0 조회수 • 3:03 분 • July 8th, 2025
커피 녹병에서는 병원성 곰팡이인 Hemileia vastatrix의 포자가 식물 표면에 착륙하여 발아관을 성장시켜 균사를 통해 감염을 시작합니다.
이 균사는 조직 내부로 퍼져 식물 영양분을 흡수하는 하우스토리아(haustoria)라고 하는 특수한 손가락 모양의 구조를 통해 식물 세포에 침입합니다. 하우스토리아는 또한 식물의 저항성 단백질에 의해 인식되는 이펙터 분자를 분비하여 감염을 제한하기 위해 펙틴이 풍부한 하우스토리아를 캡슐화합니다.
이러한 상호 작용을 시각화하려면 수지가 포매된 초박형 감염된 커피 잎 섹션부터 시작하십시오. 이제 페놀, 젖산, 글리세롤 및 코튼 블루로 구성된 조직학적 염색인 락토페놀 코튼 블루로 샘플을 처리합니다. 슬라이드를 잠시 가열합니다.
염료 성분이 조직에 침투함에 따라 페놀은 살아있는 유기체를 제거하고 젖산과 글리세롤은 세포 구조를 보존하는 데 도움이 됩니다. 동시에 코튼 블루 분자는 곰팡이 세포벽의 키틴 부분에 결합하여 파란색으로 염색합니다.
증류수로 샘플을 세척하십시오. 그런 다음 샘플을 루테늄 적색 염료로 처리합니다.
양전하를 띤 루테늄 분자는 펙틴이 풍부한 식물 세포벽에서 음전하를 띤 다당류에 결합하여 빨간색으로 염색합니다. 다시 슬라이드를 세척하고 현미경으로 시각화합니다.
펙틴이 풍부한 식물 세포벽은 빨간색으로 나타나며 파란색 곰팡이 균사에서 뻗어 있는 파란색 흡자를 캡슐
화합니다.8cm 강철 블레이드가 장착된 회전식 마이크로톰을 사용하여 블록을 5마이크로미터 두께의 섹션으로 자릅니다. 증류수로 덮인 유리 슬라이드에 절편을 놓은 다음 슬라이드를 핫 플레이트에 옮겨 섭씨 40도에서 건조시키고 유리 슬라이드에 대한 절편의 접착을 촉진합니다.
건조 후 유리 슬라이드에 블록 참조 이름과 슬라이드 번호로 라벨을 붙입니다. 락토페놀에 함유된 5% 코튼 블루 2밀리리터로 섹션을 덮고 섭씨 45도의 핫플레이트에서 5분 동안 가열합니다.
증류수를 채운 비커에 슬라이드를 세 번 씻어 여분의 염료를 제거합니다. 0.01% 루테늄 레드 2밀리리터를 물에 1분 동안 염색시킵니다.
증류수를 채운 비커에 슬라이드를 세 번 씻어 여분의 염료를 제거합니다. 절편 위에 증류수 한 방울을 떨어뜨리고 광학 현미경 분석을 수행하기 위해 절편을 커버슬립으로 덮습니다.