쥐에서 만성 실험용 자가면역 안구 건조증을 유발하는 기술

0 조회수3:03 • August 20th, 2025

눈물샘 유래 자가항원 및 외래 항원을 포함하는 항원 보조 에멀젼으로 이전에 면역화된 쥐를 예로 들어 보겠습니다.

에멀젼을 다시 주입하고 백일해 독소를 복강 내 주입하여 최대 T 세포 활성화를 보장합니다.

활성화된 세포는 순환 이펙터 기억 T 세포, TEM 및 조직 상주 기억 T 세포, TRM으로 분화합니다. TRM의 일정 비율은 안구 표면 조직에 존재합니다.

정해진 간격 후 항원을 fornice sub-conjunctivia 및 lacrimal gland injection에 주입하여 국소 염증을 유발합니다.

결막하 항원 제시 세포(APC) TRM에 항원을 제시하여 사이토카인 방출을 유발합니다.

사이토카인은 결막 상피 세포가 TEM을 모집하는 케모카인을 방출하도록 유도합니다.

APC는 침윤된 TEM을 재활성화하여 전염증성 사이토카인 방출을 유발합니다.

사이토카인은 뮤신 생성 결막 잔 세포의 사멸을 유발하여 뮤신 수치를 감소시키고 눈물막 불안정성을 유발합니다.

사이토카인은 눈물샘 세포 사멸을 유도하여 눈물 생성을 감소시키고 각막 상피 세포를 자극하여 매트릭스 메탈로프로테이나아제를 생성하여 각막을 손상시킵니다.

성공적인 안구건조증 유도를 나타내는 임상적 특징에 대해 쥐를 평가합니다.

0일째에 눈물샘 추출물 1mg과 오브알부민 200마이크로그램을 함유한 에멀젼 200마이크로리터를 분배하고 프로인트 보조제를 1밀리리터 루어락 주사기에 완성하고 주사기에 27게이지 바늘을 장착합니다.

마취를 사용하지 않고 쥐 꼬리 밑 부분에 에멀젼을 피하 주입합니다. 그런 다음 비슷한 방식으로 14일째에 동일한 항원 200마이크로리터와 불완전한 프로인트 보조제를 주입합니다. 같은 날 PBS 100마이크로리터에 백일해 독소 300나노그램을 복강내 주입합니다.

48일째에 필요한 양의 오브알부민의 무게를 측정하여 PBS에 녹인 다음 오브알부민을 이 비디오의 앞부분에서 준비한 해동된 눈물샘 추출물과 결합하여 오브알부민 밀리리터당 1밀리그램, 눈물샘 추출물 밀리리터당 1밀리그램을 함유한 항원 용액을 만듭니다.

쥐를 마취한 후 눈의 fornicial subjuctivia에 5마이크로리터의 항원을 주입한 다음 20마이크로리터의 항원을 눈물샘에 주입합니다.