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생물학적 기술
0 조회수 • 3:56 분 • July 8th, 2025
혈액 식사를 준비하고 원하는 농도의 활성 테스트 화합물을 제세린 토끼 혈액에 첨가하여 모기 먹이 분석을 시작합니다. 혈액 가루에는 피브린이 부족하여 혈액 응고를 방지합니다.
이 혈액 가루를 막 공급 장치의 전달 포트에 넣으십시오. 가열 장치에 부착하여 혈액을 최적의 온도로 유지합니다. 막을 젖산 용액으로 코팅합니다.
먹이를 줄 가능성을 높이기 위해 굶주린 암컷 모기가 있는 성충이 있는 새장에 이 장치를 넣으십시오. 어둠 속에서 배양하십시오. 젖산은 모기를 먹이 단위로 유인합니다. 어두운 환경은 그들이 먹이를 먹도록 장려합니다.
피를 먹인 모기를 성장실로 옮깁니다. 혈분이 소화된 후 활성 테스트 화합물이 모기의 몸에 들어가 다양한 장기에 영향을 미치고 일부는 사망하게 합니다.
죽은 모기의 수를 세고 사망률을 계산하십시오. 챔버에 계란 컵을 도입하여 생존한 모기의 생식 기관에 대한 테스트 화학 물질의 효과를 평가합니다.
암컷 모기는 혈액 가루의 단백질을 이용하고 알을 낳고 컵 안에 모입니다. 알의 수를 세어 번식력 감소를 추정
합니다.높은 사망률과 낮은 번식력은 화합물의 살충 능력에 해당합니다.
흡인기로 생후 4-5일 된 성체 암컷 모기 약 150마리를 모아 별도의 새장으로 옮깁니다. 수유 분석 1-24시간 전에 설탕 공급원을 제거하십시오.
시험 화합물의 80밀리몰 원액을 물에 준비합니다. 그런 다음 물로 연속적으로 희석하여 원하는 농도의 작업 원액을 얻습니다.
원하는 테스트 농도를 얻으려면 1.5밀리리터 튜브에 960마이크로리터의 제염소 토끼 혈액에 각 희석액 40마이크로리터를 첨가하고 피펫팅으로 혼합합니다. 공급 장치에 멤브레인 필터를 놓고 고무 링으로 밀봉합니다.
그런 다음 피펫을 사용하여 공급 장치의 뒷면에 있는 전달 포트를 통해 테스트 용액과 함께 혈액 1밀리리터를 옮깁니다. 공급 장치를 가열 장치에 부착합니다. 그런 다음 새로 준비한 10% 젖산 용액으로 멤브레인 표면을 부드럽게 닦습니다.
공급 장치를 케이지에 넣습니다. 새장을 어두운 천으로 덮고 모기가 1시간 동안 먹이를 먹도록 합니다. 모기가 먹이를 먹은 후 새장을 섭씨 4도의 냉장고에 5분 동안 넣어 모기를 마취시킵니다. 그런 다음 새장에 있는 모기의 총 수를 세고 기록합니다.
복부를 검사하여 완전히 먹이를 먹은 암컷 모기와 부분적으로 먹이를 먹인 암컷 모기의 총 수를 세고 기록합니다. 용량당 최소 50마리의 혈액 먹인 모기를 채취해야 합니다. 먹이를 먹지 않은 모기를 제거하십시오. 그런 다음 케이지를 성장실로 옮기고 점수표를 사용하여 적절한 시점에서 죽은 모기의 수를 기록합니다.
수혈 후 3일째에 계란컵을 케이지에 72시간 동안 넣습니다. 해부 현미경을 사용하여 처리당 생산된 총 난자 수를 계산합니다.