JoVE 실험 백과사전
암 연구
0 조회수 • 2:36 분 • April 30th, 2023
동소 점막내 접종 동안 점막 조직 조직형과 일치하는 종양 세포가 수용 동물의 점막 조직으로 전달됩니다.
시작하려면 마취된 마우스의 목을 수술 플랫폼에 고정하여 입에 더 쉽게 접근할 수 있도록 합니다.
주사기의 냉각된 기저막 매트릭스에 고도로 전이되는 암세포의 현탁액을 준비합니다. 낮은 온도는 현탁액이 응고되는 것을 방지합니다.
이 현탁액을 마우스의 안쪽 뺨이나 협측 부위에 조심스럽게 주입하십시오. 협측 부위는 혈액과 림프관 네트워크로 둘러싸인 협측 점막으로 둘러싸
여 있습니다.암세포 현탁액이 완전히 전달되었는지 확인하고 바늘을 부드럽게 집어넣습니다. 매트릭스가 응고되고 세포가 내부에 포함되도록 합니다.
마우스가 복구되도록 합니다. 주사 후 며칠 이내에 주사 부위에 원발성 종양이 발생합니다. 결국 전이 가능성이 높은 이 종양의 세포는 림프계를 통해 이동하여 림프절로 혈관외로 유출될 수 있습니다.
이 암세포는 새로운 미세 환경에 적응하고 증식하여 림프절에 전이성 콜로니를 형성합니다.
주사 직전에 얼음 위에 종양 세포 현탁액 대 기저막 매트릭스 비율로 세포를 혼합합니다. 수혜 동물당 100마이크로리터의 세포가 들어 있는 23G 바늘이 장착된 0.5밀리리터 주사기 1개를 로드합니다. 주사기를 얼음 위에 놓고 마취된 마우스에서 발가락 꼬집기에 대한 반응 부족을 확인합니다.
다음으로, 입 양쪽의 사용 가능한 열린 공간을 통해 바늘을 오른쪽 또는 왼쪽 협측 부위에 삽입하고, 주사기가 구강 내부에 있는 동안 협측 부위와 평행하게 유지하여 5초 동안 세포 기저막 매트릭스 현탁액의 전체 100마이크로리터 부피를 쉽게 주입합니다. 주사기를 부드럽게 빼내기 전에 모든 재료가 주입되었는지 확인하기 위해 주사기를 더 5초 동안 제자리에 두십시오. 종양은 약 일주일 안에 육안적으로 보이게 됩니다.