Name: 마우스의 관상 동맥 결합에 대한 수정 기술 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-29T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: 학습하세요 마우스 심근경색 유도 수술법을 통해 심장 질환 연구를 수행하는 방법을. 좌측 흉부 절개와 좌전하행 동맥 결찰을 포함하며, 심전도와 심초음파로 심장 기능을 평가할 수 있습니다.

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1. 프로토콜 텍스트 <ol><li> 수술하기 전에, 6 세 주 또는 2-5% isoflurane의 흡입에 의해 나이가 남성 마우스 (C57BL / 6) 마취. 동물이 충분히 anesthetized 있는지 확인하기 위해 발가락 핀치을 수행합니다. </li><li> 의식이 마우스는 37 ° C.의 일정한 온도를 유지하기 위해 따뜻한 패드에의 뒷면에 배치됩니다 왼쪽에있는 precordial 가슴이 면도 있습니다. </li><li> isoflurane 채워진 챔버와 삽관 장치에 마우스를 고정합니다. 입으로 마우스의 기관에 0.2 내부 직경의 튜브를 삽입 한 후 무균 수술 지역 (37 ° C 온도 컨트롤러)에 intubated 마우스를 놓고 환풍기 (분 당 120 속도의 압력에 endotracheal 튜브를 연결 4-6 음 2 O)는, betadine과 75 % 에탄올로 지역을 소독. </li><li> 마우스의 눈에 안과 연고를 적용합니다. 손에 표준 ECG 전극을 배치하고 ECG 레코더에 마우스를 연결합니다. </li&gt; <li> 중간 겨드랑 선을 따라 1.5 cm의 절개를 만들기 위해 멸균 가위를 사용합니다. 가위는 쥐의 기본 조직에 부상을 방지하기 위해 메스보다는 사용됩니다. 그런 다음 가슴 벽에서 precordial 근육을 해부하고 철회를 야기한 팁 선박 가위를 사용합니다. </li><li> 마음과 왼쪽 폐의 앞쪽 표면을 시각화하는 세 번째와 네 번째 늑골 사이의 왼쪽 thoracotomy를 수행 </li><li> 또한 시각화 및 접근성을 개선하기 위해 적절한 견인기를 사용하여 가슴 벽을 철회. 톱니 포셉 및 야기한 스쳐 가위를 사용하여 심낭을 제거합니다. </li><li> 끈과 동맥 사이에 심근의 밴드와 함께 동맥 아래의 바늘을 (7-0 ethilon의 봉합과 함께 첨부) 배치하여 왼쪽 관상 동맥을 Ligate. 관상 동맥의 성공적인 가림이 hypokinesis / 앞 왼쪽 심실 벽의 akinesis 의해 ECG 기록의 변경 (에 의해 확인 된 예 ST 세그먼트 상승, QRS broadeniNG) </li><li> 세 번째와 네 번째 늑골에 두 바늘 (6-0 ethilon의 봉합)을 배치하여 상자를 닫습니다. </li><li> 피부를 닫으려면 5-0 ethilon의 봉합사를 사용하십시오. </li><li> 수술 진통제를 들어, buprenorphine (0.05 밀리그램 / kg)의 단일 intraperitoneal 주사를 관리 할 수​​ 있습니다. 동물은 저절로 isoflurane 마취을 중지 한 후 2-5 분 이내에 회복됩니다. 마지막으로, 따뜻한 새장에 마우스를 놓고 0.6 밀리그램 / 식수 (텍스트 오버레이 : 마시는 물에 0.6 MG / ML)에 buprenorphine의 ML 제공 수술 손해를 방지하기 위해합니다. 밀접하게 수술 후 첫 24 시간 동안 마우스를 모니터링 할 수 있습니다. </li><li> Echocardiography는 삼일 심근 경색 후 심장 기능을 평가하기 위해 수행됩니다. 성공적인 절차는 앞 왼쪽 심실 벽의 akinesia (결과에 동봉 된 동영상을 참조)에 의해 확인된다. 실험의 끝에서 심장이 더 조사를 위해 수집 및 인 80oC 저장됩니다. 즉, 유전자 발현이. </li></ol>

<ol><li>Tabrizchi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-blocker+therapy+after+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev.+Cardiovasc.+Ther%22%5BJournal%5D)">Beta-blocker therapy after acute myocardial infarction.</a> Expert Rev. Cardiovasc. Ther. 11, 293-296 (2013).</li>
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</ol>

관심 없음 충돌이 선언 없습니다.

이 보고서에 보여준으로 LCA 결합에 대한 수술 절차는 마우스 3, 6 실험 MI의 유도를위한 신뢰할 수 있고 재현 방법입니다. 이 프로토콜에 따라 LCA의 결합은 일반적으로 참여 심근 국소 빈혈을 유도 ~ 왼쪽 심실 세의 40 %입니다. 이것은 심장의 앞쪽 표면에 ST 세그먼트 7 보이는 증상에 상당한 ECG 변화를 유도한다. 큰 심근 경색으로 인해, 사망률은 최대 30 % 8, 9가 될 수 있습니다. 참고 infarcted 심근 지역과 포스트 MI 사망률은 다양한 동물의 변종들 사이에서 다를 수 있습니다하여야한다. 방법은 여러 가지 장점이 있습니다. 오히려 앞 가슴 벽에 비해 중간 겨드랑 선을 따라 피부 절개의 위치는 echocardiography과 나중에 조사를 용이하게한다. 수술 상처의 stiches은 심장의 앞부분은 세그먼트의 초음파 영상을 방해하지 않습니다. 또한, 마우스의 삽관 법은 운영자가 수행 할 수 있습니다수술을 수행 할 충분한 시...

마우스의 관상 동맥 결합에 대한 수정 기술

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

심근 경색 (MI)는 1-3 인간의 사망의 가장 중요한 원인 중 하나입니다. 병적 우리가 심근 국소 빈혈의 pathophysiology에 대한 더 지식이 필요 MI 환자의 사망률을 개선하기 위해. 이 지식은 혁신적인 심장 혈관 치료 4 새로운 치료 목표를 정의하는 가치가 될 수 있습니다. 쥐 실험 MI 모델은 MI는 왼쪽 관상 동맥 (LCA) 5의 영구 또는 임시 결합에 의해 유도되는 잠복기 연구에서 점점 인기를 소형 동물 모델입니다. 이 비디오에서 우리는 쥐에 실험 MI를 유도하는 방법을 단계별로 방법을 설명합니다. 동물 2 % isoflurane과 anesthetized 첫번째입니다. 의식이 마우스는 다음 intubated 및 인공 환기를위한 환풍기에 연결되어 있습니다. 왼쪽 가슴이 면도 있으며, 중간 겨드랑 선을 따라 1.5 cm의 절개는 피부에 구성되어 있습니다. 왼쪽 pectoralis 주요 근육은 퉁명스럽게 dissoc입니다갈비가 노출 될 때까지 iated. 근육 층은 떨어지게하고 눈꺼풀 - 리 트렉터로 고정되어 있습니다. 이러한 준비 후, 왼쪽 thoracotomy은 마음과 왼쪽 폐의 앞쪽 표면을 시각화하기 위해 세 번째와 네 번째 늑골 사이에 수행됩니다. LCA 동맥의 근위 세그먼트 그런 다음 일반적으로 경색 크기 ~ 왼쪽 심실의 40 %를 유도 7-0 ethilon의 봉합과 출혈도 잡았 있습니다. 말에 가슴이 닫히고 동물 (Temgesic, 0.3 mg/50 ML, IP) 수술 진통제를받을 수 있습니다. 동물 자연 회복까지 따뜻한 케이지에 보관되어 있습니다.

<table border="1"><tbody><tr><td> 기계 </td><td> 기능 설명 </td></tr><tr><td> 무딘 팁 가위 </td><td> 피부, 갈비 가슴 근육, 그리고 봉합을 잘라하는 데 사용 </td></tr><tr><td> 눈 트렉터 </td><td> 수술보기를 노출하는 데 사용 </td></tr><tr><td> 무딘 팁 포셉 </td><td> 피부와 근육을 파악하는 데 사용 </td></tr><tr><td> 니들 홀더 </td><td> 바늘을 잡아 </td></tr><tr><td> 5-0 봉합 </td><td> 피부를 봉합하는 데 사용 </td></tr><tr><td> 6-0 봉합 </td><td> 가슴 근육을 봉합하는 데 사용 </td></tr><tr><td> 7-0 봉합 </td><td> 관상 동맥을 ligate하는 데 사용 </td></tr></tbody></table> 심근 경색의 절차에 사용되는 표 1.</stron...

쥐 실험 심근 경색을 유발하는 데 사용되는 외과 수술은 심장과 왼쪽 폐의 앞쪽 표면을 시각화하기 위해 세 번째와 네 번째 갈비뼈 사이의 왼쪽 thoracotomy로 시작합니다. 왼쪽 관상 동맥이 출혈도 잡았되어 가슴이 폐쇄되고 마우스가 저절로 복구 할 수 있습니다.

심근경색(MI)은 인간의 사망을 유발하는 가장 중요한 원인 중 하나입니다1-3. 심근경색 환자의 이환율과 사망률을 개선하기 위해...

본 실험 절차의 전반적인 목적은 마우스에서 심근경색을 유도하는 것입니다. 이를 위해 먼저 중간 겨드랑이선(mid axillary line)을 따라 피부 절개를 수행합니다. 그다음, 3번째와 4번째 갈비뼈 사이의 좌측 흉강 절개술을 통해 심장을 노출시킵니다.그 다음, 좌전하행동맥의 근위부에서 결찰을 수행합니다. 마지막으로 흉부를 봉합하고 생쥐를 케이지로 옮겨 자연 회복되도록 합니다. 최종적으로 심전도나 심초음파를 통해 심근경색 여부를 확인할 수 있습니다.좌측 관상동맥 부근의 결찰은 학습하기 어려우므로 이 방법의 시각적 시연이 매우 중요합니다. 결찰 부위를 좌측 관상동맥 입구 바로 아래에 배치함으로써 적절한 심근 경색을 유도할 수 있습니다. 다만, 치명적인 출혈을 일으킬 수 있으므로 좌측 주관상동맥을 천자하지 않도록 주의하는 것이 중요합니다.수술을 시작하려면, 6주령 이상의 마우스를 2~5%의 불소계 마취제로 흡입 마취합니다. 발가락 꼬집기 테스트를 통해 동물이 충분히 마취되었는지 확인합니다. 마우스가 완전히 진정되면, 수술 구역으로 옮겨 배치합니다.마우스를 따뜻한 패드 위에 올립니다. 37°C의 일정 온도를 유지하기 위해, 직경 0.2 cm 튜브와 공기에 2% isoflurane을 혼합한 가스를 사용하는 isoflurane 필드 챔버가 연결된 기관 삽관 장치에 마우스를 고정합니다. 튜브를 마우스의 기관에 삽입합니다.왼쪽 흉골 앞 부위의 털을 제거한 후, Betadine으로 해당 부위를 소독하십시오. 그다음 75% ethanol로 각각 세 번씩 소독합니다. 또한, 멸균 가위를 사용하여 마우스의 눈에 안연고를 도포하십시오.중액와선(mid axillary line)을 따라 1.5 centimeter 절개합니다. 이러한 접근 방식은 이후의 심초음파 평가를 용이하게 합니다. 이 어린 생쥐들의 하부 조직 손상을 방지하기 위해 메스 대신 가위를 사용합니다.그다음 뭉툭한 팁의 혈관 포셉을 사용하여 흉벽으로부터 심전근을 분리하고 견인합니다. 심장의 전면과 왼쪽 폐를 관찰하기 위해 3번째와 4번째 갈비뼈 사이에서 왼쪽 흉곽 절개술을 실시합니다. 이후 적절한 안검 견인기를 사용하여 흉벽을 견인합니다.치과용 핀셋과 둔단 가위를 사용하여 시야와 접근성을 개선하기 위해 심낭을 제거합니다. 다음으로 동맥 결찰을 위한 7-0 론(lon) 봉합사와 바늘을 준비합니다. 결찰사와 동맥 사이에 심근 띠가 위치하도록 바늘을 동맥 아래에 놓아 좌관상동

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연구

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Medicine

의학

수많은 유전자 조작 및 / 또는 유전자, 단백질, 세포 및 / 또는 biomaterials의 intramyocardial 주사는 급성 국소 빈혈 / reperfusion 부상과 생쥐의 만성 리모델링의 연구에 시간의 차원에 따라 겹쳐있다. 이 동영상은 국소 빈혈 / reperfusion에 대한 microsurgical 절차, 영구적인 관상 동맥 내고, 그리고 intramyocardial 사출 공부를 보여줍니다.

경색의 Murine 모델에서 관상 동맥 내고과 Intramyocardial 사출

이 비디오에서는 좌측 전방 하행 관상 동맥을 영구적으로 결찰하여 심근 경색의 마우스 모델을 생성하는 수술 절차에 대해 설명합니다.

심근경색의 쥐 모델 생성: 마우스 모델에서 좌측 전방 하행 관상동맥의 영구 결찰을 위한 수술 절차

우리는 재현성을 높이기 위해 좌전 하행 동맥 (LAD)에 결찰의 위치에서 더 명확 수 있습니다 마우스 모델에서 심근 경색 (MI)을 시뮬레이션하기 위해 실험 허혈 / 재관류 (I / R) 손상을 유발하는 수술 방법을 소개합니다 마우스에있는 MI 실험.

왼쪽 앞쪽에 내림차순 동맥의 결찰을 통해 심근 허혈 - 재관류 손상의 생쥐 모델

최소한의 침습적 조작으로 마우스의 심근 경색에 대한 재현성이 높은 모델을 설명합니다. 모델을 쉽게 수행할 수 있어 재현성과 생존율이 높습니다. 따라서 설명된 모델은 3R 원칙(Replacement, Refinement and Reduction)에 의해 요청되는 대로 필요한 동물의 수를 줄일 것입니다.

쥐 심근 경색을 유도 최소 침습 수술

심부전은 입원의 주요 원인이자 사망의 주요 원인입니다. 마우스에서 좌측 전방 하행 관상동맥의 영구 결찰 모델을 적용하여 심근경색 후 심실 리모델링 및 심장 기능 장애를 조사합니다. 마우스의 침습적 혈류역학적 측정 기술이 제시됩니다.

마우스의 왼쪽 전방 내림차순 관상 동맥의 영구 결찰 : 심근 경색 리모델링과 심장 마비의 모델

우리는 마우스 모델에서 좌측 전방 하행 동맥(LAD) 결찰에 대한 신뢰할 수 있는 방법을 제공합니다. 이 방법은 기관 내 삽관, 좌측 개흉술 접근법 및 흉강천자를 포함하는 다른 방법보다 상대적으로 덜 침습적입니다. 이 방법은 급성 및 만성 심근 경색(MI)에 대한 모델로 사용할 수 있습니다.

쥐 왼쪽 앞쪽에 내림차순 (LAD) 관상 동맥 결찰 : 심근 경색에 대한 개선 및 단순화 된 모델

여기서 우리는 마우스에서 좌측 전방 의 관상 동맥의 영구적 인 결찰을 달성하는 방법을 보여주는 외과 적 절차를 설명합니다. 이 모형은 심근 경색의 병리생리학 및 수반되는 생물학 프로세스를 조사하기 위하여 높은 관련성입니다.

왼쪽 전방 내림차순 관상 동맥의 영구 결찰을 사용하는 뮤린 심근 경색 모델

적절한 마취 하에 쥐의 심장은 늑간 공간을 통해 외부화되었고, 대부분의 실험실에서 쉽게 구할 수 있는 재료를 사용하여 좌측 전방 하행 동맥(LAD)을 결찰하여 심근경색을 성공적으로 유도했습니다.

생쥐의 심근경색 유도를 위한 수정된 간단한 방법

여기서는 미세 조작을 통해 좌측 전방 하행 관상동맥의 정밀 결찰에 의해 마우스에서 심근경색 또는 심근 허혈 재관류 손상을 유도할 수 있는 간단하고 재현 가능한 방법을 설명합니다.

마우스의 심근경색 및 심근 허혈-재관류 손상 유도

여기에 제시된 것은 생쥐에서 왼쪽 관상 동맥의 영구 결찰을위한 수술 절차입니다. 이 모델은 심근 경색 후 병태생리학 및 관련 염증 반응을 조사하는 데 사용할 수 있습니다.

좌측 관상동맥 결찰술: 심근경색의 외과적 쥐 모델

학습하세요 마우스 심근경색 유도 수술법을 통해 심장 질환 연구를 수행하는 방법을. 좌측 흉부 절개와 좌전하행 동맥 결찰을 포함하며, 심전도와 심초음파로 심장 기능을 평가할 수 있습니다.

마우스의 관상 동맥 결합에 대한 수정 기술

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