마우스 배아 요로에 메틸렌 블루 염료 주입: 요로의 선천적 폐색을 평가하는 방법

JoVE Encyclopedia of Experiments

생물학

0 조회수 • 3:47 분 • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

요로 폐쇄를 평가하려면 주산기 마우스 배아를 바로 누운 자세로 고정하는 것부터 시작하십시오. 이제 배아의 복강을 해부하여 한 쌍의 신장, 요관, 요도가 있는 총방광으로 구성된 완전히 발달된 요로를 찾습니다.

다음으로, 마이크로바늘이 장착된 튜브에 연결된 빈 주사기를 꺼냅니다. 짙은 파란색 추적 염료인 메틸렌 블루 용액으로 어셈블리를 채웁니다. 신장에 있는 요관의 깔때기 모양으로 확장된 근위 끝인 신우 내강에 미세바늘을 삽입하고 염료 용액을 주입합니다.

정수압으로 인해 염료는 신장의 신우에서 요관을 통해 흐르고 최종적으로 방광 내강으로 축적됩니다. 반대쪽 신장으로 염료 주입 절차를 반복하여 요로의 해당 쪽에서 염료의 흐름을 확인합니다.

마지막으로 카메라가 장착된 입체현미경을 사용하여 요로를 이미지화합니다. 영상 촬영 시 막히지 않은 요로는 방광이 깊게 얼룩진 반면, 폐색이 있는 비정상적인 요로는 염료의 자유로운 흐름을 제한합니다. 막힘 정도에 따라 방광 내강에 염료가 완전히 또는 부분적으로 없는 것이 관찰됩니다.

집게를 사용하여 피부를 조심스럽게 찢어 배아의 복강을 엽니다. 그런 다음 간, 위, 장 등 여분의 장기와 조직을 집게로 잘라내거나 빼내어 등쪽에 위치한 신장, 요관, 방광을 노출시켜 조심스럽게 제거합니다. 멸균 거즈 패드로 해부된 배아에서 과도한 혈액을 흡수한 다음 염색 주입을 계속합니다.

정수압에 의해 바늘 끝에서 메틸렌 블루 용액을 배출하여 바늘과 튜브의 기포를 제거합니다. 염료 용액이 들어 있는 주사기를 바늘 끝 높이 들어 올려 흐름을 시작한 다음 주사기를 내려 흐름을 멈춥니다. 다음으로, 바늘을 근위 요관 근처의 신우에 삽입하고 한 번 배치한 후에는 방해하지 않도록 주의합니다. 신장에 염료 주입을 수행하여 요로 폐쇄를 확인합니다.

신우에 바늘을 적절하게 삽입하면 이 검사의 성공 여부가 결정됩니다. 바늘은 신장을 통과하거나 혈관을 통과하지 않고 요관 쪽으로 신우에 삽입해야 합니다.

주사기를 약 20cm 들어 올려 정수압을 제공하고 15-16마이크로리터의 염료 용액이 흐르도록 합니다. 그런 다음 먼저 신우에서 시작하여 요관 길이, 마지막으로 방광 내강에서 염료의 파란색을 모니터링합니다. 주사기를 아래로 내려 염료 흐름을 멈추고 신장에서 바늘을 제거합니다. 신장의 수신증, 수요관 및 염료 용액의 최종 위치를 실험실 노트북에 기록하십시오.

마지막으로 반대쪽 신장을 주사하고 총 20초 동안 염료가 흐르도록 합니다. 실체현미경에 연결된 카메라와 이미징 프로그램을 사용하여 염료 용액으로 추적한 신장, 요관 및 방광의 이미지를 촬영합니다.

08:28

Zebrafish의 두뇌 뇌실 주입

관련 동영상

0 조회수

07:58

Zebrafish의에서 콩팥 세포 독소 미세 주입은 급성 신장 손상을 모델링하기

관련 동영상

0 조회수

07:51

유방암 센티넬 노드 생검에 있는 단 하나 기술로 1% 메틸렌 청색염의 응용

관련 동영상

0 조회수

09:24

마우스 요로 감염의 Transurethral 유도

관련 동영상

0 조회수

10:24

높은 처리량 현장에서 하이브리드화 방법

관련 동영상

0 조회수

03:14

생물발광을 이용한 쥐 모델에서 요로 감염의 시각화

관련 동영상

0 조회수

05:23

박테리아 감염 시각화를 위한 마우스 방광 조직 준비

관련 동영상

0 조회수

02:06

감염된 쥐 방광 내 세포 내 박테리아 군집 시각화

관련 동영상

0 조회수

02:52

태아 쥐 배아 채취: 임신한 쥐에서 배아를 채취하는 절차

관련 동영상

0 조회수

06:05

Methylene 청색 색소를 주입 하 여 요로 분기점 방해 결함 평가

관련 동영상

0 조회수

마지막 업데이트: 22 8월 2026