Anterior Eye Segment Culturing: 돼지 눈의 전방 분절 베어링 각막을 배양하는 방법

전방 안구 분절 배양의 경우 적절한 배양 접시로 시작하십시오. 배양 접시는 중앙에 높은 단계가 있으며, 유입 및 유출을 위해 두 개의 유체 포트에 연결되어 있습니다.

먼저 각막이 포함된 신선한 돼지 앞쪽 눈 부분을 스테이지 위에 놓습니다. 그런 다음 눈 부분 위에 클램프 링을 놓고 고정합니다. 다음으로, 적절한 배양 배지로 채워진 주사기로 구성된 관류 설정을 준비합니다. 주사기를 밸브, 필터 및 튜브에 연결하여 다른 쪽 끝에 구부러진 바늘 허브가 있습니다.

빈 주사기를 사용하여 유사하게 조립된 저장소 설정을 준비합니다. 이제 관류의 바늘 허브와 저장소 설정을 각각 유입 및 유출 포트에 연결합니다. 배지를 부드럽게 관류하고 전방 안부가 팽창하도록 합니다.

관류를 계속하고 기포와 과도한 매체가 저장소로 흐르도록 합니다. 그 후, 배양 접시를 원하는 높이와 표준 생리학적 조건에서 배양합니다. 그 결과 생리학적 조건에서 눈의 복잡한 구조를 시뮬레이션하는 3차원 모델이 생성됩니다.

압력 변환기를 저장소 밸브에 연결하여 안압을 지속적으로 모니터링합니다. 이제 앞쪽 안구를 추가 실험에 사용할 준비가 되었습니다.

페

트리 접시에 앞부분을 넣은 후 면봉을 미디어에 적시고 각막 중앙을 가볍게 두드려 색소를 제거합니다. 집게로 눈을 잡고 닦아 공막 주변의 여분의 색소를 제거합니다. 거꾸로 된 앞쪽 분절을 바닥 접시의 높은 부위 위에 놓고 각막이 높은 부위의 중앙에 유지

되도록 합니다.

클램핑 링을 새로 배치한 앞쪽 세그먼트 위에 놓고 L-키로 나사를 부드럽게 조입니다. O-링이 있는 유체 커넥터를 접시 바닥의 나사산 포트에 모두 부착합니다. 첫 번째 유체 커넥터에 18게이지 90도 구부러진 바늘 허브, 튜브 길이, 18게이지 바늘 허브, 나일론 주사기 필터, 3방향 밸브 및 매체로 채워진 20mm 주사기를 부착합니다.

두 번째 유체 커넥터에 첫 번째 유체 커넥터에 대해 시연된 대로 18게이지 90도 구부러진 바늘 허브, 튜브 길이, 18게이지 바늘 허브, 3방향 밸브를 부착한 다음 멸균 10밀리리터 주사기의 배럴 부분을 부착하여 액체와 기포를 잡는 저장소 역할을 합니다.

3방향 밸브를 주사기에 적절하게 열어 둔 상태에서 첫 번째 유체의 커넥터 포트를 사용하여 시스템을 통해 매체를 부드럽게 밀어 넣습니다. 전방 세그먼트를 팽창시키려면 튜브를 매체로 채우고 결국 저장소를 채웁니다. 미디어를 접시에 부드럽게 밀어 넣어 거품을 제거하고 접시