심근경색의 쥐 모델 생성: 마우스 모델에서 좌측 전방 하행 관상동맥의 영구 결찰을 위한 수술 절차

시작하려면 마취된 마우스를 바로 누운 자세로 준비합니다. 목을 세로로 절개하고 침샘을 대체합니다. 다음으로, 스트랩 근육을 둘러싼 결합 조직층인 근막을 분리하여 밑에 있는 기관을 드러냅니다.

입을 통해 삽관 캐뉼라를 삽입하고 절개 부위를 통해 정확한 기관 삽입을 확인합니다. 캐뉼라를 원하는 매개변수로 설정된 인공호흡기에 연결하여 마우스에 적절한 환기를 제공합니다.

이제 마우스를 오른쪽 측면 욕창 위치에 놓습니다. 왼쪽 가슴 근육 사이의 피부를 절개하고 근막을 분리합니다. 인공호흡기를 호기말 양압 또는 PEEP 설정으로 변경하십시오.

세 번째 늑간 공간(세 번째와 네 번째 갈비뼈 사이에 절개하는 절개)에서 왼쪽 개흉술을 수행합니다. PEEP 모드 동안 기도의 양압은 개흉술 중 폐포 허탈을 방지합니다.

심장에 접근한 후 심낭을 제거하십시오. 좌측 관상동맥에서 분기되는 밝은 빨간색 혈관인 좌전하행 또는 LAD 관상동맥을 식별합니다. LAD 동맥은 좌심실의 주요 부분에 혈액을 공급합니다.

좌심방 근위부의 LAD 동맥을 외과적으로 묶습니다. LAD 동맥의 이러한 결찰은 심실의 창백함을 유발합니다. 절개 부위를 닫습니다. 동물을 새장으로 돌려보내십시오. 영구적인 LAD 동맥 결찰은 심장 근육으로의 혈류와 산소 공급을 방해하여 심장 근육의 손상과 사망을 초래합니다.

전기 면도기를 사용하여 마취된 25-30g 수컷 C57BL/6 마우스의 목과 흉곽 왼쪽을 빠르게 면도합니다. 발가락 꼬집기에 대한 반응 부족을 확인합니다. 동물의 눈에 연고를 바르십시오. 마우스를 온열 패드 위에 누운 자세로 놓고 눈이 과열되지 않도록 머리 아래에 작은 거즈 압축을 놓습니다.

접착 테이프로 팔다리를 고정하십시오. 윗 앞니 아래에 5-0 실크 봉합사 루프를 통과시키고 루프의 끝을 가열 패드에 고정하여 캐뉼라 삽입 중에 입을 벌린 상태를 유지합니다. 면도한 부위에 제모크림을 바르고 면봉으로 1분간 부드럽게 마사지합니다.

즈로 여분의 털과 크림을 제거하고 노출된 피부를 0.9% 식염수와 거즈로 떨어뜨립니다. 멸균 거즈 조각을 면도한 목과 가슴에 바르고 거즈에 요오도포비돈을 담그십시오. 인공호흡기를 킬로그램당 7밀리리터의 일회 호흡량과 분당 140회의 환기량으로 설정합니다.

미세 수술 입체 현미경 아래에서 마우스를 움직입니다. 목구멍 중앙의 피부를 잡고 꼬리/두부선을 따라 0.5cm 절개를 하고 침샘의 엽을 분리합니다. 구부러진 겸자를 사용하여 후두와 기관이 보일 때까지 흉골설골근의 근막을 부드럽게 분리합니다. 그런 다음 탄성 밴드에 부착된 견인기로 개구부의 가장자리를 고정합니다.

그런 다음 혀를 옆으로 부드럽게 당기고 겸자를 사용하여 16게이지 캐뉼라의 무딘 내부 바늘을 기관에 삽입합니다. 인후 절개를 통해 기관에 올바르게 삽입되는 것을 시각화하고 캐뉼라를 인공호흡기에 연결합니다. 요오도포비돈에 적신 거즈를 보충한 멸균 0.9% 식염수를 절개 부위에 놓아 수술 중 조직을 젖은 상태로 유지합니다.

그런 다음 배기 튜브를 물에 넣습니다. 기포가 있으면 삽관이 성공했음을 나타냅니다. 좌측 전하행 관상동맥 또는 LAD의 결찰을 위해 마우스를 오른쪽 욕창 위치로 조심스럽게 이동하고 왼쪽 전방 사지를 새 위치에 다시 고정합니다.

왼쪽 소흉근과 대흉근 사이의 선을 확인하고 선을 따라 비스듬히 1cm 피부 절개를 합니다. 무딘 해부 마이크로 가위를 사용하여 조직을 절개하지 않고 가슴 근육의 근막을 분리하고 탄성 밴드에 부착된 견인기를 사용하여 분리를 유지합니다.

인공호흡기를 호기말 양압 3cm의 물로 설정합니다. 뭉툭한 집게를 사용하여 세 번째와 네 번째 갈비뼈 사이의 세 번째 늑간 공간에서 흉강을 엽니다. 각 갈비뼈에 하나씩 두 개의 견인기를 흉곽에 넣고 구부러진 가는 집게를 사용하여 심장과 폐에 해를 끼치지 않고 조심스럽게 심낭을 제거합니다.

LAD를 왼쪽 귓바퀴 가장자리에서 정점을 향해 이어지는 표면적인 밝은 빨간색 선으로 찾습니다. 바늘 홀더를 사용하여 좌심방 아래 2-3mm의 LAD 아래에 7-0 실크 봉합사를 통과시킵니다. 심장 조직이 찢어지지 않도록 실크를 천천히 당기고 합자를 세 매듭으로 묶습니다. 좌심실의 왼쪽 하단 부분은 결찰 시 즉시 창백해집니다.

이제 갈비뼈 견인기를 풀고 집게로 세 번째 갈비뼈를 잡고 세 번째와 네 번째 갈비뼈 아래에 6-0 실크 봉합사를 두 번 통과합니다. 섭씨 37도, 0.9% 식염수를 입구에 세 방울 떨어뜨리고 호기 배기관을 2-3회 호흡 주기 동안 닫아 폐를 적절하게 팽창시킵니다.

봉합사를 두 번 던져 조이고 고정하고 근육을 고정하고 있는 견인기를 풀어 근육이 올바른 해부학적 위치로 돌아갈 수 있도록 돕습니다. 그런 다음 두 바늘로 흉부 피부를 닫고 5-0 봉합사 실크를 두 번 던집니다. 한 바늘, 5-0 봉합 실크, 두 번 던지기로 목 피부를 닫습니다.