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생물학적 기술
0 조회수 • 5:21 분 • July 8th, 2025
생체 분자 상호 작용을 연구하기 위해 표면 플라즈몬 공명(SPR)을 수행하려면 플로우 셀의 SPR 검출기 위에 센서 칩을 배치하는 것으로 시작합니다. 이 금속 코팅 센서 칩은 칩 표면에 하이드로겔 재료 층이 증착되어 있어 단백질 고정에 더 적합합니다.
하이드로겔과 상호 작용하여 표면에 고정되는 바이러스 펩타이드로 칩을 오버레이합니다. 비특이적 단백질 상호 작용을 방지하는 알칼리성 담금질 용액으로 세척하십시오.
편광을 칩에 직접 전달합니다. 공명각에서 금속 전자는 이 빛을 흡수하고 공명하여 해당 반사각에서 반사된 빛의 강도를 감소시킵니다.
광검출기는 이 반사광을 수집하고 프로세서는 이 신호를 기준선으로 변환하여 시간에 대한 센서 응답을 나타내는 그래프인 센서그램을 생성합니다.
항바이러스제 용액을 플로우 셀에 흐르게 합니다. 흐름 중에 항바이러스제는 칩의 고정화된 바이러스 펩타이드와 상호 작용합니다. 이러한 연관성은 굴절률을 변경하여 반사광의 각도와 강도를 변경하여 궁극적으로 센서 응답을 초래합니다.
두 분자 간의 상호 작용을 방해하여 해리를 일으키고 센서 응답을 감소시키는 높은 이온 강도의 세척 완충액을 추가합니다.
센서그램의 모양을 분석하고 생체 분자 상호 작용에 중요한 두 분자의 결합 및 해리를 평가합니다.
듀얼 채널 SPR 시스템의 경우 HBS-EP+를 실행 완충액으로 사용하고 pH 1.5 - 1.6의 10밀리몰 글리신 염산을 재생 완충액으로 사용하고 기기 탈기 장치, 자동 시료 주입기 및 펌프를 켭니다. 그런 다음 전체 시스템을 이중 증류수로 1시간 동안 세척합니다.
다음으로, 검출기에 침지 오일을 떨어뜨리고 얇은 금막으로 코팅된 유리 센서 칩을 3포트 플로우 셀 아래의 검출기에 직접 카르복시메틸덱스트란 하이드로겔로 기능화한 유리 센서 칩을 장착합니다. 그런 다음 핸들링을 아래로 당겨 설정을 수정합니다.
단백질 리간드를 센서 칩에 고정하려면 메뉴 표시줄에서 양식을 클릭하여 실행 테이블을 열고 통합 SPRAutoLink 소프트웨어에서 테이블 편집기 실행 을 클릭합니다. 그런 다음 사용 가능한 실행 테이블 목록에서 BASIC_Immobilization를 선택하고 컴퓨터 화면의 실험 절차 단계를 따릅니다.
그런 다음 양식 섹션에서 샘플 세트 편집기를 클릭하여 추가 분석을 위해 자동 시료 주입기에 배치된 두 랙의 시약 목록을 작성합니다. 메뉴 표시줄에서 도구로 Autosampler Sampler Direct Co
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