0 조회수 • 2:15 분 • July 8th, 2025
나노블레이드는 캡슐화된 바이러스 유전 물질이 없는 합성 바이러스 유사 입자로, 숙주 세포로 이물질이 유입되는 데 적합한 운반체입니다. 이 나노블레이드는 시험관 내에서 나노블레이드를 조립하는 데 사용되는 진핵생물 생산자 세포에서 파생된 지질 이중층막으로 둘러싸인 마우스 백혈병 바이러스의 레트로바이러스 코어를 사용하여 구성됩니다.
코어에는 표적 게놈 서열에 특이적인 sgRNA와 복합체화된 Cas9 효소가 포함되어 있습니다. 핵심 단백질은 지질 이중층을 통과하는 막관통 도메인 또는 TM을 포함하는 외피 단백질로 둘러싸여 있습니다. TM은 이중층 코팅에서 돌출된 세포외 당단백성 표면 도메인 또는 SU에 부착됩니다.
유전자 편집에 나노블레이드를 사용하려면 부착된 표적 세포를 배양하여 나노블레이드 용액으로 보충합니다. 배양에서 나노블레이드의 돌출된 SU는 숙주 세포 표면의 해당 수용체를 인식하고 이에 결합합니다. 이로 인해 SU 도메인 구조가 수정되어 방출이 촉진됩니다.
이러한 변화는 TM 도메인의 형태 변화를 유발한 다음 숙주막에 결합합니다. 이 결합은 나노블레이드를 숙주 세포 근처로 가져와 바이러스 이중층막과 숙주막의 융합을 허용하고 바이러스 코어가 세포질로 이동합니다.
세포 내부로 들어가면 코어가 분해되어 표적 부위에서 게놈 편집을 수행할 수 있는 Cas9-sgRNA 복합체가 방출됩니다.
나노블레이드를 이용한 표적 세포의 형질도입을 위해, 세포 배양 배지를 정제된 나노블레이드를 포함하는 배지의 500마이크로리터로 교체하십시오. 세포 배양 4-6시간 후, 배지를 정상량의 신선한 배지로 교체합니다.