0 조회수 • 2:52 분 • July 8th, 2025
바이러스는 숙주 세포 수용체에 결합하여 엔도좀으로 내재화됩니다. 엔도솜막은 바이러스막과 융합하여 세포 내부에 바이러스 내용물을 방출합니다.
핵에 도달하면 바이러스 게놈은 mRNA로 전사되고 나중에 번역되어 바이러스 단백질을 형성합니다. 바이러스 성분은 세포질로 들어가 비리온으로 조립되어 세포에서 끼어나 세포병증 효과, 즉 숙주 세포의 형태 변화 및 사멸을 일으킵니다.
숙주 세포 임피던스를 측정하여 바이러스 생존 동역학을 평가하려면 바닥에 임피던스 측정 미세 전극으로 코팅된 멀티웰 플레이트를 가져 가십시오. 웰에 숙주 세포 현탁액을 추가하고 세포가 전극 표면에 부착되고 성장할 수 있도록 배양합니다.
다음으로, 바이러스 부하가 다른 식염수 전처리된 바이러스 현탁액을 복용합니다. 식염수 처리는 바이러스에 염화물을 공급하여 바이러스를 죽이는 차아염소산을 생성하여 바이러스 감염성을 감소시킵니다. 이러한 바이러스 현탁액을 각각의 웰에 추가하십시오.
부착 세포에 의한 세포 임피던스(전극을 통한 전류의 흐름을 반대하는 현상)를 측정합니다.
바이러스는 부착된 숙주 세포를 감염시키고 형태를 변경하여 전극에서 변형된 세포를 분리시킵니다. 시간이 지남에 따라 더 많은 세포가 감염됨에 따라 숙주 세포 매개 세포 임피던스가 감소합니다.
시간 경과에 따른 감염된 세포 박리로 인한 임피던스 변화인 세포 지수를 플로팅합니다.
인플루엔자 A 바이러스 생존 동역학을 평가하려면 증류수에 염화나트륨을 리터당 35g의 최종 농도로 첨가하고 생성된 식염수 900마이크로리터를 2밀리리터 냉동관에 첨가합니다. 각 냉동관에 100마이크로리터 바이러스 스톡을 추가하고 적절한 실험 기간 동안 튜브를 섭씨 35도 인큐베이터에 넣습니다.
배양이 끝나기 전날, 16웰 마이크로타이터 플레이트에 웰당 100마이크로리터의 바이러스 증식 배지에 3 x 10 4개의 새로 분할된 MDCK 세포를 시드하고 배경 임피던스를 측정하고 웰 바닥에 세포의 균일한 분포를 측정할 수 있도록 단계를 반복합니다. 그런 다음 섭씨 37도, 이산화탄소 5%에서 24시간 동안 세포를 성장시킵니다.
다음날, 세포를 두 번 세척한 다음 시연된 대로 신선한 배양 배지에서 10배 희석한 식염수 증류 바이러스 100마이크로리터로 세포를 감염시키고 최소 100시간 동안 15분마다 세포 임피던스를 모니터링합니다.