0 조회수 • 2:37 분 • April 30th, 2023
마우스 뇌의 냉동 절편 또는 얇은 냉동 조직 절편을 얻으려면 먼저 적절한 매립 배지에 포매된 마우스 뇌의 냉동 블록을 채취합니다.
냉동 블록을 극저온 조절기 챔버로 옮기고 후속 절편 절차를 위해 블록의 온도가 극저온 조절기의 설정 온도와 평형을 이룰 수 있도록 합니다.
그런 다음 포매 배지를 사용하여 냉동 조직 블록을 극저온 유지 장치 표본 디스크의 바닥에 장착합니다.
시편 디스크를 극저온 조절기의 시편 헤드에 놓습니다.
또한 극저온 조절기의 블레이드 홀더에 블레이드를 고정합니다.
외부 핸드휠을 사용하여 시편 헤드의 위치를 조정하여 조직 블록을 블레이드에 맞춥니다.
조직 블록과 블레이드의 방향이 올바르면 핸드휠을 움직여 절편을 시작하고 과도한 포매 배지가 포함된 조직 블록의 원치 않는 영역을 잘라냅니다.
냉동 조직 블록이 고정 칼날을 향해 전진함에 따라 원하는 두께의 조각으로 절단됩니다.
얇게 썬 냉동 조직 절편을 양전하를 띤 유리 슬라이드에 조심스럽게 옮깁니다. 하전된 유리 슬라이드는 정전기적으로 동결된 조직 절편을 끌어당겨 슬라이드 표면에 대한 접착을 촉진합니다.
마지막으로 추가 분석이 있을 때까지 절편을 저온에 보관합니다.
냉동 뇌종양 조직 절편을 얻으려면 먼저 극저온 조절기의 온도를 섭씨 영하 20도에서 영하 24도 사이로 설정하고 샘플 블록을 극저온 조절기 챔버에 30-60분 동안 넣습니다.
샘플이 평형을 이루는 동안 챔버와 나이프 홀더를 100% 에탄올로 세척하고 섹션 브러시에 RNase 세척액을 뿌립니다. 샘플이 준비되면 금형을 제거하고 신선한 절단 매체를 사용하여 냉동 조직 블록을 극저온 유지 장치 표본 디스크에 부착합니다.
블록을 디스크 홀더에 놓고 블록을 칼날에 맞춥니다. RNase가 없는 브러시 중 하나를 사용하여 뇌의 10마이크로미터 절편을 채취하여 조직 조각을 절단면에 조심스럽게 평평하게 펴고 풉니다.
뇌 조직 절편을 슬라이드에 장착하려면 표지된 RNase가 없는 PEN 유리 슬라이드의 양전하를 띤 면을 절편에 부드럽게 누르고 슬라이드를 챔버 내부의 보관 상자에 넣습니다. 모든 슬라이드를 수집했으면 보관 상자를 섭씨 영하 80도에 놓습니다.
본 논문은 마우스 뇌 조직의 동결 절편을 얻는 절차를 설명합니다. 추가 분석을 위해 동결된 뇌 샘플을 준비하고 절편화하는 데 필요한 단계들을 상세히 다룹니다.
동결 조직 절편 제작은 하위 탐색 애플리케이션을 위해 마우스 뇌 조직의 구조와 분자 함량을 고충실도로 보존할 수 있게 합니다. 이 절차는 조직의 무결성과 RNA 품질을 유지함으로써 전임상 리스크 감소에 결정적인 표적 검증 및 바이오마커 발굴을 지원합니다. 또한, 신경 종양학 및 중추신경계(CNS) 약물 발견 파이프라인의 공간 분자 분석을 위한 표준화되고 재현 가능한 기반을 제공합니다.
이 방법은 초기 타겟 가설 검증부터 리드 화합물 발굴 및 전임상 검증에 이르는 발견 연속체에 통합되어, 신경 종양학에서의 공간 분자 특성 분석을 지원합니다.
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마지막 업데이트: 29 8월 2026