짧은 후방 섬모 동맥 분리: 돼지 눈에서 온전한 짧은 후방 섬모 미세혈관을 절제하기 위한 프로토콜

안구는 주로 안동맥에서 혈액 공급을 받습니다. 안동맥이 시신경을 따라 통과하면서 분기되어 여러 개의 짧은 후방 모양 동맥(SPCA)을 형성합니다.

안구의 뒤쪽에서 SPCA는 두 가지 유형의 가지로 갈라집니다. 시신경 가지는 시신경에 가까운 가장 바깥쪽 눈 덮개인 공막으로 들어갑니다. 대조적으로, 원위 SPCA는 시신경에서 짧은 거리에서 공막을 관통합니다.

SPCA를 분리하려면 시신경과 외안구 조직 잔해물이 부착된 갓 해부된 돼지 눈을 채취하십시오. 적절한 생리학적 완충제가 포함된 해부 챔버에 안구를 담그십시오.

주변 근육층을 해부하여 눈 주위의 동맥을 시각화합니다. 눈구를 완전히 원주 절개하여 눈을 앞쪽과 뒤쪽으로 분리합니다. 눈의 뒤쪽 절반에서 유리체층을 제거합니다.

눈의 뒤쪽 절반을 시각화하여 시신경과 인접한 안구 뒤 맥관 구조(안구 뒤의 혈관)를 찾습니다. 짧은 후방 모양 동맥의 시신경 및 원위 가지를 찾습니다.

이러한 동맥 분절을 절제하고 원하는 완충액으로 세척하여 오염 물질과 잔류 혈액을 제거합니다. 추가 다운스트림 분석을 위해 SPCA를 저장합니다.

시신경 및 외안구 조직과 함께 신선한 돼지 눈은 부검 직후 현지 도축장에서 채취되었습니다. 얼음처럼 차가운 Krebs-Henseleit 완충액이 들어 있는 해부 챔버에 아이 글로브를 놓습니다. 날카로운 Mayo 가위로 주변 근육과 조직을 조심스럽게 잘라냅니다.

메스로 절개를 하고 눈이 앞쪽과 뒤쪽으로 분리될 때까지 날카로운 메이요 가위로 적도면을 따라 지구를 자릅니다. 한 쌍의 표준 패턴 겸자를 사용하여 눈의 뒤쪽 절반에서 가능한 한 많은 유리체를 제거합니다.

해부 핀을 사용하여 눈의 뒤쪽 절반을 조심스럽게 고정한 후 시신경을 둘러싼 결합 조직을 부드럽게 잘라내어 Student Vannas 스프링 가위로 밑에 있는 안구 후혈관 구조를 노출시킵니다.

한

쌍의 시신경 및 원위 짧은 후방 모양 동맥을 주변 결합 조직과 함께 유형 5 정밀 핀셋과 Vannas 수정체 절개술 가위를 사용하여 분리합니다. 오염 물질과 혈액 잔류물을 제거하기 위해 얼음처럼 차가운 PBS로 분리된 동맥을 헹구기 전에 끝이 가는 매우 가는 핀셋과 가위를 사용하여 동맥 분절에서 결합 조직을 부드럽게 제거합니다.