진단 검시와 고양이와 마우스의 선택 조직 및 샘플 수집

이 절차의 전반적인 목표는 기본적인 설치류 부검을 수행하는 것입니다. 이것은 먼저 동물에 대한 기본 정보를 기록함으로써 수행됩니다. 절차의 두 번째 단계는 내장을 검사하는 것입니다.

세 번째 단계는 장기 또는 장간막 림프절과 같은 샘플을 수집하는 것입니다. 궁극적으로 동물의 건강 상태는 조직 병리학 또는 기타 기술을 통해 결정될 수 있습니다. 일반적으로 부검을 처음 하는 사람들은 설치류 해부학이 직장에서 배웠기 때문에 어려움을 겪을 것입니다.

이러한 방법은 연구 식민지에서 동물의 건강에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 다양한 조직의 위치와 정상 조직과 비정상 조직을 식별하는 방법을 배우는 데 시간이 걸리기 때문에 이러한 기술을 시각적으로 시연하는 것이 필수적입니다. 동물을 안락사시키기 전에 동물의 병력에 대한 정보를 수집하고 신체 상태, 행동, 성별, 나이, 체중, 변형률 등과 같은 현재 특성을 기록하십시오.

이 기록은 동물을 안락사시키기 전에 조직을 검사할 사람에게 중요한 나이입니다. 적절한 개인 보호 장비를 사용하고 있는지 확인하십시오. 해부, 보드 집게, 가위, 용기 라벨, 고정제, 미디어 및 수집 용기를 준비합니다.

동물을 안락사시킨 후 신체 상태를 평가하고 피부와 털 이상, 수척 및 탈수 여부를 확인합니다. 또한 동물에 대한 인공 조작, 임플란트 또는 수술 흉터의 증거를 찾으십시오. 다음으로, 해부 현미경을 사용하여 모든 외부 구멍을 자세히 검사합니다.

여기에는 귀, 눈, 코, 입, 항문 및 생식기가 포함됩니다. 이제 동물을 해부판에 등을 대고 눕히고 집게로 피부를 들어 올린 다음 가위를 사용하여 항문에서 턱까지 피부를 잘라냅니다. 다음으로 피부를 옆으로 반사하고 복벽과 흉곽을 잘라냅니다.

흉곽의 양쪽을 옆으로 두 개씩 잘라 흉곽 내장을 노출시킵니다. 다이어프램을 자릅니다. 그런 다음 흉골 상단을 잘라 흉곽을 제거합니다.

이제 노출된 흉부 및 복부 기관을 검사합니다. 색상 변화, 이상한 냄새, 크기, 차이점, 누락되거나 탈구된 장기를 파악합니다. 장기 표면의 농도를 검사하고 조직 덩어리나 액체로 채워진 주머니를 기록하십시오.

또한 두 캐비티 중 하나에 유체가 있는지 확인하십시오. 위장관으로 검사를 계속하십시오. 장간막에서 림프절이 커졌는지 또는 조직 종괴가 있는지 검사합니다.

위장관의 내용물을 설명하고 벽이 두꺼워지거나 종괴가 있거나 출혈이 없는지 주의 깊게 확인하십시오. 신장 내부를 검사하려면 칼날을 사용하여 왼쪽 신장의 세로 부분과 오른쪽 신장의 단면을 정중선 중앙에서 벗어나게 만듭니다. 실질에 이상이 있는지 확인합니다.

이제 수컷의 비뇨 생식기 시스템을 검사하십시오. 암컷의 정낭(seminal vesicles), 고환(testes), 부고환(epididymus), 요관(ureters) 및 정독샘(perusal gland)을 확인합니다. 자궁, 난소, 요관을 확인합니다.

비뇨생식기에 막힘, 체액 주머니, 출혈 또는 기타 이상이 있는지 검사합니다. 이러한 검사를 완료한 후 추가 검사를 위해 대상 장기를 분리하고 절제합니다. 일반적으로 심장, 간, 신장 및 비장은 절제될 때 수집됩니다.

각 장기를 고정제에 담그거나 동결 또는 면역조직화학과 같은 조직이 적절하게 고정되도록 요구하는 프로토콜의 첫 번째 단계를 따릅니다. 일반적으로 조직은 10% NBF와 같은 방부제에 1부피 조직에 대해 20부피 고착의 비율로 침수됩니다. 쥐와 함께 작업할 때는 비강 흡인보다 먼저 기관지 흡인을 수집합니다.

먼저 자궁경부 부위에서 떨어진 피하 조직의 피부를 반사하여 침샘과 자궁경부 근육 조직을 노출시킵니다. 그런 다음 해당 조직을 제거하여 기관을 노출시킵니다. 기관을 3mm 절개하고 1ml의 샘플링 유체가 채워진 피펫을 분기별로 지시되는 기관 내강에 삽입합니다.

샘플링 유체를 기관을 통해 폐로 천천히 세 번 플러시합니다. 그런 다음 샘플링 유체를 빼내고 기관에서 피펫을 제거합니다. 모든 유체가 피펫으로 되돌아가는 것은 아닙니다.

따라서 더 많은 유체가 필요한 경우 이 과정을 반복하십시오. 생쥐 테스트용. 비강 흡인 또는 기관지 흡인 샘플을 채취하려면 멸균된 가위를 사용하여 비인두 ATU에 접근합니다.

측두하악 관절을 절단하고 하악골을 상악골에서 멀리 반사시켜 비인두를 노출시켜 비강 흡인을 수집합니다. 1ml의 샘플링 유체가 적재된 피펫을 마우스의 비강 인두 atu 또는 쥐의 기관 내강에 삽입합니다. 피펫은 크랜을 향하게 하고 밀어 넣어야 합니다.

그래서 끝은 비강 입천장에 닿습니다. 일단 샘플링 유체를 천천히 주입하십시오. 액체가 비강으로 들어가면 비강에서 반월판을 형성하고 반투명한 구개를 통해서도 볼 수 있어야 합니다.

그러나 액체가 입을 통해 나오면 피펫의 방향을 바꾸십시오. 완전히 주입되면 비강에서 샘플링 유체를 피펫으로 빼낸 다음 피펫을 제거합니다. 집게로 기관을 잡고 집게 바로 위에 있는 기관을 통해 자르는 것으로 시작합니다.

다음으로, 기관을 부드럽게 위쪽으로 잡아당겨 흉부 조직 전체를 절제할 수 있을 때까지 조직 연결을 잘라냅니다. 이제 폐를 작업 표면에 평평하게 놓고 기관 주위에 봉합사 조각이나 끈을 느슨하게 묶습니다. 매듭을 조이지 마십시오. 그렇지 않으면 바늘을 기관으로 통과시킬 수 없습니다.

이제 주사기에 고정제를 채우고 기관을 바늘에 고정하면서 기관 입구에 바늘을 삽입합니다. 겸자로 폐가 완전히 부풀어 오를 때까지 고정액을 천천히 채웁니다. 정착제의 양은 동물의 나이, 변형률 및 건강에 따라 달라집니다.

과소 팽창된 조직이 평평해 보이고 과도하게 부풀어 오르면 채워진 조직에서 거품 같은 액체가 새어 나오므로 고착제가 폐 밖으로 역류하는 것을 방지하기 위해 기관을 둘러싼 봉합사 재료나 끈을 조입니다. 그런 다음 부풀어 오른 폐를 고정제에 넣으십시오. 배쪽 누운 깨끗한 해부판에 사체를 놓고 가위와 집게를 사용하여 종아리 위의 피부와 근육을 제거합니다.

그런 다음 작은 가위를 사용하여 시체의 목을 베십시오. 하단 블레이드를 구멍 매그넘에 삽입하고 위쪽 동작으로 종양의 정중선을 자릅니다. 이제 종아리를 당겨 집게로 뇌를 노출시킵니다.

병리학자가 두개골 안에 있는 동안 뇌의 일부를 절단하는 것을 선호한다면, 뇌가 노출된 두개골을 즉시 10%NBF에 넣으십시오. 그렇지 않으면 집게나 손가락으로 코 주위의 머리를 잡고 두개골을 부드럽게 뒤집어 중력에 의해 조직이 두개골에서 떨어지도록 합니다. 신중히. 후각엽에서 시작하여 뇌의 바깥쪽 가장자리를 따라 곡선 집게를 밉니다.

두개골을 따라 겸자를 소뇌 쪽으로 계속 밀어 넣으면서 같은 집게로 신경을 부드럽게 꼬집습니다. 뇌가 고정액으로 방출될 때, 장간막 림프절을 먼저 찾으려면 장의 큰 통신 모양의 세쿰을 찾으십시오. 장간막 림프절은 맹장에 인접한 장간막에 있는 조직의 노란색, 난형 또는 구형 덩어리입니다.

그들은 종종 주변의 장간막과 지방보다 약간 더 두껍고 질감이 단단합니다. 해부 내시경은 처음에는 조직을 구별하는 데 유용할 수 있지만 경험이 쌓이면 필요하지 않습니다. 집게와 가위를 사용하여 장간막 림프절을 분리한 다음 배양, PCR 또는 조직 병리학에 사용할 수 있도록 보관 튜브로 옮깁니다.

프로토콜을 완료한 후 병리학자 또는 과학자는 안락사 시 객관적 및 주관적 상태에 대한 서면 보고서를 사용할 수 있습니다. 고정 전 조직, 고정제의 모든 주요 복부 및 흉부 기관, 뇌 및 장간막 림프절 및 비강 및 기관지 샘플에 대한 객관적인 설명. 일단 숙달되면 약식 부검에는 30분도 채 걸리지 않을 수 있습니다.

이 절차를 수행하는 동안 동물과 그 조직의 상태에 대한 관찰 내용을 기록하는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 관류된 폐, 장간막 림프절 및 뇌 수집을 포함하여 완전한 설치류 부검을 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.