JoVE 실험 백과사전
생물학
0 조회수 • 4:58 분 • July 8th, 2025
생존 가능한 포유류 심실 심장 조직의 초박형 절편인 포유류 심장 조직 절편은 심장 조직의 구조와 생리학을 유지하여 중개 심혈관 연구를 위한 모델 시스템이 됩니다.
돼지 심장 조직 조각을 생성하려면 갓 수확한 돼지 심장을 냉장된 심정지 용액이 담긴 트레이에 넣으면 심장 활동이 일시적으로 중단되어 심장을 보호합니다. 심장을 해부하여 좌심실을 분리한 다음 균일한 크기의 조직 블록으로 절단합니다. 조직 접착제를 사용하여 심장 외막(심장의 바깥층)이 아래를 향하도록 진동 절개 표본 홀더의 바닥에 고정된 미리 만들어진 한천 블록에 조직 블록을 평평하게 고정합니다.
검체 홀더를 냉각되고 산소가 공급되고 완충액으로 채워진 진동 절개 트레이로 옮겨 조직의 생리적 상태를 유지하고 슬라이싱하는 동안 냉각합니다. 원하는 조직 절편 두께에 따라 진동극 블레이드 높이와 절단 매개변수를 조정합니다. 달리는 동안 진동 블레이드가 전진하여 조직 블록을 관통합니다.
한천은 슬라이싱하는 동안 조직 블록에 안정성을 제공하고 블레이드를 한 경로로 유지하여 정렬된 심근 섬유가 있는 균일하고 온전한 심장 조직 조각을 생성합니다. 조직 손상을 줄이기 위해 조직 절편을 수집하여 산소 완충 수조로 옮깁니다. 심장 조직 절편은 다운스트림 분석을 위한 준비가 되었습니다.
돼지 심장 조직 조각을 얻으려면 먼저 비브라톰의 조직 욕조 냉각 재킷에 얼음을 넣고 Tyrode의 용액을 욕조에 추가합니다. 1리터 플라스틱 병을 사용하여 티슈 욕조 냉각 재킷에서 녹은 얼음 유출을 수집하고 돼지 심장을 생물 안전 캐비닛에 있는 신선하고 차가운 심정지 용액 1리터가 들어 있는 트레이로 옮깁니다.
개폐식 멸균 메스를 사용하여 심장을 해부하여 좌심실을 분리하고 직사각형 면도날을 사용하여 좌심실을 1-2 입방체 센티미터 블록으로 자릅니다. 슬라이스를 위해 하나의 티슈 블록을 따로 보관하고 나머지 티슈 블록 조각을 얼음 위의 차가운 티로드 용액이 담긴 50밀리리터 튜브에 넣습니다.
예약된 티슈 블록을 부드럽게 마사지하고 비브라토임의 금속 샘플 홀더에 티슈 접착제 1-2방울을 추가합니다. 표면적이 약 1제곱센티미터인 4% 한천 블록 조각을 접착제에 붙이고 한천에 조직 접착제 1-2방울을 추가합니다.
심장 블록을 심장 심외막 쪽이 아래로 향하게 하고 조직이 홀더에 최대한 평평하게 되도록 한천에 부착하고 심장 블록이 있는 조직 홀더를 진동술의 슬라이싱 욕조에 넣습니다.
심장 심외막 쪽이 조
전체 스크립트를 보고 수천 개의 과학 동영상에 액세스하세요