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생물학적 기술
0 조회수 • 2:30 분 • July 8th, 2025
식물에서 복잡한 생체 고분자인 리그닌은 일반적으로 조직의 세포벽에 침착되어 지지력을 제공합니다.
목화는 주로 혈관 및 섬유와 같은 물 전도성 목부 세포의 2차 세포벽 비후와 다발간 섬유와 같은 외 목부 세포에서 발견됩니다.
구조적으로 리그닌은 가교된 모노리그놀 전구체로 구성됩니다. 이러한 방향족 알코올은 중합되어 고도로 분지된 구조를 형성합니다. 이 기능은 식물의 강도와 강성을 향상시킵니다.
Wiesner 염색을 사용하여 리그닌 침착을 시각화하려면 식물의 중간 또는 하부 부분에서 파생된 아가로스 포매 쌍떡잎 줄기 단면을 취합니다. 적절한 완충액이 들어 있는 미세 원심분리기 튜브에 첨가하십시오.
산성화된 플로로글루시놀과 에탄올을 포함하는 준비된 염색액을 줄기 절편에 첨가합니다. 리그닌에 존재하는 알코올은 플로로글루시놀 및 에탄올과 반응하여 분홍색 색소를 생성합니다. 그 결과 특수 세포의 세포벽에 리그닌 침착에 해당하는 분홍색 착색이 발생합니다.
이제 염색된 부분을 현미경 슬라이드에 옮깁니다. 기포를 피하고 섹션 위에 커버슬립을 부드럽게 놓으면 더 잘 시각화할 수 있습니다. 광학 현미경으로 절편을 시각화합니다.
특수한 목부 세포의 분홍색과 줄기 단면의 다발간 섬유는 이러한 조직에 리그닌의 존재를 확인합니다.
플로로글루시놀 염색의 경우 줄기 절편을 미세 원심분리기 튜브로 옮깁니다. 플로로글루시놀 용액 1밀리리터를 튜브에 넣고 플로로글루시놀 염색의 염산은 부식성이 높기 때문에 즉시 캡을 씌웁니다. 튜브를 부드럽게 움직여 모든 부분이 얼룩지도록 합니다. 절편을 절단된 피펫 팁에 부드럽게 피펫팅하고 현미경 슬라이드에 올려 놓습니다. 커버슬립으로 섹션을 덮습니다. 명시야 조명 아래에서 섹션을 관찰하십시오. 용액은 5분에서 10분 안에 건조되어 표본의 열화를 일으키므로 해당 시간 내에 이미징을 완료해야 합니다.