Calcofluor White staining: 쌍떡잎식물 줄기 절편의 세포벽에 있는 셀룰로오스 침전물의 UV 유도 형광 시각화를 위한 간단한 방법

0 조회수2:37 • July 8th, 2025

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식물 세포에서는 특수한 보호층인 세포벽이 원형질막을 둘러싸고 있습니다. 세포벽은 주로 β-1, 4 글리코시드 결합을 통해 끝에서 끝까지 연결된 포도당 단량체의 선형, 분지되지 않은 다당류인 셀룰로오스로 구성됩니다.

셀룰로오스는 헤미셀룰로오스, 펙틴 및 단백질 매트릭스에 내장된 직교 배열된 셀룰로오스 미세섬유의 형태로 응집된 상태로 존재합니다.

혈관 목부 조직 및 다발간 섬유와 같은 특정 세포는 세포벽에 경화제인 리그닌도 포함합니다.

식물 세포벽의 셀룰로오스 침착을 시각화하려면 완충액에 있는 쌍떡잎 식물 줄기의 아가로스 포매 횡단으로 시작합니다. 화학 형광, 평면 염료인 칼코플루어 화이트 수용액을 첨가하십시오. 염료가 조직으로 확산되도록 배양합니다.

일단 내부로 들어가면 칼코플루어 화이트는 수산기 작용기를 통해 상호 작용하여 셀룰로오스에 있는 포도당 단량체의 수산기와 수소 결합을 형성합니다. 이는 염료를 셀룰로오스에 근접하게 만들고 추가적인 반 데르 발스 상호 작용을 촉진하여 안정적인 염료-셀룰로오스 복합체로 이어집니다.

스템 섹션을 유리 슬라이드에 옮기고 커버슬립을 장착합니다. 자외선 조명 아래에서 셀룰로오스 결합 염료 분자는 밝은 흰색을 형광으로 발산합니다.

표피, 피질 및 속의 세포는 높은 셀룰로오스 함량으로 인해 세포벽 윤곽이 명확하게 구분된 강렬한 형광을 나타냅니다. 이에 비해 목부와 다발간 섬유의 세포는 희미하게 형광을 발하며, 이는 리그닌의 존재로 인해 부적절한 염료 확산을 시사할 수 있습니다.

칼코플루어 백색 염색의 경우, 줄기 절편을 미세 원심분리기 튜브로 옮기고 0.02% 칼코플루어 백색 용액 1밀리리터를 첨가합니다. 용액을 위아래로 부드럽게 피펫팅합니다. 인큐베이팅을 진행하고 UV 광선에서 절편을 관찰하기 전에 텍스트 프로토콜에 자세히 설명된 대로 절편을 세척합니다.

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마지막 업데이트: 1 8월 2026