Name: Neuromodulation 및 Mitochondrial 교통 : 긴 기간이 이상 Hippocampal 뉴런의 라이브 영상 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-06-17T12:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 50 s
Description: 학습하세요 해마 뉴런에서 미토콘드리아 운송을 장기간 라이브 형광 현미경으로 관찰하는 방법을. 렌티바이러스 형광 단백질 표지와 스테이지탑 인큐베이터를 활용하여 신경전달물질이 미토콘드리아 역학에 미치는 영향을 분석합니다.

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우리는 무대 위로 배양기의 설계 및 제조하는 동안 자신의 기술 전문 지식과 훌륭한 기술을 공헌에 대한 도널드 헛슨 감사하고 싶습니다. 우리는 그녀의 뛰어난 기술 지원에도 Ayda Dashtaei에게 감사하고 있습니다. 모든 작품은 Neurosciences 학술 진흥 재단에 의해 지원되었다.

<ol><li>Ligon, L. A., Steward, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Movement+of+mitochondria+in+the+axons+and+dendrites+of+cultured+hippocampal+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Comp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Movement of mitochondria in the axons and dendrites of cultured hippocampal neurons.</a> J Comp Neurol. 427, 340-350 (2000).</li>
<li>Miller, K. E., Sheetz, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+evidence+for+coherent+low+velocity+axonal+transport+of+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct evidence for coherent low velocity axonal transport of mitochondria.</a> J Cell Biol. 173, 373-381 (2006).</li>
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<li>Morris, R. L., Hollenbeck, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+transport+of+mitochondria+along+microtubules+and+F-actin+in+living+vertebrate+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Axonal transport of mitochondria along microtubules and F-actin in living vertebrate neurons.</a> J Cell Biol. 131, 1315-1326 (1995).</li>
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<li>Fedoroff, S., Richardson, A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFedoroff%2C+S+%22Protocols+for+neural+cell+culture%22">Protocols for neural cell culture</a>. , 3rd edn, Humana Press. (2001).</li>
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<li>Chen, S., Owens, G. C., Edelman, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dopamine+inhibits+mitochondrial+motility+in+hippocampal+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Dopamine inhibits mitochondrial motility in hippocampal neurons.</a> PLoS One. 3, e2804-e2804 (2008).</li>
<li>Chen, S., Owens, G. C., Makarenkova, H., Edelman, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HDAC6+regulates+mitochondrial+transport+in+hippocampal+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">HDAC6 regulates mitochondrial transport in hippocampal neurons.</a> PLoS One. , e10848-e10848 (2010).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

lentivirus - 중재 감염 교양 뉴런에서 mitochondria를 타겟으로하는 형광 단백질의 표현과 연장 기간이 살 세포의 이미징을 허용 저렴한 실험실 지은 무대 위로 배양기를 채용, 우리는 mitochondrial 운동 neuromodulatory 신호 사이의 링크를 조사할 수있다 , 세로토닌 (5 - HT), 도파민 (DA) 및 아세틸콜린 (ACH) 등. 신경 기능의 핵심입니다 - 우리의 연구는 처음으로, 이러한 5 - HT 및 DA 같은 신경 전달 물질에 의해 뉴런 - 변조된의 활동의 변화에​​ mitochondrial 거래를 링크, 신호 경로를 명료하게하다하는 데 도움이 있습니다. 우리는 대상 단백질 형광의 사용이 더 생리학 관련 중요한 염료를 사용 가능 훨씬 짧은 기간이 아닌 수 있습니다 오랜 기간 동안 교양 뉴런을 살아가 표시 mitochondria의 관찰을 허용 것을 발견했습니다. 또한, 형광 단백질 신호의 강도가 photobleaching 또는 phototoxicity의 가능성을 최소화, 우리는 이미지 수집 중에 노출 시간 간단하게 할 수 있습니다. 마지막으로, 간단하고 저렴한 무대 위로 인큐베이터 미디어의 증발을 최소화하면서, 주위 온도, 습도 및 CO 2 수준을 유지, 우리도 시간 또는 일 동안 뉴런을 생활에 mitochondrial 운동을 수행 할 수 있습니다. 라이브 뉴런에서 mitochondria의 장기적인 관찰을위한 무대 위로 배양기를 조작하고자하는 연구자를 제공, 우리 디자인의 정확한 세부 사항을 수행하지 않아도되는 미디어의 증발을 방지하기 위해 (예를 들어, 가스 투과 막을 사용하는 재료의 성질 )과 (예, 온도 및 습도 제어, osmolarity의 산도, 유지 보수 버퍼링) 적용 원칙은 일반적으로이 프로토콜에서 설명하는 것과 일치합니다.

<table border="1"><tbody><tr><th> 양 </th><th> 설명 (및 그림 1에 위치) </th></tr><tr><td> 1 </td><td> 조직 문화 인큐베이터 (H) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 내열성 플라스틱 인클로저 (delrin 또는 유사한) (A) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 35mm GBM의 뚜껑 플라스틱 프레임 (배양 접시에 막을 affixing 용) (M) </td></tr><tr><td> 1-2 </td><td> 선형 피트 클리어 PFTE (테플론) 막 재료 </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 브레스 엄지 나사 </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 소형 10kOhm 히트싱크 저항 (무대 위로 보육 인클로저 내부 가열 요소로 사용) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 변압기 (저항기에 9V 전류 공급) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 테라리움 온도 컨트롤러와 프로브 (변압기를 통해 방열판의 저항에 전력 조절 온도 조절) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 2000ml Erlenmeyer 플라스크 (호스의 진동 억제하기 전에 무대 위로 보육에 대한 머플러) (K) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 1 / 8 &quot;sorbothane 시트 (무대 상단 인큐베이터의베이스 개스킷 재료) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 밀폐된 ABS (또는 유사한) 플라스틱 박스 (수족관 펌프 주택) (J) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 수족관 펌프 (I) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 소형 컴퓨터 냉각 팬 </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 냉각 팬 플라스틱 인클로저 (L) </td></tr><tr><td> 1 </td><td> 컴퓨터 냉각 팬 9V 변압기 </td></tr><tr><td> 20-30피트 </td><td> Nalgene이나 실리콘 호스 (조직 문화와 무대 위로 incubators 사이의 연결, 수분 트랩) (F, G, N) </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 플라스틱 stopcocks (무대 위로 보육 전후의 공기 흐름을 열고 닫습니다) (O) </td></tr><tr><td> 4 </td><td> 가시 황동 호스 커넥터 (호스 연결하기 / 무대 위로 보육 및 수족관 펌프 인클로저에서) </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 브래스 경감 님이 빠른 couplers (호스 연결하기 / 무대 위로 인큐베이터에서) </td></tr><tr><td> 2 </td><td> 브래스 경감 님이 빠른 couplers (호스 연결하기 / 무대 위로 인큐베이터에서) </td></tr></tbody></table> 표 1. 무대 위로 보육 부품 : <table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th></tr><tr><td> 폴리 - D - 라이신 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> P7280 - 5MG </td></tr><tr><td> laminin </td><td> 로체 응용 과학 </td><td> 11243217001 </td></tr><tr><td> 35mm 유리 바닥 요리 </td><td> MatTek </td><td> P35GC - 0 - 14 - C </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> 생활 기술 </td><td> 10,567 </td></tr><tr><td> B27 </td><td> 생활 기술 </td><td> 17504-044 </td></tr><tr><td> Glutamax </td><td> 생활 기술 </td><td> 35,050 </td></tr><tr><td> 지방질이 풍부한 BSA </td><td> 생활 기술 </td><td> 11020-021 </td></tr><tr><td> L - 아스파라긴 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> P0380 - 100G </td></tr><tr><td> L - 프롤린 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> A8381 - 100G </td></tr><tr><td> 비타민 B - 12 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> V2876 - 100MG </td></tr><tr><td> 5 - HT </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> H9523 - 25MG </td></tr><tr><td> 8 - OH - DPAT </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> H8520 - 25MG </td></tr><tr><td> 도파민 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> H8502 - 5G </td></tr><tr><td> Bromocriptine </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> B2134 - 25MG </td></tr><tr><td> SKF38393 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> D047 - 100MG </td></tr></tbody></table>

neuromodulation 및 mitochondrial 교통 : 긴 기간이 이상 hippocampal 뉴런의 라이브 영상

Neuromodulation and Mitochondrial Transport: Live Imaging in Hippocampal Neurons over Long Durations

mitochondrial 교통과의 연결 기능 사이의 관계를 이해하기 위하여, 1-3 연장 기간이 삶의 양식 뉴런의 mitochondrial 행동을 관찰하는 것이 중요합니다. 이것은 cytoskeletal 컴포넌트, organelles, 생활 세포에서 다른 구조 동적 형광 현미경을 통해 시각 다음 표시하고 수있는 중요한 염료와 형광 단백질을 사용하여 지금은 가능합니다. 예를 들어, 배아 닭 교감 신경에 mitochondrial 운동은 중요한 염료 rhodamine 123 4를 사용 특성화했다. 또 다른 연구에서는 mitochondria는 mitochondrially 대상 eYFP 5 transfection하여 쥐 forebrain의 뉴런에서 시각되었습니다. 그러나, 심지어 기본 분 이상의 뉴런, 시간 또는 일의 영상은 문제의 번호를 보여줍니다. 최고 이들 가운데는 다음과 같습니다 긴 영상 세션 동안 같은 온도, 습도, 그리고 산도와 같은 문화 조건 1) 보수, 2) 인수 이미지와 이미지를 분석하는 동안 신호 강도의 정확한 측정의 품질을 모두 보장하는 강력하고 안정적​​인 형광 신호; 3) 이미지 수집 중에 노출 시간을 제한하는 것은 photobleaching을 최소화하고 phototoxicity을 피할 수 있습니다. 여기, 우리는 관찰, 시각화, 높은 시간적 해상도와 최적의 생활 지원 조건 교양 hippocampal 뉴런의 mitochondrial 운동의 분석을 허용하는 프로토콜을 설명합니다. 우리는 좋은 온도 조절 및 대기 가스 흐름을 제공하는 저렴한 무대 위로 배양기를 구축하고, 또한 안정적인 산도와 osmolarity 추청, 미디어 증발의 정도를 제한합니다. 이 인큐베이터는 일정한 습도 수준 및 5~10%의 CO 2 / 공기의 분위기를 제공하는 표준 조직 문화 배양기에, 유입 및 배출구 호스를 통해 연결되어 있습니다. 이 디자인은 반드시 몇 시간 또는 며칠 동안 세포의 생존을 보장하지 훨씬 더 비싼 현미경 incubators에 비용 효율적인 대안을 제공합니다. mitochondria 시각화하기 위해, 우리는 mitochondrion를 타겟으로하는 적색 형광 단백질을 인코딩 lentivirus와 세포를 감염. 이것은 안정적인 크세논 광원의 사용과 함께, 우리는 이미지 수집 중에 노출 시간을 제한할 수 있으며 제외한 모든 photobleaching과 phototoxicity 걸로, 강하고 지속적인 신호를 보장합니다. 무대 상단 인큐베이터의 상단에 두 사출 포트위한 신경 전달 물질 및 기타 시약의 급성 행정부가 mitochondrial 움직임을 조절하실 수 있습니다. organelle 타겟 빨간색 형광 단백질과 우리 무대 - 최고 인큐베이터, 종래의 거꾸로 형광 현미경, CCD 카메라, 크세논 광원의 조합 합계, lentivirus - 중재 표현은 우리가 mitochondrial 운송 시간이 경과 이미지를 얻기위한 수 종래의 중요한 염료 및 오프 - 더 - 수명 지원 시스템을 배포 연구에서 가능한 그 이상 기간이 이상의 살아있는 뉴런.

우리는 오랜 기간이 이상의 형광 현미경을 통해 뉴런을 생활에서 mitochondria의 이미징 수있는 프로토콜을 설명합니다. 연장 기간 동안 이미지가 mitochondrially 대상으로 형광 단백질과 설계 및 우리 연구실에 지어진 저렴한 무대 위로 보육의 이용 lentivirus - 중재 표현을 통해 수행됩니다.

Neuromodulation 및 Mitochondrial 교통 : 긴 기간이 이상 Hippocampal 뉴런의 라이브 영상

미토콘드리아 수송과 신경세포 기능 사이의 관계를 이해하기 위해서는, 살아있는 배양 ... 내에서 미토콘드리아의 행동을 관찰하는 것이 매우 중요합니다.

이 실험 과정의 전반적인 목표는 살아있는 세포 형광 현미경을 사용하여 배양된 뉴런 내의 미토콘드리아 수송을 장기간 시각화하는 것입니다. 이는 먼저 배양된 뉴런의 미토콘드리아를 오르가넬 타겟 형광 단백질로 라벨링함으로써 수행됩니다. 실험 과정의 두 번째 단계는 대조군 조건에서 미토콘드리아 수송 이미지를 획득하는 것입니다.절차의 세 번째 단계는 세로토닌과 같은 신경조절물질을 급성 투여한 후 미토콘드리아 수송의 타임랩스 이미지 시리즈를 획득하는 것입니다. 절차의 마지막 단계는 획득한 타임랩스 이미지 시리즈를 분석하는 것입니다. 결과적으로 신경전달물질이 미토콘드리아 수송을 조절한다는 결과를 얻을 수 있습니다.이러한 결과는 뉴런 내 형광 표지된 미토콘드리아를 장시간 이미징함으로써만 얻을 수 있습니다. 생존 염색(vital dye labeling)이나 GFP의 일시적 형질전환(transient transfection)과 같은 기존 기술과 비교했을 때 이 방법의 주요 장점은, 건강한 배양 뉴런에서 미토콘드리아 수송을 장기적으로 관찰하는 것이 가능하다는 점입니다. 안정적인 가열 및 가습 환경을 제공하기 위해, 본 실험실의 부연구원인 Chen이 이 절차를 시연할 것입니다.스테이지 탑 인큐베이터는 표준 조직 배양 인큐베이터와 폐쇄 회로로 연결되어 있으며, 35 millimeter 글라스 바텀 배양 접시용 A-P-F-T-E 막 덮개는 신경세포 배양물과 인큐베이터 내부 환경 사이의 가스 교환을 가능하게 합니다. 이러한 기능들과 다른 특징들이 결합되어 다양한 실험 조건 하에서 배양된 신경세포의 장기 관찰이 가능합니다. mito turbo red 단백질을 발현하는 배양된 해마 신경세포가 담긴 배양 접시를 조직 배양 후드로 옮깁니다.플라스틱 뚜껑을 PTFE 막 뚜껑으로 교체한 후 배양 접시를 현미경으로 옮깁니다. 인큐베이터 베이스를 현미경 스테이지에 고정한 다음, 막이 덮인 배양 접시를 조심스럽게 안착시킵니다. 움푹 들어간 개구부에서 인큐베이터 인클로저를 인큐베이터 베이스의 스틸 포스트에 맞춘 후, 인클로저를 베이스 위로 내립니다.인클로저와 베이스 사이에 밀폐가 잘 될 때까지 손나사를 조입니다. 이미징 소프트웨어를 열기 전에 현미경 필터 휠 컨트롤러, 광원 및 CCD 카메라의 전원을 켭니다. 본 프로토콜에서는 이미지 획득을 위해 슬라이드 북 5를 사용합니다.63 x 오일 침전 대물렌즈로 전환하고 대물렌즈 터렛을 내립니다. 대물렌즈 표면에 침전유를 조심스럽게 도포합니다. 툴바에서 초점 창 아이콘을 클릭하고 램프 슬라이더를 움직여 명시야 램프를 켭니다.빛의 세기를 조절하려면 접안렌즈를 사용하여 세포 영역의 초점을 맞추고 관찰하고자 하는 세포를 찾습니다. 현미경 탭에서 XI 3 필터를 선택하고, 접안렌즈를 통해 mito turbo red 단백질로 표지된 세포 내 미토콘드리아의 초점 평면을 찾은 다음 CCD 카메라로 전환합니다. 툴바의 이미지 캡처 아이콘을 클릭하며, 초기 노출 시간은 100 milliseconds로 설정하여 시작합니다.캡처 창의 test 및 find best 버튼을 사용하여 최적의 노출값을 찾으십시오. capture type 상자 아래에서 time-lapse 옵션을 체크하고, time-lapse 캡처 옵션 아래에서 원하는 이미지 촬영 간격과 촬영 세션 시간을 선택하십시오.캡처 창의 오른쪽 하단에 있는 시작 버튼을 클릭하여 타임랩스 이미지 획득을 시작하십시오. 대조군 이미징 세션을 캡처한 후, 스테이지 상단 인큐베이터 상단의 주입구를 통해 신경전달물질 또는 기타 시약을 투여하십시오. 세로토닌 수용체 작용제인 8-OH-DPAT를 첨가하면, 이전에 화살표로 표시된 정지 상태의 미토콘드리아가 해마 뉴런의 축삭을 따라 이동합니다.세로토닌 첨가 전 개별 미토콘드리아의 평균 속도와 방향성이 요약되어 있습니다. 대부분의 미토콘드리아는 정지 상태이지만, 세로토닌을 첨가하면 미토콘드리아의 42%가 방향성 이동을 나타내며 세로토닌이 없을 때 방향성 이동을 보인 것보다 더 먼 거리를 이동합니다. 반대로, 도파민을 첨가하면 이 절차에 따른 이미징 세션의 마지막 15분 동안 미토콘드리아의 92%가 정지 상태가 됩니다.추가적인 질문에 답하기 위해 하나 이상의 신호를 모니터링하는 다른 방법들을 수행할 수 있습니다. 예를 들어, 뉴런 내의 칼슘 활성과 미토콘드리아 운송이 어떻게 연관되어 있는지를 확인할 수 있습니다.

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연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

organelle 밀매의 역학을 공부하면 라이브 셀 이미징 특정 유틸리티입니다. 여기 우리는 넓은 필드 형광 현미경을 사용하여 교양 뉴런의 밀도 코어 vesicles의 라이브 영상을위한 프로토콜을 설명합니다. 이 프로토콜은 유연 및 mitochondria와 같은 이미지를 다른 organelles 적응 수 endosomes, 그리고 peroxisomes.

기본 교양 Hippocampal 신경에 덴스 코어 Vesicles의 라이브 영상

출처: Katsalifis, A., et al. 비율계량 지표를 사용하여 일차 뉴런에서 미토콘드리아 글루타티온 산화환원 상태의 실시간 이미징. J. Vis. 경험. (2021년)이 비디오는 비율계량 형광 지시약을 사용하여 1차 뉴런에서 미토콘드리아 산화환원 상태의 이미징을 보여줍니다. 형광 현미경으로 두 가지 여기 파장을 적용하여 형광 강도 비율을 측정하여 미토콘드리아 산화를 평가합니다. 이 프로토콜에는 칼슘 유입 및 활성 산소종(ROS) 생성을 유도하기 위한 N-메틸-D-아스파르테이트(NMDA) 자극과 NMDA 유도 미토콘드리아 산화를 정량화하기 위한 산화제 및 환원제를 사용한 보정이 포함됩니다.

비율계량 지표를 사용하여 1차 뉴런의 미토콘드리아 산화환원 상태 이미징

노화 시 세포 내 Ca2+ 리모델링은 흥분 독성 및 뉴런 손상에 기여할 수 있으며, 이는 Ca2+ 과부하에 의해 매개되는 과정입니다. 우리는 신경 노화 모델인 쥐 해마 뉴런의 장기 배양에서 세포질 및 미토콘드리아 Ca2+의 형광 및 생물 발광 이미징을 사용하여 노화 뇌의 Ca2+ 리모델링을 조사하는 것을 목표로 했습니다.

하는 세포 칼슘의 형광 및 생물 발광 영상<sup&gt; 2 +</sup&gt; 노인 해마 신경 세포에서

이 방법은 살아있는 마우스의 해마에 광학적인 접근을 허용하는 만성 준비를 기술합니다. 이 제제는 몇 주 동안 신경 구조 가소성 및 활동 유발 세포 가소성의 세로 광학 이미징을 수행하는 데 사용할 수 있습니다.

살아있는 마우스에 있는 등도 해마 CA1의 세로 2 광자 화상 진찰

손상된 미토콘드리아 수송 및 형태는 각종 신경 퇴행성 질환에 관여합니다. 제시된 프로토콜은 유전 경직 성 하반신 마비에서 미토콘드리아 수송 및 형태를 평가하기 위해 유도 된 다능성 줄기 세포 유래 전뇌 뉴런을 사용합니다. 이 프로토콜은 축축을 따라 미토콘드리아 인신 매매의 특성화와 신경 퇴행성 질환의 연구를 용이하게하는 형태학의 분석을 허용합니다.

유전 경직 성 하반신 마비에서 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 뉴런에서 미토콘드리아 수송 및 형태 분석

이 문서는 주입 캐뉼라와 마우스의 해마의 CA1 영역에 이식으로 보충 된 맞춤형 이미징 창의 준비를 보여줍니다.

마우스를 면도하는 해마에서 신경 활동을 시각화하기위한 두개골 절제술 절차

이 문서는 공초점 살아있는 현미경 검사를 사용하여 1 차해 및 피질 뉴런에 있는 급성 동요에 기초 redox 상태 및 redox 반응에 있는 다름을 결정하는 프로토콜을 기술합니다. 프로토콜은 최소한의 수정으로 다른 세포 유형 및 현미경에 적용 될 수 있습니다.

비율 표시기를 사용하여 1 차 신경에 있는 미토콘드리아 글루타티온 Redox 상태의 살아있는 화상 진찰

이 논문은 정밀하게 제어된 수술과 이광자 현미경을 사용하여 마우스 해마 CA1에서 휴식 미세아교세포를 만성적으로 생체 내에서 관찰하는 방법을 설명합니다.

생체 내 마우스 해마에서 미세아교세포의 만성 이광자 이미징

현재 방법은 쉽게 사용할 수 있는 유전적으로 암호화된 칼슘 지표를 사용하여 예쁜꼬마선충에서 생체 내 고해상도 하위 구획 칼슘 이미징을 위한 비비율계량 접근 방식을 설명합니다.

생체 내에서 처리되는 신경 칼슘의 세포 내 이미징

미토콘드리아 네트워크는 매우 복잡하여 분석하기가 매우 어렵습니다. 새로운 MATLAB 툴은 타임랩스 이미지에서 실시간 컨포칼 이미징 미토콘드리아를 분석하지만, 출력 볼륨이 커서 개별 수동 주의가 필요합니다. 이 문제를 해결하기 위해 신속한 파일 분석이 가능한 루틴 최적화가 개발되었습니다.

동형 특이적 레티노산 수용체에 의한 살아있는 신경 미토콘드리아 항상성 조절의 최적화된 자동 분석

여기에서는 1차 해마 설치류 뉴런의 transfection과 live-cell confocal imaging을 결합하여 축삭 수송에 대한 병리학적 단백질 유도 효과를 분석하고 이러한 효과를 매개하는 기계론적 경로를 식별하는 방법을 보여줍니다.

일차 해마 뉴런의 축삭 수송에 대한 병리학적 단백질의 효과를 측정하기 위해 Live-Cell Imaging 사용

학습하세요 해마 뉴런에서 미토콘드리아 운송을 장기간 라이브 형광 현미경으로 관찰하는 방법을. 렌티바이러스 형광 단백질 표지와 스테이지탑 인큐베이터를 활용하여 신경전달물질이 미토콘드리아 역학에 미치는 영향을 분석합니다.

Neuromodulation 및 Mitochondrial 교통 : 긴 기간이 이상 Hippocampal 뉴런의 라이브 영상

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