마우스 모델에서 포도막염을 평가하기 위한 광간섭 단층촬영 이미징(Optical Coherence Tomography Imaging)

면역 반응을 유도하고 Mtb 특이적 T 세포를 생성하는 열사멸 결핵균 또는 Mtb로 사전 면역화된 마취된 마우스를 취하십시오.

동공 확장을 위해 안약을 투여하여 빛 투과율을 향상시켜 눈 영상을 개선합니다. 각막 탈수를 예방하기 위해 젤을 바르십시오.

마우스를 거즈로 감싸 체온을 유지하고 광간섭단층촬영 또는 OCT 시스템에 넣습니다.

각막과 수정체를 포함한 전방과 망막을 포함한 후방의 단면 이미지를 얻기 위해 눈을 이미지

염증이 없는지 검사하십시오.

열로 죽은 Mtb를 유리체강에 주입합니다. 면역원은 눈 전체에 퍼져 면역 반응을 유발하여 미리 형성된 Mtb 특이적 T 세포 및 기타 면역 세포의 침윤을 유도하여 포도막염이라고 하는 염증을 유발합니다.

전방의 OCT는 침윤된 면역 세포와 각막 부종을 나타내고, 후방의 OCT는 유리체 염증을 나타냅니다.

포도막염 진행을 정량화하기 위해 염증 중증도에 따라 OCT 이미지를 점수화합니다.

마우스를 마취한 후 2.5% 페닐에프린 한 방울로 동공을 확장하여 과도한 물방울이 코나 입에 들어가지 않도록 합니다. 2-3분 후 여분의 액체를 두드리고 0.3% 하이프로멜로스 젤로 눈을 덮습니다. 그런 다음 체온을 유지하기 위해 수술용 거즈로 마우스를 감싼 다음 동물 카세트 위에 마우스를 놓고 바이트 바가 있는 머리를 배치합니다.

광간섭 단층 촬영 또는 OCT 이미지를 얻으려면 OCT 이미징 시스템을 켜고 이미징 소프트웨어를 엽니다. 후방 영상의 경우 수정체 표면이 눈에 닿지 않도록 주의하면서 OCT를 눈 표면에 가깝게 가져옵니다.

눈이 올바르게 배치되면 빠른 스캔을 중지하고 볼륨 스캔 프로토콜을 선택한 다음 조준 옵션으로 스캔을 활성화합니다. 후안부 이미지의 경우 시신경이 수평 B-Scan 정렬 이미지의 중앙에 있고 망막이 수직 정렬 축에 정렬될 때까지 조정합니다. 전안부 이미지의 경우 수평 B-Scan 정렬 이미지와 수직 B-Scan 정렬 이미지 모두에서 각막 정점을 중앙에 위치하도록 위치를 조정합니다. 마지막으로 스냅샷을 클릭하여 볼륨 스캔 이미지를 캡처합니다. 그런 다음 저장을 클릭합니다.