Langendorff 역행성 심장 관류: 고립된 쥐 심장을 관류하는 생체 외 기술

시작하려면 마취된 마우스를 해부 보드 위에 누운 자세로 놓습니다. 절개하여 흉강에 접근하여 심장을 노출시킵니다. 대동맥과 그 가지(왼쪽 총경동맥과 상완두동맥)를 찾습니다. 이 동맥을 횡단하여 심장을 분리합니다.

즉시 절제된 심장을 영양이 풍부한 산소 완충 용액이 들어 있는 페트리 접시에 담급니다. 동시에 캐뉼라를 심장에 삽입하여 끝이 상행 대동맥에 도달하도록 합니다. 봉합사를 사용하여 캐뉼라를 결찰합니다. 캐뉼라를 산소 관류 용액이 들어 있는 주사기에 연결합니다.

관류액을 심장에 주입합니다. 이 단계를 통해 혈액이 관상 동맥을 떠나 폐정맥에서 분출됩니다. 그런 다음 캐뉼라 심장을 Langendorff 장치에 연결합니다. 연동 펌프를 사용하여 일정한 유속으로 관류를 수행합니다.

이러한 조건에서 완충액은 심장으로 관류됩니다. 이것은 대동맥 판막을 닫는 캐뉼라 삽입 압력을 생성하여 완충액이 관상 동맥을 통해 이동하도록 합니다. 결국 완충액은 심장 근육을 역행적으로 관류하고 나중에 폐정맥을 통해 분출됩니다. 성공적으로 관류된 심장은 이제 추가 다운스트림 적용을 위한 준비가 되었습니다.

8주에서 10주 된 수컷 C57BL/6 마우스를 안락사시킨 후, 조직 겸자를 사용하여 검상부의 피부를 들어 올립니다. 그런 다음 조직 가위를 사용하여 피부를 통해 측면 절개를 가볍게 만듭니다. 피부와 근막 사이를 둔기 해부합니다. 피부 절개를 겨드랑이 쪽으로 양쪽을 V자 모양으로 확장하고 흉곽을 통해 절개를 계속합니다.

그런 다음 조직 겸자를 사용하여 흉골을 고정하고 흉곽을 위쪽으로 편향시켜 심장과 폐를 완전히 노출시킵니다. 구부러진 집게를 사용하여 심낭을 벗겨냅니다. 흉선이 큰 혈관을 덮고 있는 경우 두 개의 구부러진 집게를 사용하여 흉선을 양쪽으로 찢습니다. 그런 다음 대동맥과 그 분지 동맥이 Y자형 혈관으로 보일 때까지 심장 기저부를 꼬리 쪽으로 부드럽게 당깁니다.

왼쪽 총경동맥의 대동맥을 횡단합니다. 그런 다음 상완두동맥을 절단합니다. 심장을 절제하고 즉시 티로드 용액이 들어 있는 페트리 접시에 담가 잔여 혈액을 씻고 펌핑합니다. 그런 다음 심장을 용액 1이 들어 있는 다른 페트리 접시로 옮깁니다.

실체 현미경으로 가는 홍채 가위를 사용하여 잉여 조직을 다듬습니다. 주사기에서 기포를 배출합니다. 그런 다음 두 개의 직선 결속 겸자의 도움으로 전체 캐뉼라 삽입 과정이 액체 표면 아래에서 수행되도록 주의하면서 역행 대동맥 캐뉼라 삽입