질량 세포 분석 이미징을 위한 조직 면역염색

0 조회수3:33 • January 15th, 2026

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고정된 조직 샘플이 담긴 유리 슬라이드를 항원 회수 완충액에 넣고 가열합니다.

상승된

온도와 완충액의 알칼리성 pH는 고정 유도 단백질 가교를 끊어 항원 에피토프를 노출시킵니다.

열로 인한 조직 손상을 방지하기 위해 슬라이드를 식힌 다음 헹구어 과도한 완충액을 제거합니다.

소수성 장벽을 적용하고 슬라이드를 습도 챔버에 놓습니다.

투과화 차단 완충액을 추가합니다. 완충액의 세제는 세포막을 투과화하고 차단 단백질은 비특이적 결합 부위를 마스킹하여 배경 염색을 줄입니다.

여분의 완충액을 제거하고 금속 접합 항체 칵테일을 첨가한 다음 항체가 특정 항원에 결합할 수 있도록 배양합니다.

슬라이드를 세척하여 결합되지 않은 항체를 제거합니다.

세포에 들어가 DNA에 결합하는 금속 접합 핵 염색을 추가합니다.

여분의 얼룩을 헹구고 슬라이드를 말리십시오.

광학 스캐너를 사용하여 조직의 구조적 특징에 대한 고해상도 이미지를 얻어 염색된 샘플의 이미징 질량 세포 분석 데이터를 해석하는 데 도움이 됩니다.

면역염색 호환 슬라이드 위에 장착된 5마이크로미터 전처리된 조직 절편으로 시작합니다. 슬라이드를 슬라이드 메일러에 넣습니다.

열 유도 에피토프 회수 또는 HIER의 경우 조직이 완전히 잠길 때까지 슬라이드 메일러에 HIER 완충액을 추가합니다. 슬라이드 메일러를 은폐 해제 챔버에 놓고 가열 프로그램을 시작합니다.

프로그램이 끝나면 슬라이드 메일러를 찬물이 채워진 트레이에 넣고 식히십시오. 점차적으로 부피를 늘려 증류수로 슬라이드를 여러 번 헹굽니다.

슬라이드 메일러에서 슬라이드를 제거하고 여분의 버퍼를 닦아냅니다. 차단 완충액과 항체의 손실을 방지하려면 소수성 장벽 펜을 사용하여 조직을 둘러쌉니다.

슬라이드를 맞춤형 습도 챔버에서 1시간 동안 배양합니다. 비특이적 차단의 경우 습도 챔버의 슬라이드에 차단 완충액을 추가합니다. 배양 기간이 지나면 과도한 차단 완충액을 제거하고 나머지 완충액을 실온에서 자연 건조시킵니다.

항체 용액을 조직 위에 조심스럽게 첨가하고 섭씨 4도의 습도 챔버에서 밤새 배양합니다.

배양 후, 슬라이드를 Triton 함유 PBS로 5분 동안 세척합니다. 마지막으로 슬라이드를 PBS로 각각 5분 동안 두 번 헹굽니다. 이제 조직을 인터칼레이터 염료로 처리하고 실온의 습도 챔버에서 30분 동안 배양합니다.

배양 후 슬라이드를 HPLC 등급의 물로 5분 동안 세척하고 건조기에서 30분 동안 건조시킵니다.

슬라이드가 건조되면 평판 문서 스캐너를 사용하여 인치당 1200도트 이상의 해상도로 스캔합니다.

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마지막 업데이트: 1 8월 2026