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암 연구
0 조회수 • 2:49 분 • April 30th, 2023
후근 신경절 또는 DRG는 척수 양쪽의 척추뼈 내에 있는 감각 뉴런의 세포체 클러스터입니다. 이들의 주요 기능은 말초 신경계에서 중추 신경계로 감각 신경 신호를 전달하는 것입니다.
등근 신경절을 분리하려면 갓 수확한 쥐 척추를 채취하는 것부터 시작하십시오. 척추를 해부하여 경추, 흉부 및 요추 부위를 분리합니다. 조직 수화를 보장하기 위해 척추 절편을 적절한 완충액에 보관하십시오.
이제 흉부 부분의 등쪽이 위를 향하도록 배치합니다. 섹션을 두 개의 측면 절반으로 나눕니다. 다음으로, 척추 부분의 해부된 절반을 안쪽이 위로 향하게 고정합니다. 절편의 분절된 척추뼈에서 이분된 척수(긴 관형 구조)를 부드럽게 분리하여 기본 DRG를 드러냅니다.
DRG는 척추관 내에 등쪽 및 복부 뿌리가 내장된 뚜렷한 흰색 덩어리로 나타납니다. 미세한 집게를 사용하여 DRG를 조심스럽게 당겨 척추관에서 제거합니다. 마지막으로, 수확된 DRG를 추가 다운스트림 응용 분야에 적합한 배지로 옮깁니다.
안락사된 쥐의 등쪽 피부를 70% 에탄올로 청소하고 가위를 사용하여 척추를 제거합니다. 경추, 흉부 및 요추 부위를 분리하고 PBS가 있는 10cm 배양 접시에 척추 절편을 넣어 조직 샘플을 수분으로 유지합니다.
섬세한 뼈 가위를 사용하여 등쪽과 복부 측면의 흉추 및 경추 뼈를 열어 척추를 측면 반쪽으로 분리하고 조직 절편을 신선한 PBS와 함께 깨끗한 10cm 접시에 넣습니다. 집게를 사용하여 척추뼈에서 척수를 부드럽게 분리하여 후근 신경절을 시각화합니다.
각 신경절 아래에 고정된 한 쌍의 미세한 집게의 끝을 놓고 조직을 잡고 조직이 박혀 있는 골강에서 당깁니다. 수확 직후 각 신경절을 2% 페니실린과 스트렙토마이신 또는 펜/스트렙혈구 및 10% 소 태아 혈청 또는 FBS가 보충된 DMEM 배양 배지에 넣어 신경 조직의 박테리아 오염을 방지합니다.
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