하지 않은지 검사합니다.

궁극적으로, 경색된 환자의 조직학적 평가의 결과입니다. 심근은 심부전 치료를 위한 치료 전략을 탐색하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술은 허혈에 대한 즉각적인 반응과 관련된 신호 전달 메커니즘에 대한 통찰력을 제공할 수 있으며, 경색 크기, 위험 지역 및 세포 사멸과 같은 능숙한 손상이 뒤따릅니다.

이 모델은 허혈성 심장 질환 치료를 위한 새로운 치료 전략을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 이 절차를 시연하는 것은 선임 연구원과 텍사스 메디컬 센터의 기관 회원인 휴스턴 대학교 약리학 및 약학과의 브래들리 맥코넬(Bradley McConnell) 박사 실험실의 선임 박사후 연구원인 X가 될 것입니다. 수술을 시작하기 전에 수술 표면을 70% 에탄올로 소독해야 합니다.

각 개별 수술 전에 핫 비드 살균기로 모든 수술 기구를 소독하십시오. 필요한 기구에는 수술용 가위 2개, 집게 1개, 곡선 집게 1개, 바늘 홀더 2개, 흉부 견인기 1개가 포함됩니다. 동물의 체온을 섭씨 37도 이상 또는 영하 1도로 유지하도록 호메오 테믹 담요 시스템의 온도를 조정합니다.

경색의 크기는 폐색 기간과 체온에 따라 달라집니다. 출혈을 관리하기 위해 면봉과 어플리케이터를 즉시 사용할 수 있도록 하십시오. 육안 검사, 심박수, 호흡수, 체온 및 체중 측정을 통한 신체 검사를 통과한 동물만 이 연구에 사용됩니다.

수술 전날 수술을 받을 건강한 동물의 체중과 식별 특성을 기록합니다. 부프레노르핀 마스크를 투여하십시오. 가운과 장갑은 전체 시술 동안 착용해야 하며, 개별 수술 사이에 장갑을 교체해야 합니다.

먼저 쥐를 마취하고 목과 가슴 부위의 털을 철저히 면도하여 수술 부위를 준비합니다. 면도한 부위를 베타딘 용액으로 소독한 후 70%에탄올을 투여합니다. 이 절차를 세 번 반복합니다.

체온의 적절한 유지를 위해 동물을 호메오 테마 담요 시스템에 놓습니다. 오른쪽에 누워 있습니다. 폴리에틸렌 튜브의 가장자리를 경사지게 하면 후두에 더 쉽게 삽입할 수 있습니다.

수술용 실체 현미경을 사용하여 기관내관을 삽입합니다. 필요에 따라 혀를 부드럽게 조작하고 기관을 시야에 둡니다. 기관내관을 인공호흡기에 연결하고 분당 80회 호흡과 체중 100g당 1.2ml의 일회 호흡량을 순환합니다.

기계적 환기가 이루어지면 수술 부위만 노출되도록 쥐 위에 멸균 드레이프를 놓습니다. 안정된 호흡이 이루어지면 왼쪽 네 번째 늑간 공간에서 가슴을 엽니다. 출혈의 위험을 줄이기 위해 조직을 절단하는 정도를 최소화합니다.

네 번째 늑간 공간 내에 흉부 견인기를 배치하고 갈비뼈를 벌려 좌심실 또는 좌심실을 노출시키며 폐가 손상되지 않도록 주의해야 합니다. 다음으로, 심낭을 열어 제자리에 둡니다. 가능하면 수술용 실체 현미경을 사용하여 근위 좌측 전방 하행 동맥 또는 LAD 동맥을 확인합니다.

일시적으로, 결찰하거나 슬립으로 묶어 LAD를 매듭지어 허혈을 유발합니다. 심장을 적절하게 외부화하지 않도록 주의합니다. LAD 결찰은 허혈 기간 동안 봉합사 원위부에 있는 심근 조직의 희미한 점과 전벽의 기능 장애를 관찰하여 확인됩니다.

30분의 허혈 기간이 지난 후 미세 수술 가위로 LAD 주위의 결찰을 자르거나 풀어 심장 재관류를 시작합니다. 재관류는 심근 조직에 붉은색이 돌아오고 LAD 결찰이 해제된 직후 관찰된 전벽 운동의 일부 회복을 입증함으로써 검증됩니다. 이 절차는 LAD가 일시적으로 결찰되지 않는다는 점을 제외하고는 가짜 대조군 쥐에 대해서도 동일합니다.

흉부 견인기를 제거하고 중단된 봉합 패턴으로 갈비뼈를 함께 당깁니다. 갈비뼈가 닫히면 흉강에서 공기를 빨아들여 적절한 호흡을 보장하기 위해 음의 흉압을 생성합니다. 마지막으로, 지속적인 봉합 패턴으로 피부를 닫습니다.수술 후 쥐를 발열 패드가 있는 케이지에 넣고 직장 체온계로 체온을 모니터링하고 육안 검사로 호흡수, 심계항진으로 심박수를 모니터링하고 동물이 보행할 수 있을 때까지 심계항진으로 심박수를 모니터링하고 비정상적인 통증 징후를 모니터링합니다.

멸균 식염수를 투여해야 합니다. 탈수 징후가 관찰되면 수술 직후 부프레노르핀을 투여하십시오. 4시간의 재관류 기간 후, 다시 마취된 쥐를 수술 부위에 다시 놓습니다.

앞에서 설명한 대로 좌심실을 시각화하고 LADA를 두 번째로 결찰하거나 슬립매듭을 묶을 수 있습니다. 5%Evans blue와 식염수 1ml를 우심실에 주입하고 2분 동안 관류시킵니다. 이 기간이 지나면 1ml의 포화 염화칼륨 용액을 우심실에 주입하여 심장이 빠르게 뛰는 것을 멈추고 심장을 절제하고 데운 2% 인산염 완충 식염수에 삽입합니다.

실온에서 농작물이 굳어지면 심장을 1-2mm 부분으로 자릅니다. 20분 동안 2%trien tetra oleum chloride 또는 TTC로 생존 가능한 심근을 염색하고 보이는 각 슬라이스의 이미지를 캡처합니다. 다음은 쥐 심장의 대표적인 이미지입니다.

4시간 동안 재관류한 후 파란색 영역은 폐색되지 않았거나 위험에 처하지 않은 관류 영역을 나타냅니다. 빨간색 영역은 경색 위험이 있는 지역을 나타내고 흰색 노란색 영역은 위험 지역 내에 있는 경색된 심근을 나타냅니다. 이 비디오를 시청한 후에는 쥐의 급성 심근 경색에서 수행하는 방법과 인간의 허혈성 심장 질환을 모방하는 데 사용되는 동물 모델을 잘 이해하게 될 것입니다.

이 모델은 허혈에 대한 즉각적인 반응을 연구한 후 경색 크기, 면적 위험 및 세포 사멸과 같은 처음 몇 시간 이내의 재관류 손상을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 이 비디오에서 관찰한 것처럼 실험에 행운을 빕니다.