세포의 복강 내 주입: 쥐 모델의 복막 지방 조직에 암세포를 전달하는 방법

복막강은 복벽과 내부 장기 내벽 사이의 공간입니다. 복강내 주사의 경우, 먼저 살아있는 쥐의 목 부위를 구속하여 마우스의 머리가 복부 복부가 노출된 상태에서 아래쪽으로 기울어지도록 합니다.

마우스를 구속하면 마우스의 움직임이 제한되고 복부 장기가 횡격막 쪽으로 이동하여 바늘 삽입 중 장기가 우발적으로 손상되는 것을 방지합니다.

마우스 복부를 가로지르는 정중선에 인접한 오른쪽 하단 사분면에서 바늘 삽입 지점을 찾습니다. 이 부위는 맹장에 구멍이 뚫릴 위험을 방지합니다.

다음으로 난소암 세포의 단일 세포 현탁액이 들어 있는 주사기를 가져갑니다. 바깥쪽 복벽만 관통할 수 있도록 선택한 지점에 바늘을 약 반 센티미터 깊이로 삽입합니다. 마지막으로 암세포 현탁액을 천천히 주입합니다. 이는 복막강 내에서 세포의 효율적인 분포를 보장합니다.

마우스를 케이지로 되돌리고 종양 성장을 모니터링합니다. 복막강 내의 조직은 암세포를 유인하는 특정 화학주성 분자를 방출하여 암세포의 이동과 집락화로 이어져 결국 종양 발달에 기여할 수 있습니다.

광 태그가 부착된 단일 세포 현탁액 500마이크로리터를 주사기에 넣습니다. 그런 다음 주사기를 멸균 캡이 있는 25게이지 바늘에 넣어 주사 전에 세포 전단을 줄입니다. 다른 손으로 마우스를 묶고 목덜미를 잡고 손바닥과 검지로 꼬리를 잡습니다. 그런 다음 약지와 새끼손가락 사이에 왼쪽 뒷다리를 고정합니다. 복부 장기에 외상을 입히지 않으려면 주사 중에 마우스가 움직이지 않도록 잘 제지하십시오.

복부를 가로지르는 선을 상상하고 동물의 오른쪽과 정중선에 가까운 지점을 찾습니다. 진입 지점은 마지막 유두의 두개골과 약간 내측입니다. 맹장을 피하고 장에 구멍이 뚫릴 위험을 줄이기 위해 마우스의 오른쪽에 바늘을 삽입할 준비를 하십시오. 마우스 복부의 아래쪽 측면 부위에 약 0.5센티미터 깊이까지 바늘을 삽입합니다. 플런저를 뒤로 당겨 바늘이 혈관이나 기타 복막 기관을 관통하지 않았는지 확인합니다.

유체가 흡입되지 않으면 느리고 일정한 압력을 사용하여 샘플을 주입합니다. 그런 다음 바늘을 빼고 마우스를 케이지로 되돌립니다. 날카로운 용기에 폐기하기 전에 주사기를 다시 덮지 마십시오.