새끼 쥐의 백색 및 갈색 지방 창고 수집: 새끼 쥐에서 백색 지방 조직과 갈색 지방 조직을 채취하는 수술 절차

포유류에서 지방 조직 또는 지방 저장소(주로 지방 세포 또는 지방 세포로 구성된 특수 결합 조직)는 백색 지방 조직 또는 WAT와 갈색 지방 조직 또는 BAT의 두 가지 주요 유형으로 나눌 수 있습니다.

WAT는 미토콘드리아가 적고 지질 방울이 하나 있는 백색 지방세포로 구성되어 있으며 에너지를 저장합니다. 주요 WAT는 피하 사타구니 WAT와 내장 WAT입니다.

BAT는 수많은 미토콘드리아와 지질 방울이 있는 갈색 지방세포로 구성되어 있으며 체온을 조절합니다. 이 조직은 견갑간, 경추 및 겨드랑이 부위에서 발견될 수 있습니다.

이러한 지방 조직을 분리하려면 안락사된 쥐 새끼를 왼쪽 측면 위치에 있는 것으로 시작합니다. 다음으로 복부 피부를 절개합니다. 피부를 팔다리 쪽으로 부드럽게 집어넣습니다.

뒷다리의 상부 앞쪽 피부의 가장 안쪽 층 내에 위치한 피하 WAT를 식별합니다. 피부 아래에서 얇고 길쭉한 피하 WAT를 조심스럽게 절제합니다.

이제 쥐 강아지를 엎드린 자세로 놓습니다. 견갑골 또는 견갑골간 부위에서 머리 쪽으로 등쪽 피부를 절개합니다. 견갑골 사이의 짙은 빨간색 조직인 견갑간 BAT를 찾습니다. 견갑간 BAT를 부드럽게 제거합니다.

수확된 지방 조직을 적절한 냉각 완충액으로 세척합니다. 추가 처리가 될 때까지 저온에서 완충액이 들어 있는 튜브에 지방 조직을 보관하십시오.

피하 백색 지방 조직을 채취하려면 안락사된 신생아의 복부 주변의 피부를 자르고 다리 아래의 피부를 부드럽게 당깁니다. 피부 조직을 수집하지 않고 피부 안쪽이나 대퇴사두근 위에 부착된 투명하거나 흰색의 얇고 길쭉한 조직으로 나타나는 지방 저장소를 조심스럽게 채취합니다. 수확한 저장소를 PBS로 헹구고 지방 조직을 250마이크로리터의 PBS와 200마이크로리터의 2X 분리 완충액이 들어 있는 1.5밀리리터 튜브에 얼음 위에 놓습니다.

견갑간 갈색 지방 조직을 수집하려면 견갑골의 피부를 머리 위로 당기고 견갑골 사이에 있는 짙은 적갈색 지방 조직을 들어 올립니다. 지방 주위를 조심스럽게 절개하여 몸에서 떼어내고 조직의 일관성과 색상을 확인하십시오. 헹구고 나서, 250마이크로리터의 PBS와 200마이크로리터의 2X 분리 완충액이 들어 있는 두 번째 1.5밀리리터 튜브에 조직을 얼음 위에 놓습니다.