0 조회수 • 2:57 분 • July 8th, 2025
돼지 눈에는 빛 흡수를 돕는 소기관인 수많은 멜라노솜을 포함하는 입방체 상피 세포 집단이 포함되어 있어 이러한 세포의 색소 침착 모양을 만듭니다. 이러한 세포의 위치에 따라 망막 아래에 존재하는 상피 세포를 망막 색소 상피 세포 또는 RPE 세포라고 하며, 홍채를 감싸고 있는 세포는 홍채 색소 상피 세포 또는 IPE 세포로 알려져 있습니다.
RPE 및 IPE 세포를 분리하려면 먼저 돼지 눈을 채취하십시오. 눈 표면에 달라붙은 미생물을 제거하기 위해 적절한 소독액에 눈을 담그
십시오.소독액에서 눈을 제거하고 바늘을 사용하여 홍채 근처를 작은 절개합니다. 이 개구부를 사용하여 조리개 경계를 따라 완전한 원주 절단을 만듭니다. 이것은 망막이 있는 후방 안구에서 홍채가 포함된 눈의 앞쪽 부분을 분리합니다. 여분의 부분을 제거하고 홍채와 안구를 별도의 배양 접시에 옮깁니다.
홍채가 들어 있는 플레이트와 안구에 적절한 배양 배지를 추가합니다. 티슈를 긁어냅니다. 기계적 힘은 상피 세포를 느슨하게 하여 배지로 방출합니다. 분리된 IPE 및 RPE 세포를 흡인합니다. 별도의 배양 플레이트에 파종하고 추가 사용할 때까지 배양합니다.
눈에 남아 있는 근육 조직과 피부를 깨끗이 씻어내고 요오드 기반 용액으로 눈을 소독한 후 PBS로 헹굽니다.
IPE 세포를 분리하려면 시연된 대로 렌즈를 제거하고 홍채를 빼냅니다. 두 개의 붓꽃을 준비한 후 1밀리리터의 완전 배지를 넣고 평평한 불로 광택이 나는 파스퇴르 피펫으로 긁어 세포를 분리한 다음 세포를 세고 씨앗을 뿌립니다. 접시를 인큐베이터에 넣습니다.
RPE 세포를 분리하려면 후방 분절에서 유리체와 망막을 제거하고 전구를 페트리 접시에 넣습니다. 전구에 1밀리리터 완전 배지를 채웁니다. 곡선형 불 광택 파스퇴르 피펫을 사용하여 RPE 세포를 제거하고 1,000마이크로리터 피펫을 사용하여 전구 내에 세포 현탁액을 수집한 다음 재현탁을 위해 1.5밀리리터 튜브로 옮깁니다. 그런 다음 세포를 계산하고 시드하고 이전에 설명한 대로 플레이트를 배양합니다.