용량성 면역프로브 바이오센서를 사용한 표적 펩타이드 검출 및 측정

0 조회수5:15 • July 8th, 2025

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폴리도파민 층이 있는 조립된 퍼플루오로알콕시 코팅 백금 와이어로 시작합니다.

이 프로브를 폴리도파민에 고정시켜 면역프로브를 형성하는 표적 펩타이드 특이적 항체를 함유한 용액에 담그십시오.

면역 프로브를 세척하고 염화은 접지 전극이 있는 흐름 챔버에 넣어 회로를 설정합니다.

먼저 버퍼를 도입하고 전압을 가하여 면역 프로브를 활성화하여 배터리나 커패시터 역할을 하고 에너지를 전하로 저장할 수 있도록 합니다.

전기 신호를 기록하여 기준선을 생성합니다.

이제 바이오센서를 표적 펩타이드가 포함된 용액에 노출시킵니다.

이 펩타이드는 프로브의 항체에 결합하여 국소 전하와 바이오센서에 저장된 에너지에 변화를 일으킵니다.

전기 신호를 기록합니다. 신호의 증가는 표적 펩타이드의 존재를 나타내는 반면, 이 신호의 크기는 표적 펩타이드 농도와 상관관계가 있습니다.

먼저 25cm 길이의 퍼플루오로알콕시 코팅 백금 와이어를 절단합니다. 그런 다음 메스를 사용하여 백금 와이어가 절단되지 않도록 주의하면서 한쪽 끝에서 약 5mm의 퍼플루오로알콕시 코팅을 벗겨냅니다. 이제 백금 와이어의 벗겨진 끝을 금도금 1mm 수 커넥터 핀에 삽입합니다. 그런 다음 니들레노스 펜치를 사용하여 백금선의 벗겨진 끝 부분 주위에 커넥터 핀 톱니를 압착하고 백금선을 금도금 커넥터 핀에 납땜합니다.

다음으로, 도파민 염산염 50mg을 10밀리몰 PBS 50밀리리터에 pH 6으로 첨가하여 도파민 용액을 제조하고, 교반하여 혼합한다. 도파민을 완전히 녹인 후, 새로 만든 도파민 보충 PBS가 들어 있는 용기에 백금 와이어의 끝을 넣습니다. 염화은 디스크 전극을 헤드의 접지 채널에 연결합니다.tage. 그런 다음 도파민이 보충된 PBS와 백금 와이어가 들어 있는 용기에 염화은 디스크를 넣습니다.

계속 진행하기 전에 와이어 션트를 헤드 스테이지의 기준 채널에 연결하십시오. 대화형 데이터 수집 소프트웨어를 열고 시작 전위를 마이너스 0.6볼트, 끝 전위를 0.65볼트, 스캔 속도를 초당 0.04볼트, 증착 시간을 420초로 설정하여 톱니 전착 명령 전위 프로토콜을 설정합니다.

폴리도파민 증착을 완료한 후 염화은 분쇄 펠릿과 백금 와이어 끝을 용기에서 제거합니다. 와이어 팁을 pH 7.4의 PBS가 들어 있는 마이크로튜브에 2-5분 동안 넣고 와이어 팁이 마이크로튜브의 측면이나 바닥에 닿지 않도록 합니다. 그런 다음 적절한 크기의 용기에 관심 항체와 pH 7.4의 PBS를 1 대 20 비율로 결합하여 항체 용액을 제조합니다.

다음으로, 백금 전극의 폴리도파민 증착 팁을 실온에서 2시간 동안 항체 용액에 담가 백금 와이어 팁이 용액에 매달려 마이크로튜브 내부 표면에 닿지 않도록 합니다. 용량성 면역 프로브의 기능 팁을 흐름 챔버에 넣고, 프로브의 감각 팁이 손상될 수 있으므로 어떤 식으로든 전극 팁을 방해하지 않도록 주의하십시오.

첫 번째 실험 테스트 전에 TBS 표준 실행을 수행하여 용량성 면역 프로브를 조절하고 전압 프로토콜의 경우 양의 스텝 전위를 110밀리볼트로, 음의 스텝 전위를 마이너스 5밀리볼트로, 스텝 지속 시간을 20밀리초로, 획득 지속 시간을 600초로 설정합니다.

다음으로, 동일한 TBS를 사용하여 관심 있는 펩타이드 용액을 생성합니다. 과분리액의 조성을 유지하려면 과분리액을 TBS와 펩타이드 보충 TBS 사이에서 전환할 수 있는 매니폴드 시스템을 설정합니다. TBS 표준 매개변수를 사용하고 획득 기간을 360초로 설정하여 펩타이드 감지 데이터 획득 프로토콜을 설정합니다.

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마지막 업데이트: 1 8월 2026