Name: 마우스의 급성 폐 상해를 유발하는 압력 제어 환기 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-05T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: 학습하세요 마우스에서 기계 환기를 이용한 급성 폐 상해 유발 방법을. 기관 절개 및 고압 환기로 ARDS 유사 병태를 재현하고 혈역학적 변화와 BAL 액 내 단백질 농도를 측정하여 폐 손상 기전을 연구할 수 있습니다.

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<p class="jove_content"&gt; 현재의 연구는 국립 심장, 폐, 및 혈액 연구소 부여 R01 - HL0921, HK Eltzschig에 R01 - DK083385과 R01HL098294, T. Eckle에 1K08HL102267 - 01, 그리고 아나스타샤 교육 T. Eckle에 연구 기금 재단에서 지원하는 그리고 홍콩 Eltzschig, 그리고 T. Eckle과 HK Eltzschig와 M. Koeppen으로 도이치 Forschungsgemeinschaft (DFG)의 연구 활동에 미국 심장 협회 부여합니다.</p

일반 비고 : 모든 작업은 직립 해부 현미경 (올림푸스, STU2 스탠드 붐 스탠드와 Z 축 크랭크 포스트와 SZX10) 미만 수술 coagulator (11)를 사용하여 수행되어야합니다. 실험 그룹은 결과의 comparability을 보장하기 위해 최선을 연령과 체중에 가능한 일치해야합니다. 온도, 혈압, 마취 및 유체 행정 전반에 걸쳐 안정되어야합니다. 1. 마취 및 기관 준비 <ol><li> 적어도 10 주 된 아르 C57BL / 6 마​​우스를 사용하여 22-25 G.의 시체를 가지고 복용 70 MG / kg 체중의 IP (6)에서 pentobarbital 나트륨을 사용하여 마취를 유도. 약 pentobarbital 10 MG / kg / H 나트륨과 마취를 유지합니다. 이것은 크게 혈압을 낮출 수 있으므로 도달 했나봐로주의하십시오. pentobarbital의 다시 먹이지 - 후에도 플라즈마 수준의 심각한 증가로 이어질 시간은 - 수 있습니다. </li><li> 후 마취 유도, 테이프와 발목에 고정 봉합을 사용하여 테이블에 붙어있는 위턱과 아래턱에 사지와 부정사 위치에 안전 쥐. 치아를 사용하여 머리에 대해 동일한 작업을 수행. 충분한 금지는 성공 삽관법와 잘 제어 수술 중요합니다. 이전 수술, 마우스 머리 알레르기의 위험을 줄이기 위해 광유와 마우스를 커버. 체온이 상용 식품 랩로 쥐를 커버 안정 상태를 유지하기 위해서. </li><li> 37 체온을 유지하기 위해 온도 피드백 제어기에 연결된 직장 온도계 프로브와 온도 제어 온수 테이블 (RT, Effenberg, 뮌헨, 독일) ° C.에 플레이스 마우스 </li><li> 수술 기관을 폭로. 결합 조직 및 두 개 3.0 실크 수술 봉합 (하버드기구, 미국)기도 아래에 오랫동안 각 10cm의기도의 측면과 등의 측면을 해부하다. 봉합 떨어져 약 1cm해야합니다. </li><li> 맥퍼슨 - Vannas 가위 (; 세계 정밀 계측기, 미국 8cm, 바로 블레이드) 사용하여 두 원형 연골 사이의 후두 아래에 4mm -주의기도 3 절개. 이 결과 매개 변수를 혼란시킬 수 있기 때문에, 출혈을 일으킬하지 않도록하십시오. </li><li> 무딘 폴리에틸렌 캐뉼러 (Insyte 22g, 베크턴 디킨슨, 미국)를 사용 tracheal 삽관법를 수행합니다. 기관에 85도 각도에서 폴리에틸렌 캐뉼러의 끝부분을 삽입합니다. 그것은 tracheal 루멘과 일치되도록 다음 캐뉼러을 기울. 캐뉼러의 끝은 흉부의 조리개에서 사라진 때까지 천천히 더욱기도 아래 튜브를 사전. 기관 (1.4 참조) 등의 위치 두 수술 실크 봉합사이 위치에 튜브를 흥분시키는. </li></ol> 2. 환기 유발 폐 손상의 기술 <ol><li> 환풍기에 튜브를 연결합니다. 폐 상해를 유발하기 위해서 우리는 지멘스 (드레 베티, 미국)에서 서보 900 C를 사용하여 압력 제어 환기 기법을 사용합니다. 동물은 FiO 2 = 1.0 피크 inspiratory 80 호흡 / 분 45 mbar, 주파수의 압력과 0-3 mbar의 긍정적인 최종 날숨 압력을 사용하여 통풍이 될 것입니다. 유효 비율 영감 1:1해야합니다. 서보 900 C는 인간에 대한 환기로 지어진이라는 사실에도 불구하고, 압력 제어 환풍기 설정에서의 사용은 생쥐의 환기를 위해 우수 작품. </li><li> ECG (예 : 휴렛 팩커드, B blingen, 독일)와 모니터 심장 박동수. 심장 박동 400 아래에 드롭하지 않는지 확인하십시오. 하나는 기계적 환기가 intrathoracic 압력의 증가 이후 증가 폐동맥 압력의 기호로 제정되는 오른쪽으로 심장 축의 변화를 볼 수 있습니다. 마우스 bradycardia을 개발하면, 온도와 마취 선량 / 농도를 확인하십시오. Xylacin / Ketamin 마취 250 / 분 심장 심장을 유도하고 있으므로 권장하지 않습니다. </li><li> 적절한 유체 교체를 적용합니다. 로 주입 정상적인 생리 동맥이나 정맥 카테터를 통해 ML / 시간이 충분한 정맥 제출을 보장하기 전에 통풍으로 수행되어야한다 0.1. 평균 동맥 압력의 중요한 방울로 이어질 수있는 심장 정맥 반환이 장애는 높은 환기 압력으로 인해. 또한, 500 μl의 생리 볼러스 전에 수술에 IP 부여 수 있습니다. </li><li> 혈압 (27)의 지속적인 레코딩을위한 경동맥에 카테터를 삽입하십시오. 당신이 동맥을 해부 시작하기 전에 본문에 팔을 연결합니다. 경동맥은 paratracheal 근육의 무딘 절개를 통해 노출됩니다. 추가 노출 및 조직 외상 (vagal 신경의 특정)의주의 회피 후, 카테터 두 봉합과 작은 클램프 (37)를 사용하여 그릇에 삽입됩니다. 이것은 동맥의 긴 세그먼트를 노출합니다. 경동맥의 매우 끝에 묶은를 놓으십시오. 긴장하거나 흥분시키는 일을 얻기 위해 봉합의 끝에 큰 클램프를 부착테이프를 사용하여 테이블에 전자 봉합. 동맥 주위에 다른 치료를 삽입하고 아주 말초 끝에 동맥을 해부하다. 여기, 작은 클램프를 놓으십시오. 동맥에 작은 대각선 열기를 잘라 마이크로 가위를 사용합니다. 훌륭한 포셉 (뒤몽, WPI)와 개방을 잡고 손을 / 포셉와 함께 적절한 크기의 카테터를 사전. 두 번째 봉합사로 매듭을 만들어 동맥을 확보. 클램프를 풀어 더욱 카테터를 전진. 여러 노트와 테이프로 카테터를 고정합니다. 또는 경동맥 동맥 카테 테르는 혈액 가스 분석을 위해 동맥 혈액 샘플을 수집하는 실험의 끝에 장소가 될 수 있습니다. </li></ol> 3. 조직 샘플의 복구 기계 환기 3 시간 후, 샘플은 폐 손상의 범위를 평가하기 위해 수집하고 있습니다. 우리는 brochnoalveolar 세척 유체 (BAL), 동맥혈 및 폐 조직을 수집하는 것이 좋습니다. <ol><li> 실험의 끝에 BAL 액체를 얻을 수 있습니다. 마취의 심화되면 1 ML 인산과 tracheal 튜브를 플러시 호수 (PBS)를 버퍼. 그것이 연결된 주사기를 통해 회복되기 전에 액체가 3 초 동안기도 / 폐에 남아합니다. BAL은 액화 질소에 냉동 스냅인이며 자세한 분석을 위해 -80 ° C에 저장됩니다. 복구 볼륨 1 ML보다 훨씬 덜 수 있다고 알고 있습니다. </li><li> 실험의 끝에 혈액 가스 분석을 수행합니다. 그렇게하기 위해서는 절개가 바로 흉골 아래하여야한다. 포셉과 정도 흉곽을 따라 절개로 가슴을 잡아. 다음 횡경막은 가장자리에 베인이며 갈비에서 도려 있습니다. 이제 흉부의 하단 구멍에 열려있는 전망이있다. 포셉과 흉골을 들어서 전체 앞쪽에 흉부 벽이 - 워드를 설정되어 있도록 오른쪽 왼쪽에 긴 상처 (가능한 측면)의 흉부를 엽니다. 실험 동물이 여전히 기계적 통풍있는 동안 이것은, 완료해야합니다. 좌심실은 27을 사용하여 구멍을 것입니다 ½ G 바늘과 동맥혈 분석은 I - STAT 시스템 (애보트, 미국)를 사용하여 수행됩니다. 동맥혈 가스 분석이 수행되어야하는 경우이 결과에 상당한 confounder되기 때문에, BAL은 얻을 수 없습니다. </li><li> 또는 위의 방법으로, 동맥 혈액 샘플은 경동맥 동맥 카테터를 통해 수집하실 수 있습니다. BAL가 취득되기 전에 그러나이 완료되어야합니다. </li><li> 마음을 끄는하고기도를 잘라하여 엑사이스 폐 엉 - 블록. 혈액을 흡수하기 위해 준비 조직의 조각을 가지고 수술 사이트가 표시되도록. 복부의 방향으로 마음을 당겨 조심스럽게 모든 흉부 장기를 동원하기 위해 척추 따라 절개해. 대동맥을 잘라 흉부 장기를 제거하고 깨끗한 수술 테이블에 그들을 놓으십시오. </li><li> 심장과 조직 샘플의 주요 혈관을 버려야. 여전히 폐에 연결된 어떤 thymus 조직이 없다는 것을 확인하십시오. 개인 튜브 및 스냅인 동결에 가위와 장소 폐​​ 구분합니다. 자세한 분석을 위해 -80 ° C에 보관하십시오. </li></ol> 4. 폐 손상의 측정 저희는 폐 손상의 범위를 평가하기 위해 다음과 같은 결과 매개 변수를 사용하는 것이 좋습니다 : 알부민 엘리사 (Bethyl 연구소, 미국)와 장벽 장애의 범위와 염증의 양을 평가하는 myeloperoxidase (MPO) 엘리사를 (Hycult 생명 공학, 미국) 수행 BAL 유체의 세포. MPO 엘리사를 수행하면 폐 조직을 형성합니다. 서부 유럽 표준시 - 투 - 드라이 비율 측정하는 경우 우리는 BAL 액체를 얻을하지 않으며 폐동맥 순환이 (3.3 참조) 플러시되지 않습니다. 절단 후 폐의 무게를 측정합니다. 그러면 폐에은 48 H 및 폐 조직이 다시 측정을 위해 동결 건조된 있습니다. 그런 다음 젖은 대 건조 비율은 건조 조직의 MG 당 물 (5)의 MG로 측정됩니다. <img src="/files/ftp_upload/2525/2525fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 빌리. 마우스에 대한 응답으로 BAL의 단백질 내용 pentobarbital로 anesthetized 있었다, 기계적 환기가 제정과 생쥐는 압력 제어 설정 (45 mbar의 inspiratory 압력, 긍정적인 최종 exspiratory 압력 3 mbar, 영감을 백퍼센트 사용하고 통풍이되었습니다 산소 농도). 0 후에는 환기 BAL의 1, 2, 3 시간은 수확되었고 단백질 내용은 bicinchoninic 산성 검정 (BCA 분석)를 사용하여 계량되었습니다. 단백질 내용의 상대적인 변화가 환기 0 시간 표준 표시됩니다 (n은 = 4 그룹 당, *는 P &lt;0.05 제어할 비교 표시, ± SEM을 의미)

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</ol>

현재의 연구는 생쥐에서 환기 유발 폐 손상을 수행하는 방법을 설명합니다. 이 모델은 고압 환기에 의한 높은 재현성 부상을 보여줍니다. 생쥐의 급성 - 폐 상해를 공부 고려 수사관이 모델에서 혜택을 누릴 수 있습니다.

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> Pentobarbital 나트륨 (치명​​적인 플러스) </td><td> Vortech 제약 있지, 회사, </td><td> VPL 9372 </td><td> 염분에 4mg/mL </td></tr><tr><td> Insyte 22 G </td><td> 베크턴 디킨슨 </td><td> N / A </td><td></td></tr><tr><td> 봉합사, 실크 4.0 </td><td> 하버드 장치 </td><td> 517698 </td><td></td></tr><tr><td> 봉합사, Prolene 8.0 </td><td> Ethicon, 미국 </td><td> M8739 </td><td> 재사용 </td></tr><tr><td> 지멘스 900 ° C </td><td> 드레 베티, 미국 </td><td> # 336 </td><td> 리퍼브 상품 </td></tr><tr><td> 해부 현미경 (SZX10) </td><td> 올림푸스 </td><td> N / A </td><td> 관대한 작동 거리를 고려 </td></tr><tr><td> 난방 장치 테이블 </td><td> 알티, Effenberger, 독일 </td><td> N / A </td><td> 오직 하나의 공급자 </td></tr><tr><td> 혈압 장치 </td><td> 사이버 센스, Inc의 </td><td> BPM02 </td><td></td></tr><tr><td> I 합계 </td><td> 애보트 </td><td> N / A </td><td></td></tr></tbody></table>

마우스의 급성 폐 상해를 유발하는 압력 제어 환기

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Murine 모델은 광범위하게 다른 장기 시스템 (1-34)의 급성 부상을 조사하는 데 사용됩니다. 장기간 기계 환기가 발생 급성 폐 손상 (ALI)는, 병적 상태 및 주요 질병의 사망률에 기여하고, 새로운 유전이나 약리 타겟에 대한 연구는 강렬한 조사 분야 (1-3, 5, 8, 26, 30, 33아르 -36). ALI가 아닌 심장 폐 부종과 폐의 가스 교환 (36)의 후속 장애로 연결이 질병의 급성 증상에 의해 정의됩니다. 우리는 환기 유발 폐 손상 (2) 유도하는 압력 제어 환기를 사용하여 ALI의 murine 모델을 개발했습니다. 이러한 목적으로, C57BL / 6 마​​우스 anesthetized 있으며 기관 절개술은 기계적 환기를 통해 ALI의 유도에 의해 다음이 수행됩니다. 삼시간 - 쥐는 1 이상 45 mbar의 inspiratory 정상 압력으로 압력 제어 설정에서 통풍이 있습니다. 결과 매개 변수, 폐 부종 (습식으로 건조 비율), bronchoalveolar 액체 알부민 콘텐츠, bronchoalveolar 유체 및 폐 조직 myeloperoxidase 컨텐츠 및 폐의 가스 교환 (2) 평가로. 이 기법을 사용 우리는 그것이 충분히 급성 폐 염증을 유도하고 다른 치료 그룹 또는 genotypes (1-3, 5)를 구분할 수있는 표시 수 있습니다. 따라서이 기법은 알리가 유전자 타겟 삭제와 생쥐에 유전자 접근법을 사용에 관련된 분자 메커니즘을 추구 연구원 도움이 될 수 있습니다.

환풍기 유도 폐 손상에 대한 murine 모델은 급성 폐 손상을 연구하는 중요한 도구입니다<em&gt; 생체내에</em&gt;. 여기서 우리는 쉽게 적용할 수를보고<em&gt; 현장에서</em폐의 급성 실패를 유발하는 고압 기계 환기를 사용하는 급성 폐 손상에 대한&gt; 모델입니다.

마우스 모델은 다양한 장기 시스템의 급성 손상을 조사하는 데 광범위하게 사용됩니다 (1-34). 지속적인 ...으로 인해 발생하는 급성 폐 손상(Acute lung injury, ALI)은...

이 실험 절차의 전반적인 목적은 인공호흡기를 사용하여 마우스의 폐 손상을 유도하는 것입니다. 이는 기관 절개술을 시행하고 고압 기계 환기를 적용함으로써 달성됩니다. 그 다음으로, 혈역학적 파라미터를 측정하기 위해 경동맥 카테터를 삽입합니다.동물이 폐 손상을 유발할 만큼 충분한 시간 동안 인공호흡기를 사용한 후, 동맥혈 샘플과 기관지폐포 세척액을 수집합니다. 절차의 마지막 단계는 추가 분석을 위해 폐 조직을 적출하는 것입니다. 최종적으로, 수집된 샘플의 변화와 기계적 환기 지속 시간 사이의 상관관계를 도출한 결과를 얻을 수 있습니다.이 기술이 LPS 흡입과 같은 기존 방법보다 갖는 주요 장점은 인간에게서 발견되는 급성 호흡곤란 증후군의 모든 주요 특징과 유사한 급성 폐 손상을 유도한다는 점입니다. 먼저 마취된 마우스를 온도 조절 가열 테이블 위에 앙와위로 놓은 다음, 각 사지를 봉합사로 고정하고 봉합사를 테이블에 테이프로 부착합니다. 그다음, 위쪽 치아 아래로 봉합사를 통과시켜 머리를 고정합니다.500 µL의 식염수를 일시 투여(bolus)하고, 체온이 37 °C로 유지되도록 열 피드백 컨트롤러가 연결된 직장 프로브를 삽입합니다. 준비가 완료되면, 털에서 유래하는 알레르기 유발 물질에 대한 노출을 줄이기 위해 마우스의 몸을 미네랄 오일로 덮어줍니다. 마지막으로, 체온 유지를 돕기 위해 시판되는 식품용 랩으로 동물을 감쌉니다.기관을 노출시키기 위해 목을 따라 절개한 후, 주변 근육과 결합 조직을 둔탁하게 박리합니다. 기관 아래에 약 1cm 간격으로 10cm 길이의 외과용 봉합사 두 개를 배치합니다. 마이크로 가위(mc first and Vanna scissors)를 사용하여 후두에서 약 3~4mm 아래의 연골 고리 두 개 사이의 기관을 조심스럽게 절개합니다.삽관을 완료하려면 뭉툭한 폴리에틸렌 캐뉼라의 끝부분을 85도 각도로 기관에 삽입하십시오. 그다음, 캐뉼라를 기울여 기관강과 일직선이 되도록 맞춥니다. 튜브 끝이 흉부 개구부 속으로 사라질 때까지 천천히 밀어 넣으십시오.앞서 기관 하단에 배치한 두 개의 외과용 봉합사로 튜브를 고정합니다. 마지막으로, 튜브를 인공호흡기에 연결합니다. 폐 손상은 Siemens사의 servo 900 C를 사용하여 유도합니다.압력 조절 환기법을 사용하여, 최고 흡기압을 45 millibars, 호흡수를 분당 80회, 호기말 양압을 0~3 millibars, 흡입 산소 분율을 1로 설정하고, 흡기 대 호기 비율은 1:1로 설정합니다. 동물을 인공호흡기에 성공적으로 연결한 후, 혈압과 심박수를 측정하기 위해 경동맥에 카테터를 삽입합니다. 팔을 먼저 몸통 측면에 고정하면 더 긴 동맥 구간을 노출시킬 수 있습니다.먼저 기관 주변 근육을 둔탁하게 박리하여 경동맥을 노출시키고, 분리된 동맥의 근위단에 봉합사를 묶은 후 클램프나 테이프로 고정합니다. 첫 번째 봉합사에서 약 1cm 떨어진 곳에 두 번째 봉합사를 배치하고 묶되, 동맥 주위를 너무 조이지는 마십시오. 동맥을 최원위단까지 박리한 후 소형 클램프를 배치하여 출혈을 방지합니다.마이크로 가위를 사용하여 두 번째 봉합사 윗부분의 동맥에 작은 대각선 절개창을 냅니다. 미세 포셉으로 절개창을 고정한 상태에서 카테터를 삽입하고, 매듭을 조여 고정합니다. 다음으로, 클램프를 풀고 카테터를 더 전진시킵니다.카테터를 두 번째 봉합사 너머로 진전시킵니다. 여러 번의 매듭과 테이프로 카테터를 고정합니다. 카테터 배치가 완료되면, normal saline을 0.1 milliliter per hour의 속도로 주입하고 이를 혈압 측정 장치에 연결합니다.마지막으로, 심박수를 모니터링하기 위해 말단부에 클램프를 부착합니다. 3시간 동안 기계 환기를 실시한 후, 폐 손상 정도를 측정하기 위해 샘플을 수집합니다. 먼저, 혈액 가스 분석을 위해 경동맥 카테터에서 샘플을 수집합니다.마취 수준을 심화시킨 후, 인공호흡기와의 연결을 제거하고 1 mL의 인산염 완충 식염수(phosphate buffered saline)가 채워진 주사기를 삽입합니다. 주사기를 밀어 넣고 3초간 기다린 후, 기관지폐포 세척액을 다시 주사기로 수집합니다. 회수된 부피는 1 mL보다 상당히 적어야 한다는 점에 유의하십시오.Flash.기관지폐포 세척액을 액체 질소로 급속 냉동한 후 -80 °C에서 보관하십시오. 폐를 적출하려면 먼저 흉골 바로 아래에 절개창을 만듭니다. 핀셋으로 흉골을 잡고 갈비뼈를 따라 절개 부위를 확장합니다. 다음으로 횡격막의 가장자리와 갈비뼈 사이를 절개하여 흉곽 하부 개구부가 명확하게 보이도록 합니다.포셉으로 흉골을 들어 올리고, 우측과 좌측에 길게 절개하여 흉강을 엽니다. 이때 전면 흉벽 전체를 위로 젖힐 수 있도록 절개선을 가능한 한 외측으로 유지하십시오. 27.5 gauge 바늘을 5 mL의 PBS가 채워진 주사기에 연결합니다. 바늘을 우심실에 삽입하고 폐가 완전히 하얗게 변할 때까지 혈액 순환계를 세척하십시오.이렇게 되지 않을 경우, 바늘 끝이 우심실에 정확하게 위치했는지 확인하고 필요시 다시 배치하십시오. 심장을 들어 올리고 기관을 절단하여 폐와 블록을 적출하십시오. 시야를 방해하는 혈액은 조직지로 흡수하여 제거하십시오.심장을 복부 방향으로 당기고 척추를 따라 조심스럽게 절개하여 모든 흉강 장기를 분리합니다. 대동맥을 절단하고 흉강 장기를 깨끗한 수술대 위에 올립니다. 심장을 절제하고 샘플에서 주요 혈관들을 제거하여 깨끗이 정리합니다.폐에 흉선 조직이 남아 있지 않은지 확인하십시오. 폐엽을 분리하여 각각 별도의 튜브에 넣고, 급속 냉동하여 -80 °C에서 보관하십시오. 이후 추가 분석에 사용합니다.여기서 보는 바와 같이, 기관지폐포 세척액의 단백질 함량은 인공호흡 기간이 길어짐에 따라 증가합니다. 단백질 함량의 상대적 변화는 폐 손상 정도를 평가하기 위해 인공호흡 0시간을 기준으로 표준화하여 나타내었습니다. 알부민과 마이엘로퍼옥시다아제(MPO)에 대한 ELISA를 수행하고, BL 세척액 내의 염증 세포를 정량화합니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 프로토콜은 인간에서 관찰되는 산성 폐렴의 발병 기전과 매우 유사한 마우스에서 급성 폐 손상을 유발합니다. 우리는 최대한의 급성 치명적이지 않은 낮은 pH 폐 손상을 생성하고 원주 압력 방출과 결합된 개방 기관절개술을 사용하여 설치류-인간 해부학적 호흡 구조의 차이를 설명합니다.

급성 폐 손상의 열기 기관 절개 위산 흡인 쥐 모델은 최대한 급성 치명적 폐 손상의 결과

여기에 제시된 단계별 절차는 직접적인 경포대당증 주입에 의해 마우스에서 급성 폐 손상을 유도하고 혈액 샘플, 기관지 정맥 세척액 및 폐 조직의 FACS 분석을 수행하기 위한 것이다. 최소 침습성, 간단한 취급, 좋은 재현성 및 질병 중증도의 적정은 이 접근법의 이점입니다.

직접 경포당증 주입에 의해 마우스에 있는 심각한 폐 상해를 유도하는

마우스에서 좌측 폐에 선택적 기관차 산 주입은 위산 흡인에 의해 유도된 인간 급성 호흡 곤란 증후군(ARDS)을 모델로 하는 일방적이고 자가 제한적인 급성 폐 손상을 초래한다.

일방적인 기관내 산 성 증착에 의한 자가 제한 급성 폐 손상의 모델

결합 된 오존과 세균성 내독신 노출 마우스는 호중구의 것을 포함하여 광범위한 세포 죽음을 보여줍니다. 우리는 세포 골격 라멜레포디아의 중단, 기관지 폐포 라베이지의 복잡한 V ATP synthase 서브유닛 β 및 혈관 스타틴의 세포 발현 증가, 폐 면역 반응 억제 및 지연 된 호중구 모집과 같은 세포 적응을 관찰했습니다.

결합 된 오존 과 LPS 유도 뮤린 급성 폐 부상 동안 폐 세포 적응 시각화

0.9% 식염수(35mL/kg 체중, 37°C)를 이용한 계면활성제 세척제와 낮은 PEEP를 이용한 높은 조수부량 환기의 조합은 적당한 환기유발폐손상(VILI)을 유발하여 실험적인 급성 호흡곤란 증후군(ARDS)을 초래한다. 이 방법은 장기간 다양한 환기 전략의 효과를 연구할 수 있는 낮은/제한된 채용성을 가진 폐 손상 모델을 제공한다.

기활성 제 고갈과 상해 환기 결과 급성 호흡 곤란 증후군의 재현 가능한 모델 (ARDS)

생체 내 형광 현미경 검사는 백혈구 - 내피 상호 작용 및 모세관 관류를 실시간으로 연구하는 데 활용 될 수 있습니다. 이 프로토콜은 진공-안정화된 폐 영상화 시스템을 사용하여 폐 미세순환에서 이러한 파라미터를 영상화하고 정량화하는 방법을 기술한다.

진공 안정화 이미징 시스템을 이용한 실험적 급성 폐 손상에서의 폐 미세순환의 생체내 광역 형광 현미경 검사

이 원고는 생쥐에서 폐렴의 전염성 모델을 확립하고 손상 해결의 각각의 특성과 함께 박테리아 성장 및 기관 내 점안 방법을 설명합니다. 고차원 유세포 분석을 사용하여 면역 환경을 평가하는 새로운 접근 방식도 설명합니다.

폐렴의 해결을 평가하기 위한 실험모델

환기를 유지하고 저산소증을 피하면서 왼쪽 폐 허혈 재관류 (IR) 손상을 만드는 마우스 수술 모델.

Orotracheal 삽관 및 환기 폐 허혈 재관류 수술의 마우스 모델

여기에서 우리는 비침습적 구인두 기관내 삽관을 통한 기관내 지질다당류(LPS) 전달을 위한 프로토콜을 제안합니다. 이 방법은 동물에 대한 수술 절차의 외상을 최소화하고 LPS를 기관으로 정확하게 전달한 다음 폐로 전달합니다.

Noninvasive Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation in Mice

이 프로토콜은 기관지폐 이형성증의 분자 유발 요인에 대한 이해를 용이하게 하고 치료 번역을 향상시키기 위해 적절하지 않은 계면활성제 양, 고산소증, 고압 환기 및 염증을 포함하여 미숙아 폐에서 발생하는 초기 병원성 사건을 모델링하는 급성 폐 손상의 신생아 새끼 돼지 모델의 개발을 설명합니다.

미숙아 폐의 초기 환경을 재현하는 신생아 새끼 돼지 급성 폐 손상 모델 개발

본 연구에서는 기본 후두경을 사용하여 쥐에서 ALI를 발달시키는 비침습적 기기관내 삽입 기법이 입증되어 LPS가 폐에 정밀히 전달되도록 합니다. LPS는 후두경을 이용한 기관내관 을 통해 주입됩니다. 폐 손상의 규모는 여러 시점에서 평가됩니다.

설치류에서 급성 폐 손상을 유도하기 위한 비침습적 기관내 지포폴리당(Lipopolysaccharide) 투여

학습하세요 마우스에서 기계 환기를 이용한 급성 폐 상해 유발 방법을. 기관 절개 및 고압 환기로 ARDS 유사 병태를 재현하고 혈역학적 변화와 BAL 액 내 단백질 농도를 측정하여 폐 손상 기전을 연구할 수 있습니다.

마우스의 급성 폐 상해를 유발하는 압력 제어 환기

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