상처를 통한 곰팡이 접종을 통한 벼 식물 잎 감염 확립

작은 상처가 있는 쌀잎이 들어 있는 배양 접시로 시작하여 밑에 있는 표피를 노출시킵니다.

Tween-20이 함유된 보습 용액을 도포하여 곰팡이 성장에 도움이 되는 환경을 조성합니다.

분생자(생식 곰팡이 포자)가 있는 분생포자로 구성된 Magnaporthe grisea의 균사체 플러그를 상처 부위 위에 놓습니다.

곰팡이 성장을 촉진하기 위해 광주기 조건에서 습한 챔버에서 잎을 배양합니다.

배양하는 동안 분생포자는 노출된 표피에 부착하는 포자를 방출하여 생식관을 발달시킵니다.

배아관은 돔 모양의 압착체로 분화하여 높은 팽압을 생성하여 날카로운 균사 또는 침투 못을 형성합니다.

침투 못은 세포벽 분해 효소를 분비하여 표피 세포로의 진입을 촉진하고 영양분 획득을 위한 침습성 균사로의 분화를 촉진합니다.

이 균사는 세포 사이의 채널을 연결하고 감염을 확립하는 원형질을 통해 표피 세포 내에서 성장하고 퍼집니다.

곰팡이는 독소를 분비하여 잎의 상처 부위 근처에 세포 괴사 및 병변 형성을 일으켜 곰팡이 감염을 나타냅니다.

해부학적 바늘을 사용하여 분리된 쌀잎의 주요 정맥에 있는 2-3cm 길이의 상처 3개를 긁어냅니다. 긁은 잎을 이쑤시개에 놓고 Tween-20 용액을 뿌립니다. 다음으로, 각 M griseus 균주를 포함하는 OTA 플레이트에서 1/2 x 1/2 센티미터 균사체 플러그를 자릅니다. 상처 입은 잎에 플러그를 놓고 섭씨 25도의 습한 챔버에서 3-8일 동안 배양합니다.

잠복기 후 국제쌀연구소에서 제공하는 채점 시스템에 따라 병변을 검사하고 평가합니다. 마지막으로 병든 잎의 사진을 찍어 테스트한 균주의 전염성을 평가합니다.