마우스 소변 포도당 농도의 정성적 및 정량적 평가를 위한 분석

신선한 쥐 소변 한 방울을 취하고 포도당 산화효소, 과산화효소 및 발색원이 포함된 포도당 검출 스트립을 담그십시오.

포도당 산화효소는 소변 포도당을 산화시켜 글루코노락톤과 과산화수소를 형성합니다.

또한, 과산화효소는 과산화수소를 활용하여 발색원의 산화를 촉매하여 소변 포도당 농도에 비례하는 강도로 유색 제품을 형성합니다.

소변 포도당의 정성적 평가를 위해 스트립의 참조 차트와 색상을 비교하십시오.

정량적 소변 포도당 측정의 경우, 포도당 농도 표준물질이 있는 멀티웰 플레이트와 정의된 기간 동안 수집된 마우스 소변 샘플을 채취합니다.

포도당 산화효소, 과산화효소 및 지시제 커플링 시약을 포함하는 분석 혼합물을 추가합니다.

포도당 산화효소는 포도당의 산화를 촉진하여 글루코노락톤과 과산화수소를 형성합니다. 과산화효소는 커플링 시약과 과산화수소 사이의 반응을 촉매하여 분홍색 생성물을 형성합니다.

마이크로플레이트 리더를 사용하여 유색 제품의 흡광도를 측정합니다.

생성된 포도당 표준 곡선을 사용하여 소변의 포도당 농도를 결정합니다.

평

평한 표면에 깨끗한 파라필름 조각을 놓는 것부터 시작하십시오. 마우스의 꼬리를 부드럽게 잡고 파라필름 위에 놓습니다.

엄지와 검지를 사용하여 마우스의 목덜미를 제지하여 마우스가 스트레스 반응으로 소변을 보게 합니다. 소변 한 방울이 파라필름 표면에 떨어지도록 한 다음 마우스를 케이지로 되돌립니다.

포도당 검출 스트립의 시약 끝을 신선한 소변 방울에 담그십시오. 즉시 스트립을 제거하고 색상이 위로 향하도록 표면에 평평하게 놓습니다. 그런 다음 스트립에 색상이 완전히 발현할 때까지 최소 30초 동안 기다립니다. 현상된 색상을 제조업체에서 제공한 참조 차트와 비교하십시오.

제조업체의 지침에 따라 대사 케이지를 조립하고 사료 어셈블리에 가루 차우를 채운 다음 상부 챔버의 적절한 금속 탭에 부착합니다.

물병 지지대를 상부 챔버의 나머지 금속 탭에 고정합니다. 빈 물병을 채우고 병 지지대에 밀어 넣고 시퍼 튜브가 구멍에 있는지 확인합니다.

대

사 새장에 쥐 한 마리를 넣고 뚜껑으로 덮어 새장 뚜껑이 제대로 맞는지 확인합니다. 소변 수집 튜브와 대변 수집 튜브를 하부 챔버 바닥의 해당 지점에 배치합니다.

24시간 후 소변 수집 튜브를 회수하고 포도당 분석을 수행하여 소변 포도당 농도를 결정합니다. 당일 포도당 분석을 수행하지 않을 경우 소변 샘플을 섭씨 영하 80도의 냉동고에 냉동하십시오.

냉동 소변 샘플