전신 필로카르핀 치료: 측두엽 간질의 마우스 모델

시작하려면 필로카르핀의 말초 부작용을 최소화하기 위해 스코폴라민과 테르부탈린 용액을 주사합니다. 다음으로, 필로카르핀 용액을 주사하여 간질 지속증 또는 SE를 유도합니다. 필로카르핀은 뇌의 신경 흥분성을 변화시킵니다.

그 직후, 마우스를 따뜻한 인큐베이터에 넣고 SE 유도를 모니터링합니다. 고개를 끄덕이는 동작과 앞다리의 리드미컬한 움직임 또는 Racine's 척도에서 3단계 이상의 동작을 찾습니다. 그런 다음 마우스를 실온 인큐베이터에 넣고 동물의 행동을 계속 모니터링합니다.

다음으로, SE를 종료하기 위해 디아제팜 용액을 주사합니다. 마지막으로 동물의 회복을 돕기 위해 포도당 용액을 주사합니다. SE 유도 후, 동물은 자발적인 재발성 발작이 시작될 때까지 발작이 없는 잠복기에 들어갑니다.

8주 된 각 수컷 마우스의 체중을 측정하는 것으로 시작합니다. 스코폴라민과 테르부탈린 킬로그램당 2밀리그램, 필로카르핀 용액 킬로그램당 280밀리그램을 만드십시오. 그런 다음 용액을 각 마우스에 복강 내 주입하고 마우스를 케이지로 되돌립니다.

스코폴라민 및 테르부탈린 투여 30분 후, 각 마우스에 필로카르핀 용액을 주입한다. 필로카르핀 주사 직후, 관찰을 위해 마우스를 섭씨 28-30도의 인큐베이터에 넣는다. 다음으로, 간질 지속 상태 또는 SE가 유도될 때까지 마우스의 행동을 모니터링합니다. Racine's scale에 따라 3기 이상에 해당하는 변연계 운동 발작이 감지되면 시간을 기록하고 마우스를 모니터링합니다.

지속적인 운동 발작이 2분 이상 지속되면 마우스를 실온의 새 케이지에 넣고 3시간 동안 모니터링하여 경련 발작이 계속되고 SE가 유도되는지 확인합니다. 그런 다음 SE 발병 후 3시간에 디아제팜 용액 kg당 10mg을 주사하여 행동 급성 발작을 종료합니다. 디아제팜 주사 후 회복을 돕기 위해 개별 마우스당 1밀리리터의 5% 포도당을 투여합니다.

SE 유도 후 1일째에 마우스의 무게를 측정하고 인큐베이터에 하루 더 보관합니다. SE 유도 후 2일째에 마우스의 무게를 측정하고 홈 케이지로 돌려보냅니다. 회복을 촉진하기 위해 촉촉한 음식을 제공하십시오. 마지막으로, 필로카르핀 후 7일까지 동물의 일일 체중을 측정하고, 체중이 증가하지 않으면 마우스에게 5% 포도당을 주사한다.