마우스 뇌 조직의 2색 자극 라만 산란 이미징

슬라이드의 챔버 내부에 마우스 뇌 조각을 가져와 유도 라만 산란(SRS) 이미징 시스템을 사용하여 현미경 아래에 놓습니다.

펌프 빔과 스톡스 빔으로 알려진 두 개의 동기화된 레이저 빔을 조직에 초점을 맞춥니다.

이 빔 사이의 에너지 차이는 특정 분자의 진동 주파수와 일치합니다. 분자 진동을 유도합니다.

동기화된 빔의 고유한 주파수 쌍을 사용하여 고유한 분자 진동을 갖는 조직 지질과 단백질을 여기시킵니다.

여기는 빔 간의 에너지 전달을 촉진하여 펌프 빔 강도를 감소시키는 동시에 스토크스 빔 강도를 증가시킵니다.

상대 강도 변화는 분자를 식별하는 데 도움이 되는 SRS 신호로 감지됩니다.

광검출기는 샘플에서 결합된 SRS 신호를 수집합니다.

지질과 단백질 신호에 별도의 색상을 할당하여 두 가지 색상의 이미지를 생성하여 뇌 조직의 단백질과 지질을 식별합니다.

빔의 10%를 픽업하기 위해 스토크스 빔 경로에 빔 샘플러를 배치합니다. 그리고 이를 빠른 포토다이오드로 보내 8메가헤르츠 펄스 트레인을 감지합니다. 팬아웃 버퍼의 출력 중 하나를 가져와 대역 통과 필터로 필터링하여 20메가헤르츠 정현파를 얻습니다. 그런 다음 RF 감쇠기를 사용하여 입력/출력 피크 대 피크 전압을 약 500밀리볼트로 조정합니다. 결과 출력을 위상 시프터로 보내면 전압 소스로 RF 위상을 미세 조정할

수 있습니다.

이 출력을 RF 전력 증폭기로 보내고 증폭기의 출력을 EOM에 연결합니다. 스토크스 빔의 차단을 해제한 후 빔 경로에 포토다이오드를 배치하여 첫 번째 EOM의 변조 깊이를 최적화합니다. EOM 볼륨을 조정합니다.tage 변조 깊이가 만족스러울 때까지 쿼터 웨이브 플레이트. 레이저 빔을 감지하기 위해 이색성 거울 뒤에 포토다이오드를 배치합니다. 먼저 스토크스 빔을 차단하십시오. 그런 다음 오실로스코프의 펌프 펄스 피크 중 하나를 확대합니다. 수직 커서를 놓아 오실로스코프로 이 피크의 시간적 위치를 표시합니다.

이제 펌프 빔을 차단하고 스토크 빔을 차단 해제합니다. 두 빔을 일치시키는 데 필요한 지연 거리를 계산한 다음 더 빠른 빔의 빔 경로를 늘리거나 느린 빔의 빔 경로를 줄임으로써 오실로스코프의 피크 위치를 이전 단계의 표시된 위치에 일시적으로 일치하도록 지연 단계를 변환합니다.

다음으로, DMSO와 양면 테이프를 스페이서로 사용하여 현미경 슬라이드 샘플을 준비하여 슬라이드와 커버슬립 사이에 샘플을 고정합니다. 커버슬립 면이 현미경 대물렌즈를 향하도록