난소암의 기능화된 나노입자 표적화: 난소암 세포의 엽산 접합 나노입자 조영제 흡수를 촉진하는 기술

0 조회수2:53 • April 30th, 2023

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엽산 수용체는 대부분의 난소암 세포에 의해 과발현되는 막 관련 당단백질입니다. 이러한 수용체를 활용하면 진단용 나노입자를 암세포로 표적으로 전달할

수 있습니다.

원하는 엽산 캡핑 나노입자 조영제 접합체의 현탁액으로 시작합니다. 이 나노입자 현탁액을 난소암 세포의 부착 배양액에 첨가하십시오. 원하는 기간 동안 배양액을 배양합니다.

나노입자에 기능화된 엽산은 암세포에서 발현되는 엽산 수용체를 인식하는 데 도움을 주어 나노입자 접합체와 세포의 선택적 결합을 촉진합니다. 그 후, 원형질막이 함몰하여 나노입자의 세포 흡수 및 축적을 촉진합니다.

암세포를 채취하십시오. 다음으로, 원심분리하여 결합되지 않은 나노입자를 포함하는 상청액에서 세포를 분리합니다. 상청액을 버리고 나노입자 함유 세포를 다운스트림 응용 분야에 적합한 완충액에 재현탁합니다.

먼저, 엽산 캡이 있는 황화구리 나노입자를 신선한 RPMI 배지에 적절한 농도로 혼합합니다. 이 나노입자 용액을 밀리리터당 400마이크로그램의 농도로 SKOV-3 세포를 포함하는 준비된 24웰 플레이트의 각 웰에 첨가합니다. 섭씨 37도에서 5% 이산화탄소와 함께 2시간 동안 배양합니다.

그 후, 0.5 밀리리터의 0.25% 트립신 및 EDTA로 세포를 트립신화합니다. 트립신을 중화시키려면 엽산이 없는 RPMI 1640 완전 성장 배지 1밀리리터 이상을 첨가하고 세포를 123 x g에서 6분 동안 원심분리합니다. 세포를 세척하려면 상청액을 제거하십시오.

세포를 PBS 2밀리리터에 재현탁하고 123 x g에서 6분 동안 원심분리합니다. 이 세척 단계를 두 번 반복하여 결합되지 않은 나노입자를 제거합니다.

그런 다음 PBS에 1 내지 2 밀리리터의 2% 트윈 용액으로 세포를 재현탁합니다. 혈구계와 트리판 블루를 사용하여 세포 수를 계산합니다. 검출을 위해 2% Tween 및 PBS 용액에서 세포를 선택한 농도로 희석합니다.

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