0 조회수 • 2:33 분 • July 8th, 2025
인간 장 오가노이드 배양을 취하십시오. 오가노이드는 생체 내 구조를 모방하여 중앙 내강을 향하는 상피 세포로 구성됩니다.
기생충인 크립토스포리디움 파붐(Cryptosporidium parvum)의 초승달 모양의 포자소체(감염성 형태)가 들어 있는 마이크로인젝터를 예로 들어보겠습니다.
오가노이드 내강에 포자소체를 주입합니다.
기생충 렉틴은 상피 세포의 특정 탄수화물에 결합하여 기생 액포로의 진입을 촉진합니다.
내면화된 기생충은 영양분을 획득하고 무성 생식을 거쳐 침입 형태인 메로조이트를 포함하는 유형 I 메론트를 형성하는 영양형(섭식 단계)으로 변형됩니다.
방출된 메로조이트는 인접한 상피 세포를 감염시키고 메로조이트를 포함하는 II형 메론트를 발달시킵니다.
메로조이트는 인접한 세포로 들어가 수컷과 암컷의 생식 단계인 마이크로가몬트 또는 마크로가몬트로 분화합니다.
마이크로가몬트는 분열을 거쳐 미세배우자를 형성하며, 이는 액포 외부로 방출됩니다.
미세배우자는 마크로가몬트를 수정시켜 접합체를 생성합니다.
접합체는 분열을 거쳐 포자소체 함유 난포를 형성합니다. 방출되면 포자소체는 감염 주기를 반복합니다.
감염 진행 상황을 평가하기 위해 오가노이드를 수확합니다.
기생충을 3D 오가노이드의 정점에 미세 주입하려면 먼저 마이크로피펫 풀러를 사용하여 유리 주입 모세관을 준비합니다. 집게를 사용하여 모세관의 끝을 직경 9-12마이크로미터로 절단하여 포자포를 직접 주입하기로 선택한 경우 포자형 또는 난포의 쉬운 흐름을 가능하게 하고, 마이크로 로더 팁을 사용하여 각 모세관을 빠른 녹색 염료 표지 난포 또는 포자소 현탁액으로 채웁니다.
그런 다음 첫 번째 포자소이트로 채워진 모세관을 마이크로인젝터에 로드하고 5배 배율과 일정한 압력으로 도립 현미경을 사용하여 각 오가노이드에 100-200나노리터의 현탁액을 미세주입합니다.