알츠하이머병 마우스 뇌 절편에서 메톡시-X04 표지 아밀로이드 플라크의 시각화 및 매핑

0 조회수3:19 • May 29th, 2025

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이미징 중 수화를 유지하기 위해 완충액에 관심 영역을 포함하는 마우스 뇌 조직 절편으로 시작합니다.

조직은 형광 염료인 메톡시 X04를 주입한 알츠하이머병 마우스 모델에서 얻습니다.

메톡시 X04는 아밀로이드 플라크의 β주름 시트 구조에 특이적으로 결합하고 이미징 및 분석을 위해 형광을 유지합니다.

UV 필터가 있는 형광 현미경을 사용하여 메톡시-X04를 여기시키고 방출된 형광을 포착하여 주변 조직에 대해 형광 표지된 아밀로이드 플라크를 시각화합니다.

현미경 스테이지를 조정하지 않고 명시야 모드에서 동일한 영역의 이미지를 캡처하여 조직 구조를 자세히 설명하고 형광 모드를 캡처하여 플라크를 시각화합니다.

이미지 처리 소프트웨어를 사용하여 명시야 및 형광 이미지를 정렬하여 플라크를 해부학적 구조에 정확하게 매핑합니다.

이 이미지는 알츠하이머병 병리학을 연구하기 위해 구조적 맥락 내에서 아밀로이드 플라크의 상세한 시각화를 제공합니다.

정위 마우스 뇌 아틀라스의 도움으로 관심 영역을 포함하는 뇌 절편을 선택하고 각 절편을 24웰 배양 플레이트의 웰에 냉동 보호제에 넣습니다. 그런 다음 일회용 피펫을 사용하여 현미경 슬라이드에 PBS 방울을 추가한 다음 해당 절편을 물방울 위에 놓습니다.

형광 현미경으로 절편을 검사하여 메톡시-X04 표지 A-베타 플라크가 포함된 영역을 식별합니다. 현미경 스테이지를 이동하지 않고 밝은 필드와 형광 모드에서 관심 영역의 이미지를 캡처합니다. 각 이미지는 플라크를 조직 절편의 구조적 영역과 연관시키기 위해 두 필드에서 동일한 영역을 표시해야 합니다.

동물 번호에 따라 촬영한 이미지를 저장하고 이름을 지정합니다. 또한 플레이트의 우물 번호와 촬영한 사진의 필드를 기록하십시오. 이미징이 완료되면 섹션을 지정된 웰에 다시 넣습니다. 섹션이 건조되지 않도록 동일한 절차를 사용하여 시퀀스의 다음 섹션을 검사합니다.

이미지를 정렬하려면 이미지 J에서 동일한 ROI에 대한 명시야 및 UV 필드 이미지를 엽니다. 그런 다음 모자이크 J 플러그인을 사용하여 두 이미지의 가장자리를 정렬합니다. 정렬되고 결합된 이미지를 특정 동물의 번호와 함께 폴더의 우물 번호에 따라 저장합니다. 동일한 동물의 다른 섹션의 이미지를 결합하여 관심 영역의 플라크를 식별하고 위치를 파악합니다.

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마지막 업데이트: 1 8월 2026