면역 역량이 있는 설치류 모델에서 폐렴 연쇄상구균의 기관지 내 주입

금속 바늘에 연결된 폴리에틸렌 튜브가 있는 금속 캐뉼라로 구성된 멸균 삽관 장치를 얻으십시오.

폐렴 연쇄상구균이 들어 있는 주사기를 바늘에 부착하고 튜브를 채웁니다.

다음으로, 마취된 면역 적격 쥐를 바로 누운 자세로 배치합니다.

금속 캐뉼라의 자유 끝을 쥐의 입에 삽입합니다. 기관으로 왼쪽 기관지를 향해 그리고 왼쪽 폐를 따라 적절한 깊이로 전진시킵니다.

튜브를 캐뉼라 끝까지 전진시키고 박테리아 현탁액을 왼쪽 폐엽에 주입합니다.

박테리아 캡슐과 표면 관련 효소는 점액에 박테리아가 갇히는 것을 방지합니다. 또한, Streptococcus pneumoniae는 기관지 상피 세포의 표면 수용체에 부착되어 엔도사이토시스를 촉진하고 기저외측 표면으로의 방출을 촉진합니다.

박테리아는 상피 세포와 장벽을 손상시켜 면역 반응을 유발하는 독소를 분비합니다.

그러나 Streptococcus pneumoniae는 숙주 면역 반응을 회피하고 폐 감염을 확립하는 전략을 개발했습니다.

수조 근처의 작업대에 깨끗한 일회용 매트를 놓습니다.

작업 표면과 삽관 장치를 준비하려면 먼저 텍스트 프로토콜에 따라 금속 캐뉼라와 폴리에틸렌 튜브를 멸균한 다음 유리 보관 튜브에 넣어 작업 표면으로 옮깁니다. 그런 다음 보관 튜브에서 캡을 제거하고 캐뉼라의 핸들 끝을 튜브의 열린 끝으로 밉니다. 멸균 겸자를 사용하여 비커에서 폴리에틸렌 튜브 한 길이를 제거하고 멸균 금속 캐뉼라 내부를 통해 삽입하여 자유롭게 움직이도록 합니다. 지울 수 없는 펜으로 미리 정해진 위치에 가이드 마크를 놓습니다.

그런 다음 바늘을 튜브에 몇 밀리미터 밀어 넣어 멸균 일회용 25게이지 바늘을 폴리에틸렌 튜브의 자유 끝에 끼웁니다. 그런 다음 멸균 식염수를 사용하여 새 일회용 1밀리리터 주사기를 채웁니다. 폴리에틸렌 튜브에 장착된 바늘에 주사기를 부착하고 튜브를 통해 식염수 전체를 씻어냅니다.

사용한 주사기는 날카로운 용기에 버리십시오. 그런 다음 새로운 멸균 일회용 1밀리리터 주사기에 수조에서 나온 한천 기반 접종물을 채웁니다. 25게이지 바늘과 튜브를 다시 부착하고 튜브가 한천으로 완전히 채워질 때까지 플런저를 눌러 튜브를 통해 한천을 씻어냅니다.

텍스트 프로토콜에 따라 쥐를 마취한 후 머리가 오른쪽을 향하고 꼬리가 왼쪽을 향하도록 동물을 일회용 매트 위에 누운 자세로 눕힙니다. 그런 다음 금속 캐뉼라의 자유 끝을 동물의 입에 삽입합니다. 자유 끝이 위쪽으로 기울어지도록 캐뉼라를 돌리고 약간의 비틀림으로 후두 구조를 조심스럽게 우회하면서 기관으로 부드럽게 전진시킵니다.

왼쪽 검지를 사용하여 기관 고리를 촉진하면서 캐뉼라를 약간 앞뒤로 여러 번 부드럽게 밀어 식도가 아닌 기관에 삽입되었는지 확인합니다.

식도가 아닌 기관으로 삽관하려면 캐뉼라를 앞뒤로 약간 움직이고 능선을 만져보십시오. 캐뉼라가 목구멍 아래로 부드럽게 미끄러지고 융기가 느껴지지 않으면 장치를 제거하고 다시 시도하십시오.

캐뉼라가 기관이 왼쪽 기관지와 오른쪽 기관지로 갈라지는 분기점에 도달하면 캐뉼라가 왼쪽 기관지에 삽입되도록 동물의 왼쪽을 향해 약간 비틀어

일반적인 오류는 접종물을 폐 깊숙이 배치하지 않아 기도를 막고 호흡을 억제할 수 있다는 것입니다. 캐뉼라를 적절한 각도로 돌리면 왼쪽 기관지로 쉽게 미끄러져 들어가 적절한 깊이로 부드럽게 전진해야 합니다.

끝이 왼쪽 폐의 3/4 아래로 절반이 될 때까지 금속 캐뉼라를 전진시키고 이전에 배치한 가이드 마크를 사용하여 적절한 깊이에 도달했는지 확인합니다. 금속 캐뉼라를 제자리에 놓은 상태에서 이전에 튜브에 배치한 가이드 표시를 사용하여 폴리에틸렌 튜브를 몇 밀리미터 앞으로 밀어 금속 캐뉼라 끝을 빠져나갈 수 있을 만큼만 전진하고 폐에 구멍을 뚫지 않도록 합니다.

양쪽 캐뉼라를 제자리에 놓은 상태에서 부착된 주사기를 사용하여 100마이크로리터의 한천 현탁액을 왼쪽 폐의 큰 엽 깊숙이 주입합니다. 튜브를 몇 밀리미터 빼내고 손상되지 않은 삽관 장치를 부드럽게 제거합니다. 유리 보관 튜브에 다시 넣고 동물을 새 케이지로 옮겨 회복하십시오.