묘목 성장의 면역 유도 억제 측정

병원

체 관련 분자에서 파생된 단백질 조각인 면역 유도체 펩타이드(면역 유도체 펩타이드)의 원하는 농도가 포함된 웰에 묘목을 이식합니다.

이 펩타이드는 식물 세포의 패턴 인식 수용체 또는 PRR에 결합하여 신호 전달 캐스케이드를 시작합니다.

이 캐스케이드에는 효소적으로 활성이 되어 활성 산소종 또는 ROS의 생성을 촉매하는 호흡 버스트 산화효소 상동체 또는 RBOH 단백질의 인산화가 포함됩니다.

ROS는 면역 신호 전달 경로에서 2차 메신저 역할을 하여 PRR에 의해 시작된 방어 반응을 증폭시키고 직접적인 항균제 역할을 하여 세포 구성 요소를 손상시켜 병원체 성장을 억제합니다.

ROS 생산 중에 식물은 면역 반응을 지원하기 위해 에너지와 영양분을 할당하여 성장 억제를 초래하는 성장 관련 과정에서 자원을 전환합니다.

신선한 무게를 상관시켜 처리되지 않은 묘목과 비교하여 유도체 처리된 묘목의 성장 억제율을 결정합니다.

펩타이드 유도체의 농도가 증가하면 면역 반응 증가 및 관련 생화학적 변화로 인해 묘목 성장이 억제됩니다.

종료 후 4일, 48웰 플레이트의 각 웰에 엘리시터 펩타이드 희석액이 보충된 500마이크로리터의 MS 배지로 로드합니다. 다음으로, 멸균 겸자를 사용하여 동일한 크기, 연령 및 유전자형의 6-8개의 묘목을 각 펩타이드 희석액에 조심스럽게 이식하고, 묘목이 손상되거나 뿌리가 파손되지 않고 뿌리가 배지에 잠기도록 주의합니다.

모든 묘목이 도금되면 미세 기공 테이프로 플레이트를 밀봉하고 식물을 표준 단일 조건에서 8-12일 동안 놓습니다. 성장 억제율을 결정하려면 각 우물에서 묘목을 조심스럽게 제거하기 전에 사진을 찍어 성장 억제를 시각적으로 기록하십시오. 그런 다음 종이 타월에 뿌리를 두드려 말리고 분석 저울로 각 묘목의 무게를 측정합니다.