안구 질환 모델 구축을위한 Intravitreous 사출
2007년 10월 1일
Intravitreous 주사는 안구 질환 또는 현지 치료의 직접적인 응용 프로그램으로 시각 과학 연구에 널리 사용되는 기법입니다. 이 동영상은 유리 피펫과 1ml 주사기를 사용하여 intravitreous 사출을위한 프로토콜을 보여주었다. 과다 출혈 및 렌즈 손상을 피하에 대한 유용한 팁은 주어집니다.
안녕하세요, Guso Lab의 TU입니다. 오늘은 동물 모델을 제작하거나 안과 질환의 진행을 막기 위해 수행하는 유리체 내 주사 방법을 소개해 드리겠습니다. 여기 모식도가 있습니다.
충혈된 안구 내 주사 바늘의 위치를 보여줍니다. 바늘은 각막 표면에 대해 45도 각도로 후방으로 삽입됩니다. 이 45도 각도를 이용하면 수정체 손상을 방지할 수 있습니다.
초자체내 주사 시, 수술 현미경을 사용하여 안구 내 주사를 시행합니다. 쥐는 케타민과 자일라진 칵테일로 마취합니다. 국소 마취제와 항생제 연고 또한 사용됩니다.
주입을 위해 유리 피펫을 사용합니다. 유리 피펫을 제작하기 위해 준비된 풀러(puller)를 사용합니다. 그 다음, 유리 피펫의 매우 날카로운 끝부분을 제거해야 합니다.
1 million 시린지로 연결할 수 있습니다. 연결 부위는 퍼퓸으로 밀봉합니다. 그다음 이 유리 파이프를 사용하여 주입액 2 µL를 천천히 조심스럽게 뽑아낸 후, 붉은색 부분을 현미경 아래에 놓습니다.
표면에 국소 마취제 한 방울을 도포한 다음, 과도한 액체를 닦아냅니다. 30 G 바늘을 사용하여 scarra를 천자합니다. 바늘은 scarra 표면에 수직이 되어야 하며, 바늘 끝부분만 삽입합니다.
천자 구멍을 통해 일부 액체가 흘러나오는 것을 확인할 수 있습니다. 더 많은 액체를 제거하여 공간을 더 확보하기 위해 부드럽게 밀어주십시오. 적색안의 후방 챔버 내, 흉터 표면과 45도 각도가 되도록 유리 피펫 팁을 액체 부위에 삽입하십시오.
렌즈가 손상되지 않도록 주의하십시오. 천천히 주입하십시오. Es 내부에 공기 방울이 주입되지 않도록 하십시오. 몇 초간 유지한 후, 바늘을 제거하십시오.
그 다음 눈에 항생제 연고를 도포합니다. 유리체 내 주사의 주요 과제는 눈에 가해지는 조작을 최소화하는 것입니다. 안구 내 출혈, 수정체 손상 및 망막 박리를 방지해야 합니다.
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개요
이 영상에서는 시각 과학 연구에서 흔히 사용되는 기술인 유리체 내 주사 수행 프로토콜을 시연합니다. 이 과정을 통해 시술 중 수정체 손상 및 대량 출혈과 같은 합병증을 방지하는 방법에 대한 통찰을 제공합니다.
주요 연구 구성 요소
과학 분야
- 시각 과학
- 안과 질환 연구
- 주사 기술
배경
- 유리체 내 주사는 안과 질환의 국소 치료에 매우 중요합니다.
- 이는 연구를 위한 동물 모델 제작에 자주 사용됩니다.
- 합병증을 방지하기 위해서는 적절한 기술이 필수적입니다.
- 주사 각도는 수정체 손상을 예방하는 데 중요한 역할을 합니다.
연구 목적
- 유리체 내 주사의 정확한 기술을 시연합니다.
- 시술 중 위험을 최소화하기 위한 팁을 제공합니다.
- 안과 질환 치료 방법에 대한 이해를 높입니다.
사용된 방법
- 주입을 위해 유리 피펫이 장착된 1ml 주사기를 사용합니다.
- 흉터 표면에 대해 45도 각도로 주입합니다.
- 주입 부위를 설명하기 위한 시각적 보조 자료를 활용합니다.
- 합병증을 피하기 위한 기술적 방법을 시연합니다.
주요 결과
- 초자체 내 주사 기술의 성공적인 시연.
- 수정체 손상 및 출혈 방지를 위한 지침.
- 주사 과정의 명확한 시각화.
- 절차적 팁의 효과적인 전달.
결론
- 초자체 내 주사는 안과 연구에서 매우 가치 있는 기술입니다.
- 성공적인 결과를 위해서는 적절한 기술이 매우 중요합니다.
- 시각 보조 자료는 절차에 대한 이해와 실행 능력을 향상시킵니다.
자주 묻는 질문
산업적 관련성 요약
유리체 내 주사는 치료제를 유리체강으로 정밀하게 전달할 수 있게 하여, 안구 질환 모델의 개발과 국소 치료 평가를 지원합니다. 이 기술은 전임상 연구에서 전신 노출을 줄이고 표적 결합력을 높입니다. 이 방법의 숙달은 안구 약리학 및 독성학 평가에서 재현성을 높이고 변동성을 줄여줍니다.
바이오 제약 R&D의 전략적 응용
초기 발견 및 표적 검증
- 과학적 가치: 질환 관련 모델에서 국소적인 화합물 전달을 통해 안구 표적의 기능적 조사를 가능하게 합니다.
- 운영적 가치: 전신적 혼란 변수로부터 유리체 내 약동학을 분리함으로써 가설 검증을 지원합니다.
스크리닝 및 분석법 개발
- 과학적 가치: 생체 내 유리체 내 투여 화합물의 용량-반응 분석을 위한 표준화된 경로를 제공합니다.
- 운영적 가치: 유리 피펫 및 1 mL 주사기와 같이 쉽게 구할 수 있는 재료를 사용하여 주입 도구를 재현성 있게 준비할 수 있도록 돕습니다.
중개 및 전임상 연구
- 과학적 가치: 안구 치료제의 중개 모델링에 필수적인 약동학 및 생체 분포 연구를 지원합니다.
- 운영적 가치: 표준화된 주입 각도 및 부위 선정을 통해 실험실 간 일관된 모델 생성을 가능하게 합니다.
파이프라인 및 워크플로우 통합
본 방법은 표적 검증부터 전임상 효능 시험에 이르는 안구 질환 치료제 발굴 연속 과정에 부합하며, 후안부로의 직접적인 화합물 전달을 가능하게 합니다.
- 발견 생물학: 효능제, 길항제 또는 핵산을 유리체에 전달하여 표적 결합 검증을 지원합니다.
- 스크리닝: 제어된 국소 전달 경로를 제공함으로써 생체 내 화합물 스크리닝을 가능하게 합니다.
- 분석: 주입 후 안구 내 약물 농도 및 바이오마커 변화의 정량화를 가능하게 합니다.
- 중개 연구: 유리체 내 투여를 통한 재현 가능한 질환 모델을 수립하여 발견 단계와 전임상 단계를 연결합니다.
- 기업 내 재사용: 녹내장, 망막 퇴행 및 염증성 안구 질환 모델 등 다양한 프로젝트에서 재사용 가능합니다.
운영 및 기업 영향
- 과학적 가치: 절차적 변동성과 안구 외상을 최소화하여 예측 신뢰도를 높입니다.
- 운영적 가치: 표준화된 바늘 준비 및 주입 각도를 통해 기술적 실패율을 낮춥니다.
- 전략적 가치: 연구 전반에 걸쳐 일관된 모델 충실도를 보장함으로써 go/no-go 결정 능력을 향상시킵니다.
- 포트폴리오 영향: 검증된 국소 전달법을 통해 안구 질환 후보 물질의 리스크 조정 기반 진전을 지원합니다.
구현 시 고려 사항
- 망막 또는 수정체 손상을 방지하기 위해 미세수술 기법 및 안구 해부학 교육이 필요합니다.
- 주입용 현미경, 유리 피펫 풀러 및 멸균된 1 mL 주사기 사용 가능 여부에 따라 달라집니다.
- 바늘 각도(45°), 삽입 위치(상비측) 및 유리체 제거에 대해 팀 간 표준화가 필수적입니다.
- 다른 종(예: 마우스, 랫드)에 적용하려면 천자 깊이와 주입 부피의 재보정이 필요합니다.
- 수동 숙련도에 의존하므로 한계가 있으며, 조직의 가변성으로 인해 자동화에 어려움이 있습니다.
