토끼로의 배아 이식: 배란 수혜자 암컷 토끼 모델의 난관으로 배아를 복강경 투시경 유도 이식하는 절차

배아 이식을 수행하려면 수정되지 않은 토끼 암사슴을 가져가십시오. 토끼에게 성선 자극 호르몬 방출 호르몬의 합성 유사체를 근육 주사합니다. 이 절차는 배란을 유도하고 토끼가 가성 임신을 보일 수 있도록 하며, 이는 신체가 생존 가능한 태아를 갖지 않고 임신과 유사한 증상을 나타내는 상태로, 이는 후속 단계에서 배아 생존 가능성을 높입니다.

토끼를 마취하고 발을 머리 위로 올려 기울인 자세로 누운 자세로 눕힙니다. 이 위치는 복부 장기를 위쪽으로 이동하여 생식 기관과 충분한 간격을 확보합니다. 복부 앞쪽 부분에 구멍을 만드십시오. 이 영역을 사용하여 복강 내부에 내시경 카메라를 삽입하여 생식 기관을 시각화합니다.

이제 생존 가능한 배아가 들어 있는 주사기-카테터 어셈블리를 가져 가십시오. 배아를 자궁 쪽으로 통과시키는 운하인 난관 근처에 바늘을 삽입합니다. 난관의 긴 관형 위치인 팽대부에 도달할 때까지 깔때기 모양의 구멍 또는 누두의 끝을 통해 카테터를 전진시킵니다.

배아를 ampulla에 방출합니다. 카테터를 집어넣고 카메라를 제거합니다. 절개 부위를 밀봉합니다. 토끼를 새장으로 옮기고 모니터링하십시오. 배아는 팽대부 부위에서 착상이 일어나는 자궁 부분인 자궁 뿔 쪽으로 이동합니다. 건강한 배아가 착상되어 결국 성공적인 임신으로 이어집니다.

이식 당일 신선하거나 해동된 배아를 실체 현미경으로 섭씨 37도 기본 배지로 헹구고 적절하게 구성된 17게이지 경막외 카테터를 1밀리리터 주사기에 부착합니다. 1cm의 기본 배지를 카테터에 흡인한 다음 작은 기포를 흡인합니다. 그런 다음 5-7개의 배아와 10마이크로리터의 기본 배지를 흡인한 다음 마지막 1센티미터의 기본 배지에 또 다른 작은 기포를 흡인합니다.

배아가 로드되면 마취된 수혜 토끼를 온난화 단계의 우리에 넣고 동물의 눈에 연고를 바릅니다. 페달 반사에 반응하지 않는 것을 확인한 후 복부 복부의 털을 면도하고 클로르헥시딘 글루코네이트 비누로 수술 부위를 청소하고 남아 있는 털을 제거합니다.

수술 부위에 구멍이 뚫린 멸균 드레이프로 해당 부위를 덮고 내시경 투관침 1개를 복강에 5cm, 검상돌기에 꼬리 쪽 2cm를 삽입하고 압력 조절 기계식 주입기를 사용하여 복막강을 팽창시킵니다.

내시경 투관침을 통해 내시경 카메라를 삽입하고 17게이지 경막외 바늘을 누두에서 2-3cm 떨어진 사타구니 부위에 삽입합니다. 경막외 바늘을 통해 하중된 카테터를 복부에 삽입하고 경막외 카테터의 1-2cm를 완부부의 누두를 통해 삽입합니다.

카테터 플런저를 부드럽게 눌러 배아를 난관으로 방출합니다. 두 기포 모두 카테터에서 빠져나와야 합니다. 배아가 방출된 직후 카테터를 제거하고 나머지 배지를 흡인 및 방출하여 배아가 없는지 확인합니다.

배아의 성공적인 이식을 확인한 후 경막외 바늘과 내시경 카메라를 제거하고 내시경 투관침을 통해 복부 이산화탄소를 방출합니다. 클로르헥시딘 용액으로 투관침 절개 부위를 청소하고 미분화된 알루미늄과 플라스틱 드레싱으로 상처를 봉합합니다. 그런 다음 적절한 항생제와 진통제로 동물을 치료하고 완전히 회복될 때까지 동물을 모니터링합니다.