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면역학
0 조회수 • 3:20 분 • July 8th, 2025
쥐 모델에서 염증성 장 질환인 대장염을 유발하려면 새장에 갇힌 쥐를 예로 들어 보겠습니다.
식수를 대장염 유발 다당류인 덱스트란 황산나트륨, DSS 용액으로 대체하십시오. 마우스가 대장염을 발병시키기 위해 용액을 섭취하도록 하십시오.
섭취 시 DSS는 마우스 결장의 내강으로 들어갑니다. 결장에는 두꺼운 점액층이 포함되어 있어 공생 미생물과 밑에 있는 상피 세포 단층 사이에 물리적 장벽을 제공합니다.
DSS는 점액층을 관통하여 상피 세포로 들어갑니다. 세포 내부에서 DSS는 밀착 접합 단백질의 발현을 변경하고 세포사멸을 유도하여 상피층과 점막 장벽을 파괴합니다. 이를 통해 내강 미생물이 상주 수지상 세포와 대식세포가 있는 기본 조직인 고유층으로 들어갈 수 있습니다.
면역 세포는 미생물을 인식하여 다운스트림 신호 전달을 활성화하여 전염증성 사이토카인을 분비합니다. 사이토카인은 과장된 면역 반응을 일으켜 염증을 유발하는 다수의 T 세포의 침윤을 유발합니다.
대장염의 발병을 나타내는 위장 장애 및 체중 감소에 대해 치료받은 마우스를 모니터링합니다.
쥐를 안락사시키십시오. 전체 결장을 외과적으로 분리합니다. 결장을 근위부, 중간, 원위 부분으로 나누고 조직 보존을 위해 고정제를 추가합니다.
조직은 대장염을 평가하기 위한 다운스트림 분석을 위한 준비가 되었습니다.
덱스트란 황산나트륨 또는 DSS 대장염을 유발하려면 7일 동안 일반 식수를 3% DSS 용액으로 임 의로 대체하고 각 마우스의 체중, DSS 용액 소비량 및 대변 생성을 매일 측정합니다. 7일간의 치료가 끝나면 마우스를 바로 누운 자세로 놓고 작은 가위를 사용하여 복부에 3cm 길이의 정중선을 절개합니다.
그런 다음 집게를 사용하여 결장을 들어 올려 주변 장간막에서 분리하고 맹장과 직장이 보일 때까지 전체 결장을 추출합니다. 대장 맹장 가장자리와 골반 깊숙한 곳에서 조직을 절개하여 각각 근위 및 원위 결장을 제거합니다.
분리된 결장의 길이를 측정하고 기록하고, 위관 바늘이 장착된 10밀리리터 주사기를 사용하여 10밀리리터의 얼음처럼 차가운 PBS로 결장을 세척하여 용출액이 맑아질 때까지 대변과 혈액을 제거합니다. 조직학적 식별을 위해 조직 샘플을 동일한 크기의 근위부, 중간 및 원위 섹션으로 나누고 섭씨 4도에서 밤새 4% 파라포름알데히드에 조직을 고정합니다.