형질전환 마우스의 신경염증에 대한 생물발광 이미징

신경염증과 성상세포 활성화를 유발하여 루시페라아제 발현을 증가시키는 병원성 단백질 응집체를 포함하는 마취된 형질전환 마우스로 시작합니다.

이미징 중 빛 산란을 방지하기 위해 머리에서 털을 제거합니다.

비특이적 생물발광을 차단하기 위해 자극적이지 않은 마커로 귀를 색칠합니다.

마우스의 체중에 따라 적절한 양의 루시페린을 섭취하여 복강 주사합니다.

루시페린은 혈류로 들어가 뇌에 도달하여 활성화된 성상세포에 흡수됩니다.

성상세포 내에서 루시페라아제는 루시페린을 산화시켜 생물발광 신호를 방출합니다.

이미징 매개변수를 설정하고 생물발광 이미징 챔버의 가열판에 마우스를 정확하게 배치합니다.

적절한 마취 흐름을 보장하고 원하는 기간 동안 생물발광 신호를 캡처합니다.

그런 다음 관심 영역을 선택하고 표적 생물발광 신호를 정량화합니다.

이 신호의 강도는 루시페라제 활성에 해당하며, 성상세포 활성화를 반영하고 신경염증의 직접적인 측정을 제공합니다.

이미징 전에 이소플루란 마취된 마우스의 머리를 면도하고 제모합니다. 비특이적 생물발광을 차단하기 위해 자극적이지 않은 마커로 귀를 검은색으로 칠합니다. 주사 전에 동물의 무게를 측정한 다음 150mg/kg 체중으로 주사용 d-루시페린의 정확한 부피를 계산합니다.

계산된 부피의 d-루시페린을 복강 내 주입한 다음 각 동물을 마취실로 되돌립니다. 이미징 소프트웨어를 시작합니다. 이미징 시스템이 작동 온도에 도달하면 제어판에서 초기화 버튼을 클릭하여 시스템을 초기화한 다음 버튼의 발광 및 사진을 선택합니다.

노출 시간을 60초로, 비닝을 중간으로, f-스톱을 1로, EM 게인을 off로 설정합니다. 블록을 선택한 다음 연고, 피사체 높이 탭 아래의 드롭다운 메뉴에서 1.50을 선택합니다. D-루시페린 주입 10분 후, 동물을 이미징 챔버의 가열판에 놓고, 근육이 마취 배출구에 올바르게 배치되었는지 확인하십시오.

흡입실에서 이미징 챔버로 이소플루란 흐름을 전환하고 이미징 챔버의 문을 적절하게 닫습니다. 획득 버튼을 클릭하면 생물 발광을 측정할 수 있으며 60초가 소요됩니다.