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면역학
0 조회수 • 2:17 분 • July 8th, 2025
X선 조사된 상피 단층이 포함된 멤브레인 삽입물을 가져 가십시오.
멤브레인 삽입물을 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)(사이토카인 및 기타 신호 분자를 분비하는 면역 세포)가 포함된 웰에 넣습니다.
경상피 전기 저항 또는 TEER 전극을 멤브레인 인서트에 넣습니다.
작은 전류를 인가하고 저항을 측정하여 밀착 접합에 의해 조절되는 단층 투과성을 평가합니다.
밀착 접합은 스캐폴드 단백질을 통해 세포골격에 연결된 막관통 단백질입니다.
이러한 접합 단백질은 함께 세포막 사이에 강력한 장벽을 형성하여 큰 분자와 병원체의 통과를 제한합니다.
온전한 접합 단백질은 전류 흐름을 방해하여 높은 TEER을 생성하여 정상적인 단층 투과성을 나타냅니다.
X선 노출은 접합 단백질 수준을 감소시켜 단층 투과성을 증가시키고 TEER을 낮춥니다.
또한, 조사된 세포의 신호 전달 분자는 사이토카인을 방출하는 공동 배양된 PBMC를 활성화하여 접합 단백질 수준의 추가 감소를 유발하고 장벽 무결성을 파괴합니다.
결과적으로 단층 투과성이 증가하여 TEER이 더욱 감소합니다.
조사 직후 Caco-2 세포의 경상피 전기 저항(TEER)을 평가하기 위해, Caco-2 세포 배양 인서트의 절반을 각 웰에 3밀리리터의 신선한 완전 배지가 있는 새 플레이트로 옮기고, 삽입물 배양물의 절반을 웰당 완전 배지 3밀리리터당 2 x 106 PBMC가 파종된 새 플레이트로 옮깁니다. 그런 다음 처음 6시간 동안은 매시간 TEER 젓가락 전극을 세포 배양 삽입물에 넣고, 그 다음에는 조사 후 48시간까지 3시간마다
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