마우스 모델에서 동방결절 분리: 쥐 심장에서 SA 결절을 채취하는 절차

심장에서 동방결절 또는 S-A 결절에는 심장 전체에 전기 자극을 지속적으로 시작하고 전파하여 심장 박동 속도를 설정하는 특수 근육 세포가 포함되어 있습니다.

S-A 결절을 분리하려면 먼저 항응고제 처리된 안락사 마우스를 누운 자세로 준비합니다. 항응고제 치료는 효율적인 조직 분리를 위해 혈전을 예방하는 데 도움이 됩니다.

다음으로, 가로 피부 절개를 한 후 흉곽의 측벽을 절단하여 흉강의 내용물에 접근하고 밑에 있는 심장을 노출시킵니다.

항응고제 함유 완충액으로 심장에 수분을 공급하십시오. 기관과 함께 폐를 제거합니다.

주요 혈관을 절단하여 흉강에서 심장을 절제합니다. 절제된 심장을 섬세한 장기를 다루기 위해 완충액이 포함된 실리콘 엘라스토머 안감 접시로 옮깁니다.

심장의 정점을 확보하십시오. 이제 우심방 내에서 하대정맥과 상대정맥의 위치를 찾습니다. 또한, 대정맥 사이의 조직 패치 내에서 S-A 결절의 위치를 식별합니다.

심장에서 혈액을 배출하기 위해 정점을 제거합니다. 이제 심방을 심실에서 분리하십시오. 좌심방을 제거하기 위해 심방 중격을 따라 절단합니다. 우심방을 평평하게 놓고 S-A 결절 조직을 절제합니다.

안락사된 쥐의 피부를 지혈제로 잡는 것부터 시작하고, 수술용 가위를 사용하여 왼쪽 늑골궁에서 오른쪽 늑골궁까지 흉곽 바닥 바로 아래 피부를 가로 절개합니다. 수술용 가위를 사용하여 복막을 자르고 간과 횡격막을 조심스럽게 분리하고, 간에 흠집을 입히지 않고 과도한 출혈을 방지합니다.

흉부를 따라 횡격막을 절개하여 흉강을 노출시킵니다. 수술용 가위를 사용하여 늑골 아치의 가장자리에서 쇄골까지 흉곽의 측벽을 잘라 심장을 노출시킵니다. 그런 다음 23게이지 주사기 바늘을 사용하여 흉곽을 어깨 위로 고정합니다.

이송 피펫을 사용하여 따뜻한 헤파린화된 Complete Tyrode's 용액을 심장에 떨어뜨려 촉촉하게 유지합니다. 매우 미세한 Graefe 집게로 폐를 잡고 수술용 가위로 기관을 절단하여 폐를 제거합니다. 심장을 제거할 때는 극세한 Graefe 겸자로 심장의 정점을 잡고 수술용 가위로 대동맥과 하대정맥을 절단합니다.

경화된 실리콘 엘라스토머가 들어 있는 페트리 접시에 심장을 옮기고 따뜻한 헤파린화 Complete Tyrode 용액 2-3밀리리터로 심장을 목욕시키기 위해 이송 피펫을 사용합니다. 해부 핀으로 심장의 정점을 접시에 부착합니다.

Dumont #2 추궁 절제술 겸자로 하대정맥을 잡습니다. 하대정맥과 상대정맥을 통해 22게이지 주사기 바늘을 삽입하여 우심방에서 위치를 찾고, 이는 동방결절의 대략적인 위치도 식별합니다.

Dumont #2 추궁 절제술 겸자로 우심방이를 잡고 우심방이에 해부 핀을 넣어 제자리에 고정합니다. 좌심방이에 대해 동일한 절차를 반복합니다. 그런 다음 대정맥을 가로지르는 주사기 바늘을 제거합니다.

Castroviejo 가위를 사용하여 심실을 가로로 절개하거나 심장에서 혈액을 방출하여 심장의 정점을 제거합니다. 그런 다음 따뜻한 헤파린화 Complete Tyrode 용액을 추가하여 심장을 씻습니다. Castroviejo 가위를 사용하여 심방이 심실에서 분리될 때까지 방실 중격을 따라 자르고 절개를 심실에 더 가깝게 유지합니다.

좌심방을 제거하기 위해 심방 중격을 따라 절단합니다. 해부 핀을 우심방 주변에 놓아 평평하게 눕힙니다. Castroviejo 가위를 사용하여 심방에서 남아 있는 지방, 혈관 또는 조직을 제거하고 우심방에서 동방 결절을 찾습니다.