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암 연구
0 조회수 • 3:32 분 • April 30th, 2023
환자 유래 요로상피 세포 암종 또는 UCC 마우스 모델 생성의 경우, 면역 저하 마우스에 인간 UCC 세포를 접종하여 암 진행 및 전이를 연구합니다.
이종이식을 시작하려면 면역력이 저하된 마취된 암컷 마우스를 취하십시오. 마우스의 허리를 면도하여 골반 부위를 노출시킵니다. 이제 마우스를 누운 자세로 놓고 노출된 피부가 접지 전극 역할을 하는 분산 패드와 접촉하여 전기 자극 중에 회로를 완성합니다.
다음으로, 가이드와이어에 부착된 얇은 속이 빈 튜브인 혈관 카테터를 가져갑니다. 카테터 표면에 윤활유를 바르고 마우스의 요도에 삽입하여 방광에 접근합니다. 방광벽을 자극하기 위해 가이드와이어에 활성 전극을 놓습니다. 이 절차는 방광 점막의 보호 장벽인 점액다당류 층을 파열시키는 데 도움이 되며 후속 종양 세포 생착을 돕습니다.
이제 요도에서 혈관 카테터-가이드와이어 어셈블리를 부드럽게 제거합니다. UCC 세포 현탁액이 들어 있는 주사기에 부착된 두 번째 혈관 카테터를 가져와 마우스의 요도에 삽입합니다. UCC 세포를 마우스의 방광에 주입합니다. 암세포는 방광 점막과 상호 작용하여 결국 다른 조직과 기관으로 퍼질 수 있는 종양을 형성합니다.
UCC 세포 주입을 위해 동물을 준비하려면 제모 크림을 사용하여 6-8주 된 암컷 NOD/SCID 마우스의 허리를 면도합니다. UCC 세포를 방광에 투여하려면 먼저 단극 전기 소작 기계를 4와트의 전력으로 설정합니다. 마우스를 마취한 후 주둥이를 이소플루란 코콘에 넣고 등을 분산 전극에 단단히 접지한 상태로 누운 자세로 눕힙니다.
24게이지 혈관카테터에 윤활 젤리를 바르고 마우스 요도를 통해 혈관 카테터를 부드럽지만 단단히 삽입합니다. 카테터가 진입 시 구부러지면 가이드 와이어를 카테터에 반쯤 삽입하여 안정성을 제공합니다. 그런 다음 혈관 카테터 끝을 지나 0.64mm 고정 코어 직선 가이드와이어를 1mm 완전히 삽입합니다.
단극 핀을 가이드와이어에 1초 동안 고정하여 방광 점막에 전기적 자극을 줍니다. 신선한 멸균 혈관 카테터를 1밀리리터 Luer-Lok 주사기에 부착하고 최대 200마이크로리터의 UCC 세포를 채취합니다. 요도에서 가이드 와이어와 혈관 카테터를 제거한 다음 세포 주사기가 부착된 혈관 카테터를 삽입합니다.
50마이크로리터의 세포를 마우스 방광에 주입하고 세포가 방광벽에 부착되도록 몇 초 동안 기다렸다가 혈관 카테터를 제거합니다. 마지막으로 이소플루란 노즈콘과 접지 패드에서 마우스를 제거하고 절차 후 1시간 동안 고통의 징후가 있는지 관찰합니다.