암세포의 전립선 내 주입: 정소성 전립선 암 마우스 모델을 확립하기 위한 암세포 전달 기술

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립선 내 동소 종양 주사는 전립선 조직 조직형과 일치하는 종양 세포를 수혜 동물의 전립선에 직접 전달합니다.

시작하려면 마취된 수컷 마우스를 바로 누운 자세로 준비합니다. 정중선 복부 절개를 하고 내부 근육 조직을 해부하여 복강을 노출시킵니다. 전립선 전엽 중 하나를 찾습니다. 이 전립선엽은 정낭의 작은 곡률에 부착되어 있으며 방광 가까이에 있습니다.

이제 원하는 기저막 매트릭스와 혼합된 전립선암 세포의 냉각 현탁액을 전립선엽의 장축에 주입합니다. 세포 현탁액의 완전한 전달을 확인하고 바늘을 부드럽게 집어넣습니다. 매트릭스가 응고되고 세포가 내부에 포함되도록 합니다.

그런 다음 정낭과 함께 전립선엽을 복강에 다시 넣습니다. 수술 절개 부위를 봉합합니다. 마우스가 복구되도록 합니다. 전립선엽 내에서 동소 종양의 성장을 관찰하기 위해 매주 마우스를 확인하십시오.

발가락 꼬집기에 반응이 없는 것을 확인한 후 마우스의 눈에 연고를 바르고 동물의 복부에서 털을 모두 면도합니다. 멸균 비접착 패드를 사용하여 3차례의 수술용 스크럽으로 노출된 피부를 살균한 다음 멸균 알코올 물티슈를 사용합니다. 피부가 건조해지면 깨끗한 수술용 현미경의 대물렌즈 바로 아래 가열 패드 위의 깨끗한 표면에 마우스를 바로 누운 자세로 놓고 복부 위에 작은 구멍이 뚫린 멸균 드레이프로 동물을 덮습니다.

음

경과 포피선보다 위쪽 복부 정중선을 따라 외피와 내복부 근육 조직에 1cm 절개를 합니다. 양측 정낭 중 하나와 일반적으로 후방, 측면 및 방광보다 약간 우위에 있는 부착된 전립선엽을 찾습니다. 조수에게 Myc-CaP 마트리겔 암세포 용액을 부드러운 피펫팅과 혼합하고 30마이크로리터의 세포를 50마이크로리터 주사기에 부착된 28게이지 바늘에 천천히 흡인하도록 요청합니다.

그런 다음 Graefe 조직 겸자를 사용하여 하나의 정낭 끝을 부드럽게 들어 올려 소포에 구멍을 뚫지 않고 조직에 장력을 가하고 바늘의 경사를 전립선엽의 장축과 평행하게 조심스럽게 삽입합니다. 전체 부피의 세포를 엽에 천천히 주입한 다음 누출을 방지하기 위해 바늘을 천천히 후퇴시킵니다.

성공적인 주사는 내부 전립선엽의 충혈로 명백합니다. 정낭과 주입된 전립선엽을 약 30초 동안 마우스 외부에 신중하고 꾸준히 유지하여 마트리겔이 엽 내에서 부분적으로 응고되도록 합니다. 멸균 폴리에스테르 팁 어플리케이터를 사용하여 비동소성 종양 발생을 방지하기 위해 복부로 누출되는 세포 용액을 수집