척수 추출: 체외 연구를 위해 쥐 척수를 분리하는 프로토콜

0 조회수3:08 • April 30th, 2023

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척수 추출의 경우, 안락사된 마우스를 엎드린 자세로 시작한다. 모피로 인한 잠재적인 오염을 방지하기 위해 에탄올을 뿌립니다.

머리에서 꼬리까지 정중선을 자르고 피부를 열어 밑에 있는 조직을 드러냅니다. 쥐의 두개골을 검사하여 두개골과 경추를 연결하는 두개경추 접합부를 찾으십시오.

다음으로 두개경추 접합부를 수직으로 절개하여 머리와 목 사이의 연결을 끊습니다. 다섯 번째 요추까지 척추를 해부합니다. 그런 다음 다섯 번째 요추에서 척추를 절단하여 하부 척추 수준과의 연결을 끊습니다.

이제 마우스를 바로 누운 자세로 돌립니다. 복막과 흉벽을 잘라 복강과 흉강을 모두 노출시킵니다. 척추에 접근하기 위해 복막 및 후복막 기관을 제거합니다.

갈비뼈를 잘라 척추를 신체의 나머지 부분과 분리합니다. 마지막으로 분리된 척수를 차가운 식염수로 헹구어 혈액 오염 물질을 씻어냅니다.

CO2 챔버에서 동물을 안락사시킨 후 털을 70% 에탄올에 담그고 건조시킵니다. 마우스를 엎드린 자세로 고정한 다음 목 뒤쪽에서 요추까지 두개꼬리로 뻗어 있는 정중선 절개를 합니다.

그런 다음 집게를 사용하여 진피 피판을 양측으로 들어 올리고 피하 조직을 노출시킵니다. 두개경추 접합부가 확인될 때까지 쥐의 두개골을 촉진합니다. 동물과 수직으로 기울어진 가위를 사용하여 두개경추 접합부에서 경추 근육과 척추를 절단합니다. 그런 다음 척추를 꼬리 쪽으로 해부하고 가위를 사용하여 다섯 번째 요추에서 완전한 꼬리 절개를 수행합니다.

그런 다음 마우스를 바로 누운 자세로 놓고 목에서 복부까지 정중선을 따라 절개한 후 피부를 옆으로 집어넣은 다음 복막을 자릅니다.

두개골로 가위로 흉벽을 엽니다. 복막 및 후복막 장기를 제거한 후 겸자와 수술용 칼날을 사용하여 갈비뼈를 절단하고 척추에서 약 5mm의 갈비뼈가 튀어나온 상태로 남깁니다. 신체의 나머지 부분에서 척추를 제거하고 차가운 PBS로 두 번 세척합니다.

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